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1、漳州水仙组培快繁技术探究摘要以漳州水仙的鳞茎营养器官作为外植体进行组织培养,结果表明:诱导芽的最佳培养基为MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.1mg/L,最佳继代培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L,最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA0.1mg/L,生根率达90%以上。关键词漳州水仙;组织培养;快速繁殖中图分类号S682.2+1文献标识码A文章编号1007-5739(2012)20-0163-01水仙(Narcissustazetavaichimensis)为石蒜科水仙属植物
2、,有超过30个种以及数以百计的变种和品种,漳州水仙(NarcissustazettaL.var.ChinesisRoem)已有400多年的历史,为我国十大传统名花之一。因球大,花多、素雅清香,姿美、香浓又能雕刻成瑰丽多姿的优美艺术造型等誉满中外,为漳州市的一大特产[1-3]o水仙分球繁殖率较低,且易产生退化,大面积栽培种苗数量无法得到满足[4-6]o因此,该研究以漳州水仙的鳞茎作为外植体,探讨了不同培养基配方、不同培养条件对其鳞茎诱导、增殖、生根情况的影响,建立了一套快繁体系,为水仙的快速工厂化生产提供了技术依据。1材料与
3、方法1・1试验材料供试漳州水仙鳞球茎由福建省农科院甘蔗研究所花卉室提供。1.2试验方法1.2.1外植体的低温预处理。准备用于培养的鳞茎,放在温度控制在49的冰箱低温预处理1个月,然后取出置于培养基中进行组织培养。试验结果证实,应用这一方法对提高外植体鳞茎切块的成活率和小鳞茎的诱导形成率有极显著的效果[7]。1.2.2芽的诱导。将低温处理过的鳞茎鳞片作为外植体。取健壮无病的鳞茎,用自来水冲洗干净,去掉外层鳞片,一层层剥离内层鳞片。在超净工作台上先用75%酒精消毒30s,再用0.1%升汞消毒8min,无菌水冲洗4〜5次。消毒好
4、的带鳞茎盘的鳞茎片切成1.0cmX1.5cm大小的块体,分别接种于4种激素组合的培养基上进行小鳞茎的诱导和分化(每瓶2个外植体)。培养基附加蔗糖3.0%,琼脂0.7%。1.2.3培养条件。以MS为基本培养基,附加不同种类和质量浓度的激素,pH值5.8,光照2000lx,光照时间每日12h,温度为(20±1)°Co2结果与分析2.1不同激素水平对芽诱导的影响将灭菌处理的外植体接种到不同激素水平的培养基上进行起始培养,7d后外植体开始膨大,25d后芽苗萌发生长,结果见表1。可以看出,用不同浓度的6-BA进行处理,其诱导率有明显
5、差异,随着激素浓度的增加,水仙鳞茎盘诱导小芽数也随之增加,其中以MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.1mg/L的诱导效果最好。2.2鳞茎芽的继代增殖培养把分化后的鳞茎纵向切割,接种到不同浓度6-BA处理的培养基上30d后调查,结果见表2。可以看出,以MS+6-BA3mg/L+NAA0.5mg/L激素组合为较适配方,增殖系数3.6。2.3不同种类生长素对芽苗生根的影响将高3cm以上的鳞茎苗芽,分切转接于不同的诱导生根培养基上,20d后统计调查结果见表3。可以看出,芽苗在5种培养基上均能生根,而以1/2MS+NAA0.1m
6、g/L+IBA0.1mg/L组合的表现最佳,生根率达到90%。2.4炼苗与移栽将已生根的植株移出培养室,先放在散射光下炼苗4〜5d,然后洗去培养基,移栽于泥炭土中,保持温度在25£以下,湿度在85%以上,并注意覆盖遮阳网,成活率可达90%以上。3结论与讨论(1)在水仙组培中发现,随着继代次数的增多,个别组培鳞茎芽出现玻璃苗,这种苗不能继续扩繁只能弃去。出现这一现象可能与培养基种类、光照强度、温度等有较大的关系,水仙为喜光性植物,试验条件中的光照无法满足其对光的需求,如何克服玻璃化现象,有待进一步探索。(1)带鳞茎盘的茎块是
7、水仙组培取材的最适部位[1],该试验也进一步验证了这一结论,在继代增殖扩繁中,MS+6-BA3mg/L+NAA0.5mg/L是较好的配方组合。(2)该试验的生根率虽达90%,但发根数较少,一般只有2条左右,筛选一个较适合水仙生根的最佳配方,是保证水仙组培移植成活的关键之一。4参考文献[1]王俐,杨德,龙春林•中国水仙的离体培养及植株再生[J]・云南农业大学学报,2004,19(5):616-618.[2]李招文,唐道一•水仙组织培养的研究[J]・艺学报,1982,9(4):65-68.:3]周威,张正伟,李云飞,等.2个水
8、仙栽培品种离体培养诱导技术研究[J].种子,2008,27(3):5-8.[4]谢嘉华,袁建军.中国水仙(Narcissustazettavar.ehinensis)的组织培养[J]・生物学杂志,2002,19(3):30-36.[5]崔文山,周威,罗凤霞,等•激素对水仙组培苗生根的影响[J]•安徽农业