雷公藤甲素诱导鼻咽癌细胞凋亡作用.pdf

《雷公藤甲素诱导鼻咽癌细胞凋亡作用.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、中国药理学通报ChinesePharmacologicalBulletin2014Aug；30(8)：1147—50·1147·网络出版时间：2014-7—1016：51网络出版地址：http：／／www．enki．net／kems／doi／10．3969／j．issn．1001—1978．2014．08．022．html雷公藤甲素诱导鼻咽癌细胞凋亡作用王秀，张竞竞，张配，孙小锦，刘哲，张鑫宇，刘浩(1．蚌埠医学院药学系，安徽省生化药物工程技术研究中心，安徽蚌埠233030；2．蚌埠医学院第一附属医院肿瘤内科，安徽蚌埠233003)doi：10

2、．3969／j．issn．1001—1978．2014．O8．022类风湿作用，还具有较强的抗肿瘤作用。研究发现，文献标志码：A文章编号：1001—1978(2014)08—1147—04其对某些肿瘤细胞的杀伤毒性甚至高于紫杉醇和阿中国图书分类号：R284．1；tt．329．25；R739．630．22霉素I3。但在鼻咽癌中的研究较少，本文拟将雷摘要：目的探讨雷公藤甲素诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用及公藤甲素作用于鼻咽癌CNE-2Z细胞株，观察其抗机制。方法MTI'测定雷公藤甲素对CNE．2Z细胞的抑制鼻咽癌的作用，并探讨作用的机制。作用；碘化丙啶(

3、propidiumiodide，PI)染色测定雷公藤甲素1材料与方法．对鼻咽癌细胞凋亡的影响；Westernblot测定葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulatedprotein78，GRP-78)、Akt的表达及Akt1．1试剂雷公藤甲素(天津美伦医药集团)；的磷酸化水平；ROS荧光探针一二氢乙啶测定细胞内活性氧CNE．2Z细胞株，蚌埠医学院药学系生化药理实验中(reactiveoxygenspecies，ROS)的水平。结果M33"显示，雷心提供；RPMI1640培养基(Gibco公司)；兔抗人公藤甲素对鼻咽癌细胞CNE-2Z的抑制

4、作用随浓度增加及GRP78、Akt、pAkt抗体、鼠抗人p．actin抗体购自时间延长而增强；PI结果显示，雷公藤甲素能明显诱导鼻咽SantaCruz公司；山羊抗鼠IgG、山羊抗兔IgG购自癌细胞的凋亡，25、50和100nmol·L的雷公藤甲素作用细北京中杉金桥生物技术有限公司；ROS荧光探针一胞24h，CNE一2Z细胞的凋亡率分别为14．0％、26．9％和DHE(威格拉斯生物技术有限公司)。34．4％；Westernblot显示，雷公藤甲素对CNE．2Z细胞GRP一1．2方法78表达无明显影响，但可减弱Akt的表达及磷酸化水平；氧1．2．1

5、药液配制雷公藤甲素用二甲基亚砜(DM—化应激实验结果表明，雷公藤甲素作用4h后，能增加鼻咽癌细胞CNE-2Z内ROS的水平。结论雷公藤甲素具有抑so)配成5．5mmol·L贮液，一20~C保存。临用前制鼻咽癌细胞CNE-2Z增殖的作用，且具有浓度与时间依赖以RPMI1640培养基稀释成62．5、125、250、500、1性。其机制可能是雷公藤甲素通过诱导氧化应激，抑制细胞000、2000及4000nmol·L。。。内Akt的表达及其磷酸化，调节下游的信号通路，进而促进1．2．2细胞培养CNE一2Z细胞接种于含10％新CNE-2Z细胞的凋亡。生小

6、牛血清、青霉素(1×10U·L)、链霉素(100mg·L)和NaHCO3(33．7mg·L)的RPMI1640关键词：雷公藤甲素；鼻咽癌细胞；CNE-2Z；氧化应激；活性培养液中，体积分数0．05CO、饱和湿度、37c【=培养氧；凋亡箱中培养，每2～3天传代1次。1．2．3MTF测定细胞的增殖活性细胞接种于雷公藤甲素(triptolide，TPL)又称雷公藤内酯、96孔细胞培养板中，5×10个每孔。培养24h，吸雷公藤内酯醇，是从卫矛科雷公藤属植物中分离的弃培养液，加新鲜含10％血清培养液180Izl，对照一种环氧二帖类内酯化合物，是治疗类风湿

7、病雷公组加入含0．01％DMSO的培养液20txl；药物处理组藤片和雷公藤多苷片等制剂的主要有效成分。加入不同浓度的雷公藤甲素溶液各2Ol，使终浓度现代研究表明，雷公藤甲素不仅具有高效的抗炎、抗分别为6．25、12．5、25、50、100、200及400nmol·收稿日期：2014～04—15，修回稿日期：2014—05—12L。。，其中DMSO含量不超过0．01％；同时设立调零基金项目：国家自然科学基金资助项目(No81000992)；蚌埠医学院组(无细胞组)，加入200tzl培养液。培养12、24、科研项目(byky1346)48h后加入2

8、0txlMTT(以PBS配成5g·L)，37作者简介：王秀(1983一)，女，硕士，讲师，研究方向：生化药理学qC继续培养4h，弃上清，每孔加入150