翘嘴红鲌热休克蛋白60的基因克隆及其表达特征分析.pdf

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1、第35卷第2期2016年3月浙江海洋学院学报(自然科学版)JournalofZhejiangOceanUniversity(NaturalScience)V01.35No.2Mar.,2016文章编号:1008—830X(2016)02—0105—08MolecularCloning,CharacterizationandExpressionAnalysisofHeatShockProtein60inErythroculterUishaeformisDAIDong,YANGYu-hong(CollegeofAnimalScienceandT

2、echnology,NortheastAgriculturalUniversity,Harbin150030,China)Abstract:Intllepresentstudy.thecDNAofheatshockprotein60fromErythrocuherilishaeformis(EiH-SP60)wasclonedbythecombinationofhomologycloningandrapidamplificationofcDNAends(RACE)ap—proaches.711lefull—lengtheDNAofEiHSP

3、60wasof2323bp。includinganopenreadingframe(ORF)of1728bpencodingapolypeptideof575aminoacidswithpredictedmolecularweightof61.26kDaandtheoreticalisoeleetricpointof5.27.BLASTanalysisrevealedthatEiHSP60sharedhishsimilaritywithotherknownHSP60s,andoneconservedChaperonin60signature

4、wasalsoidentifiedinEiHSP60,whichindicatedthatEiHSP60shouldbeamemberoftheHSP60family.ThemRNAofEiHSP60Wasconstitutivelyexpressedinalltestedtissuesofuntreatedtopmouthcuher,includingbrain,muscle,kidney,liver,skin,spleen,heart,gillandintestinewiththehighestexpressionlevelinthel

5、iver.Fluorescentreal—timequantitativeRT-PCRWasusedtoexaminetheexpressionoftheEiHSP60geneintopmouthculterafterthechallengewithU)S.Acleartime—de-pendentexpressionpatternofEiHSP60wasfoundaftertheU玛challenge.andtheup-regulatedmRNAex—pressionofEiHSP60intopmouthcuherafterU)Schal

6、lengeindicatesthattlleHSP60geneiSinducibleandin-volvedinimmuneresponses.TheseresultssuggestthatEiHSP60playsanimportantroleinimmuneresponsesintopmouthculter.‘Keywords:Erythroculterilishaeformis;heatshockprotein60;genecloning;characterizationanalysisCI。Cnumber:S9】7.4Document

7、code:A翘嘴红鲔热休克蛋白60的基因克隆及其表达特征分析戴东,杨雨虹(东北农业大学动物科技学院,黑龙江哈尔滨150030)摘要:利用同源克隆和RACE技术克隆了翘嘴红鲐热休克蛋白HSP60eDNA全长序列,并对HSP60基因的序列特征进行了分析。EiHSP60eDNA序列长2323bp,开放阅读框为1728bp,编码575个氨基酸,其编码蛋白相对分子量为Receiveddate:2016--01-10收稿日期:2016—0l—lOFundproject:TheProgramforHeilongjiangscienceandtechnol

8、ogy(GA068203_4—3)基金项目:黑龙江省科技计划项目(GA068203--4-3)Biography:DAIDang(1992-),Male,ShandongZaoz

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