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1、·586·现代中西医结合杂志ModernJournalofIntegratedTraditionalChineseandWesternMedicine2007Feb,16(5)雷公藤甲素诱导H22细胞凋亡作用研究居星耀(浙江省湖州市妇幼保健院,浙江湖州313000)[摘要]目的 研究雷公藤甲素对H22细胞的诱导凋亡作用。方法 MTT法测定雷公藤甲素对H22肿瘤细胞的抑制率,并通过细胞形态学观测及DNA凝胶电泳分析检测雷公藤甲素对H22细胞的诱导凋亡作用。结果 雷公藤甲素80μg/L抑制率达41.6%,与浓度成正相关,IC50为85.79μg/L;电镜结果表明,40μg/L以上
2、浓度可明显诱导H22细胞出现凋亡特征;DNA电泳显示明显的梯状条带。结论 雷公藤甲素能诱导H22细胞凋亡,表明其具有一定的抗肝癌作用。[关键词]雷公藤甲素;抗肿瘤;凋亡[中图分类号]R917[文献标识码]A[文章编号]1008-8849(2007)05-0586-03StudyofinducingH22cellapoptosisactionoftriptolideJUXing2yao(HuzhouMaternalandChildHealthHospital,Huzhou313000,Zhejiang,China)Abstract:ObjectiveItistostudythe
3、inducingH22cellapoptosisactionoftriptolide.MethodsTheinhibitionratiooftriptolideonH22tumorcellwasdeterminedwithMTTmethod.TheinducingH22cellapoptosisactionoftriptolidewasob2servedanddetectedwithcellmorphologyandDNAgelelectrophoresisanalysis.ResultsTheinhibitionratioof80μg/Ltrip2tolidewas41.6
4、%.ItwaspositivelycorrelatedwithconcentrationandtheIC50was85.79μg/L.Theelectronmicroscoperesultmanifestedthattheconcentrationoftriptolidemorethan40μg/LcouldobviouslyinducedH22cellshowingapoptosischaracteristics.DNAelectrophoresisshowedobviousladdershapestrap.ConclusionTriptolidecaninduceH22c
5、ellapoptosis,itshowsthattriptolidehascertainantihepatocarcinomaeffect.Keywords:triptolide;anti2tumor;apoptosis 雷公藤甲素(triptolide,TRI)为雷公藤中主要的活性物液继续培养48h,MTT法于570nm处检测各孔吸光度值[1]质,其体内化学性质较稳定并具有较强生物活性。众多研A对照组-ATRI组(A),计算细胞存活率。细胞存活率/%=×A对照组究表明,雷公藤甲素具有很好的抗排异、抗炎、抗生育及抗肿[1-3]100%瘤等作用。诱导肿瘤细胞凋亡是抗癌药物的作
6、用机制之11214 细胞凋亡的诱导 收集上述指数生长期的H22细一,笔者现对雷公藤甲素诱导H22凋亡作用探讨如下。6胞,计数(细胞终浓度2×10个/mL)、设组(TRI药物处理分1实验资料设5个浓度组分别记为a、b、c、d、e:10,20,40,60,80μg/L和111材料及主要相关仪器 雷公藤甲素(深圳市牌牌科技有对照组),接种于100mL培养瓶中。培养24h后收集细胞,限公司);MTT(Thiazolylblue)噻唑兰(美国Amresco0793超进行细胞凋亡的观察。纯);酶标仪(EHSYLABL222568);透射电镜(日本JEOL公司JEM-200CX);H22小
7、鼠肝癌细胞株(由浙江中医药大学1121411 电镜细胞形态观察 处理24h后收集细胞,弃去分子研究所提供);细胞培养试剂为美国Sigma公司产品。培养瓶内上清液,用D-Hanks液冲洗瓶壁3次,用滴管轻轻112 方法地吹打瓶壁,使瓶壁上细胞全部脱落,然后,将其移至离心管,11211 细胞培养 将H22细胞培养于含10%小牛血清、1001000r/min离心弃去上清液,加2.5%戊二醛5mL,轻轻地吹IU/mL青霉素和100IU/mL链霉素的RPMI-1640培养液打使细胞分散,0～4℃静置30min后,
