藏花素促膀胱移行细胞癌t24细胞凋亡的研究

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1、藏花素促膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡的研究赵培，罗春丽，胡宏波，吕纯芳，冀慧莹(重庆医科大学医学检验系，临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室、重庆市重点实验室，重庆　400016)摘要:目的研究藏花素诱导膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡的作用及分子机制。方法通过MTT比色法分析藏花素对T24细胞增殖的影响；应用光镜观察细胞形态学的改变；AnnexinV-FITC/PI荧光双标流式细胞术检测T24细胞周期动力学和凋亡诱导率的影响，RT-PCR和Westernblot检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达变化。结果藏花素能明显抑制T24细胞的增殖，并可导致其形态学

2、的改变；随藏花素作用时间的延长,G0/G1期细胞比例逐渐增加,S期和G2/M期细胞比例逐渐减少，早期凋亡细胞逐渐增多，同时可以上调Bax和下调Bcl-2的基因表达水平。结论藏花素可明显抑制T24细胞的生长，诱导肿瘤细胞凋亡,可能与Bcl-2和Bax等凋亡调控基因有关。关键词：藏花素；膀胱移行细胞癌T24细胞；细胞凋亡；Bcl-2；Bax中图法分类号:R737.14　文献标识码：ACrocininducesapoptosisofbladdertransitionalcellcarcinomacelllineT24ZHAOPei,LUOChun-li,HUHong

3、-bo,LUChun-fang,JIHui-ying(KeyLaboratoryofLaboratoryMedicalDiagnostics,MinistryofEducation,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheapoptosis-inducedmechanismofcrocinonbladdertransitionalcellcarcinomacelllineT24.MethodsMTTassaywasusedtoevalu

4、atetheinhibitoryeffectofcrocinonthegrowthofT24cells.Microscopewasusedtoobservethemorphologicalchanges.Thechangesofcellcycleweremeasuredbyflowcytometry.AnnexinV-FITC/PIdoublelabelingflowcytometrywasusedtodeterminethecellapoptoticpercentage.RT-PCRandWesternblotwereusedtodetectBcl-2and

5、Baxexpressions.ResultsThegrowthofT24cellswasinhibitedremarkablyinadose-dependentandtime-dependentmanner.Distinctmorphologicalchangesofcellapoptosiswereobserved.FlowcytometricprofilesrevealedthatcrocinledtoincreaseofthecellsinG0/G1phaseanddecreaseofthecellsinSphase,andthepercentageof

6、cellapoptosiswasalsoincreased.ThemRNAandproteinexpressionsofBaxincreasedandthoseofbcl-2decreased.ConclusionCrocinexertsafineinhibitoryeffectonthegrowthofhumanbladdertransitionalcellcarcinomacelllineT24,maybeduetotheapoptosisregulatedbyBcl-2andBaxpathway.Keywords:crocin;transitionalc

7、ellcarcinomaofbladder;apoptosis;Bcl-2;Bax4藏花素（crocin）是名贵中药材藏红花(crocussativusL,saffron)的化学成分之一，是一种水溶性类胡萝卜素。近年来研究发现，藏花素具有广谱抗癌活性，对白血病、卵基金项目：重庆市科委自然科学基金(CSCT2005BB5309)SupportedbytheNaturalScienceFoundationofChongqing(2005BB5309)作者简介：赵培，女，河北省石家庄人，硕士研究生，主要从事膀胱癌基因诊断和治疗方面的研究。电话：(023)684852

8、23通信作者：罗春丽，电话：(023)