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1、氧化低密度脂蛋白通过氧化应激诱导造血干细胞衰老张先平1，张贵海2，陈斌3，刘俊1，徐春燕1，姜蓉1，王璐1，王亚平1(400016重庆，重庆医科大学干细胞与组织工程研究室，组织学与胚胎学教研室1；563003贵州遵义，遵义医学院附属医院肿瘤科2；277400山东枣庄，山东省枣庄市台儿庄区中医院急诊科3)[摘要]目的探讨氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）体外诱导造血干细胞(HSC)衰老的可能机制。方法通过免疫磁性分选法分离纯化小鼠HSC，与ox-LDL共培养，运用衰老相关的β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色、细胞周期分析及混合集落培养(CFU-Mi
2、x)观察ox-LDL对HSC生物学特性的影响。流式细胞术与免疫荧光检测HSC产生活性氧（ROS）的量；Southernblotting和TRAP-PCR法检测HSC端粒长度和端粒酶活性，酶学比色法检测细胞培养上清液超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）及丙二醛（MDA）含量。结果ox-LDL诱导HSC呈现典型的衰老生物学表现：SA-β-Gal染色阳性细胞率显著增高（P<0.01）；G0/G1期比例明显增加，S期显著减少（P<0.01）；CFU-Mix数量显著减少（P<0.01）。衰老HSC端粒缩短（P<0.05），端粒酶活性降
3、低（P<0.05）。衰老HSCROS含量显著增加（P<0.01），细胞培养上清液中SOD、GSH-Px活力下降、MDA含量增加（P<0.05）。结论ox-LDL能通过氧化应激诱导HSC衰老，其机制可能与ROS的蓄积及抗氧化酶活性受抑引起端粒功能异常有关。[关键词]衰老；造血干细胞；氧化低密度脂蛋白；氧化应激OxidationlowdensitylipoproteininducesagingofhematopoieticstemcellsbyoxidativestressZhangXianping1,ZhangGuihai2,ChenBin3,Liu
4、Jun1,XuChunyan1,JiangRong1,WangLu1，WangYa-ping1（1LaboratoryofStemCellandTissueEngineering,DepartmentofHistologyandEmbryology,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing,400016;2DepartmentofOncologyofZunyiMedicalCollageAffiliatedHospital,ZunyiGuizhou,563003,China;3DepartmentofEmergenc
5、y,TaierzhuangtraditionalChinesemedicalhospital,ZaozhuangShandong,277400,China）[Abstract]ObjectiveToexploretheunderlyingmechanismthatOxidationlowdensitylipoprotein(ox-LDL)inducedagingofhematopoieticstemcells(HSC)invitro.MethodMiceHSCwasisolatedbymagneticcellsorting(MACS)andwasc
6、ulturedwithox-LDL.CellcycleidentifyagingHSC.CFU-Mixcultivationwasusedtoevaluatethepotencyofdifferentiationin[基金项目]国家自然科学基金（81173398）[通信作者]王亚平，电话（023）68485968，E-mail:ypwangcq@yahoo.cnTRAP-PCR,respectively.TheactivitiesofSODandGSH-Pxandthelevelsofmalondialdehyde（MDA）insupernatan
7、tthatHSCculturedIMDMweredetectedbychemicalcolorimetricmethod.ResultsExogenousox-LDLinducedHSCagingwascomparedtoHSCwithoutox-LDLtreatmentgroup.BiologicalfeatureofagedHSCasfollow:（1）ThepercentageofSA-β-Galpositivecellswassignificantlyincreased;theratioofG0/G1stageswasstrikinglyi
8、ncreased,whiletheratioSstagewasdecreased;thenumberofCFU-Mixwa
