大麦hvlec1基因的克隆及其表达特征分析

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1、大麦HvLEC1基因的克隆及其表达特征分析李颖波1,2*,郭桂梅1,2,刘成洪1,2,何婷1,2,高润红1,2,徐红卫1,2,陈志伟1,2,陆瑞菊1,2,黄剑华1,2**,(1上海市农业科学院生物技术研究所,上海201106;2上海市农业遗传育种重点实验室,上海201106) 摘要:植物LEC蛋白是NF-Y转录因子的一类B亚基,在植物胚状体形成过程中起重要作用。为了研究大麦小孢子体外培养形成胚状体的机理,本研究利用RACE技术在大麦中克隆了一个大麦新的HvLEC1基因,该基因cDNA全长为1004bp,开放阅读框全

2、长为597bp,,编码198个氨基酸,其蛋白1-59位氨基酸含有LEC结构域,命名为HvLEC1。HvLEC1在大麦的根、茎、叶和小孢子培养过程中均能表达,其中小孢子培养7天时表达量最高;对两种不同大麦材料BI04、基19小孢子培养7(d)天时HvLEC1在大麦材料品系BI04中的表达量比基19高,BI04愈伤产量也比基19高,和19d愈伤产量分析表明,HvLEC1表达量和愈伤产量有相关性;受盐胁迫后HvLEC1在大麦的根中快速上调表达,推测提示HvLEC1的功能与小孢子胚状体发生和逆境胁迫响应相关的功能可能不仅参

3、与与小孢子胚状体发生和,而且参与盐胁迫响应相关。关键词:大麦;转录因子;小孢子;胚状体发育发生;盐胁迫;表达CloningandexpressionanalysischaracterizationofHvLEC1inHordeumvulgareL.LiYying-bo1,2*,GuoGgui-mei1,2,LiuCcheng-hong1,2,HeTting1,2,GaoRrun-hong1,2,XuHhong-wei1,2,ChenZzhi-wei1,2,LuRrui-ju1,2,HuangJjian-hua1,2

4、**(1BiotechResearchInstitute,ShanghaiAcademyofAgriculturalSciences,Shanghai201106;2ShanghaiKeyLaboratoryofAgriculturalGeneticsandBreeding,Shanghai201106)Abstract:PlantLEAFYCOTYLEDON(LEC)proteins,whichbelongtotheNF-YtranscriptfactorBsubunit,whichplaycentralrole

5、inplantembryogenesis.ToinvestigatethemechanisminofmicrosporeinducedembryoofinvitroinbBarley,anovelLECgene,HvLEC1,wasclonedfrombBarleyusingtheRACEmethod.Theisolatedfull-lengthcDNAsequenceofHvLEC1was1004bp,containinga597-bpopenreadingframe(ORF)codingfor198aminoa

6、cids.ThededucedaminoacidsequenceofHvLEC1containedaLECdomainlocatedbetweenaminoacids1and59.HvLEC1canbedetectedinroots,stems,leaves,anddifferentdaysoftheculturedmicrospores,andpresentedthehighestexpressionin7daysofculturedmicrospores.TheexpressionofHvLEC1at7days

7、ofculturedmicrosporesinBI04washigherinbarleylineBI04thanthatinbarleylineJi19at7daysofculturedmicrospores,andcallusyieldat21daysofculturedmicrosporesofwasalsohigherinBI04wasmorethanthatinJi19at21daysofculturedmicrospores,indicatin,whichrevealedgedthattheremight

8、beahascorrelationbetweentheexpressionlevelofHvLEC1andmightbeinaconsistentwiththecallusyield.TheexpressionofHvLEC1canalsobequicklyup-regulatedinbarleyrootbysaltstress,whichsuggested

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