芹菜素诱导膀胱癌5637细胞凋亡研究

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1、【摘要】目的：研究芹菜素对人膀胱癌5637细胞增殖及凋亡的影响。方法:采用20〜80umol/L芹菜素处理5637细胞，MTT法检测膀胱癌5637细胞增殖抑制率；细胞软琼脂克隆形成实验检测细胞成瘤能力的抑制效率；Hoechst33258细胞核染色法观察细胞凋亡的形态学改变。结果：芹菜素呈浓度依赖的抑制5637细胞的增殖；80Pmol/L芹菜素处理组细胞出现核固缩、染色质凝集和核碎片化等典型的细胞凋亡特征；5637细胞的克隆形成能力随着芹菜素浓度增加而显著降低。结论：芹菜素能够抑制人膀胱癌5637细胞的增殖，抑制5637的克隆形成，并诱导

2、细胞凋亡。【关键词】芹菜素；膀胱癌；细胞增殖；细胞凋亡【中图分类号】R285.5【文献标志码】A【文章编号】1007-8517(2016)12-0047-03Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofapigeninontheapoptosisofhumanbladdercancercellline5637.Methods5637cellswereculturedwithdifferentconcentrationsofapigenin，theMTTassaywasusedtoevaluatethecel

3、linhibitionrates.Apoptosisof5637cellswasobservedunderafluorescencemicroscopeusingHoechst33258staining，5637tumorigenicitywasmessauredbysoftcolonyformationassay.ResultsApigenincausesconcentration-dependentinhibitionoftheproliferationofbladdercancer5637cells.5637cellstreate

4、dwithapigeninshowedsignificantmorphologicalchangesofapoptosis，andthecelltumorigenicitywasinhibitedasapigeninconcentrationincreased.ConclusionApigenincaninhibittheproliferationandinduceapoptosisof5637cells.Keywords：Apigenin；Bladdercancer；Proliferation；Apoptosis膀胱癌是最常见的泌尿系

5、统肿瘤，其中移行细胞癌(TransitionalCellCarcinoma,TCC)占90%，又称为尿路上皮癌，其中70%〜85%的移行细胞癌为表浅性膀胱癌［1］。临床中非肌层浸润性膀胱癌的常用治疗方法为经尿道膀胱肿瘤切除术［2］。然而，经尿道膀胱肿瘤切除术后的患者有50%〜80%的复发，10%〜25%的患者复发后发展为肌层浸润性膀胱癌［3］。为了抑制膀胱肿瘤的复发及进一步恶化，化疗以及免疫治疗被广泛用于浅表性膀胱癌患者的术后治疗中。较常用的膀胱内化疗及免疫治疗的药物包括顺铂、丝裂霉素C、卡介苗以及干扰素-a［4-5］。这些方法虽然在一

6、定程度上取得疗效，但是通常给患者带来不可逆转的系统毒性以及严重的膀胱局部刺激，例如出血性膀胱炎等［6］。因此，寻求无毒副作用且有效的膀胱癌治疗药物十分迫切。芹菜素(5,7,4'-三轻基黄酮，Apigenin,API),又称芹黄素，是一种广泛存在于多种水果和蔬菜中的黄酮类化合物，具有多方面的药理作用［7-8］，以抗肿瘤作用最为突出。实验证明芹菜素在体外能够显著抑制多种类型的癌细胞的生长和诱导其凋亡，包括：宫颈癌［9］、卵巢癌［10］、结肠癌［11］、胃癌［12］等，而在膀胱癌中的作用研宄鲜有报道。本实验观察了芹菜素对人膀胱癌5637细胞的

7、生长抑制以及诱导凋亡作用。1材料与细胞1.1试剂芹菜素(质量分数彡98%，批号：22806)购自阿拉丁公司；MTT,低熔点琼脂糖、二甲基亚砜(DMSO)，蛋白酶抑制剂购自Sigma；Hoechst33258,购置南京碧云天。RPMI1640培养基，胎牛血清(Fetalbovineserum,FBS)均购自GIBCO公司；其余试剂均为国产分析纯。1.2细胞株及细胞培养人膀胱癌细胞株5637购自中国科学院上海细胞库；培养于含10%胎牛血清的RPMI1640培养液中，于37°C、5%CO2、95%02细胞培养箱内常规传代培养，取对数生长期细胞

8、用于实验。2实验方法2.1MTT法检测芹菜素对膀胱癌细胞5637增殖的影响将5637细胞以3X103/孔接种于96孔板中，细胞贴壁后分别加入不同浓度的芹菜素（20、40、80umol/L），每孔IOOpI，