高氧对早产鼠肺泡ⅱ型上皮细胞的影响及神经肽p物质的保护作用

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1、高氧对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响及神经肽P物质的保护作用黄波，付红敏，杨鸣，方芳，匡凤梧，许峰(重庆医科大学附属儿童医院急诊科，重庆400014)摘要：目的探讨高氧对离体培养的早产大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(typeIIalveolarepithelialcells，AECⅡ)的影响及感觉神经肽P物质(substanceP，SP)的保护作用。方法（1）分离纯化原代早产鼠AECⅡ，随机分为:空气暴露组、高氧暴露组、SP干预空气暴露组、SP干预高氧暴露组，空气暴露组氧体积分数为0.21（21%），高氧暴露组氧体积分数为0.95(95%)，SP干预组于暴露前加入SP1´10-6mo

2、l/L,在置于氧体积分数为0.21(21%)和0.95(95%)中各组分别暴露12、24、和48h，电镜观察AECⅡ的形态变化；XTT法及流式细胞仪测定其增殖率和凋亡率。(2)剖宫取出SD大鼠孕2ld(足月为22d)早产鼠，随机分为空气暴露组和高氧暴露组，空气暴露组氧体积分数为0.21(21%)，高氧暴露组氧体积分数为0.95(95%)，分别于暴露3，7，14d后，取肺组织测定其SP含量。结果与空气暴露组比较，高氧组暴露12、24、48h后AECⅡ增殖率明显降低，凋亡率明显增加，而SP干预后其增殖率明显增加，凋亡率明显下降，形态学的损伤也有明显的改善。高氧暴露3、7、14

3、d与空气暴露组比较肺组织SP含量显著降低，且随高氧暴露的延长,SP含量降低明显。结论P物质可促进AECⅡ的增殖并抑制AECⅡ的凋亡，在高氧暴露下对AECⅡ可起到保护作用，高氧暴露可导致肺组织SP含量的变化。关键词：P物质;高氧;Ⅱ型肺泡上皮细胞EffectofhyperxiaonthetypeIIalveolarepithelialcellsofprematuralratsandprotectionofneuropeptidesubstancePHUANGBo,FUHongming，YangMing,FANGFang,KUANGFeng-wu,,XUFeng,PICU,C

4、hildren,sHospital,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing40014,ChinaCorrespondingauthor：XUFengAbstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectofhyperxiaonprematuralratstypeIIalveolarepithelialcells(AECⅡ)culturedinvitroandtheprotectionofneuropeptidesubstanceP(SP).MethodsI.PrematuralratsAECⅡwasisolate

5、dandpurifiedandrandomlydividedintofollowinggroups,includingairexposuregroup,hyperxiaexposuregroupandSPtreatmentgroup.Oxygencapacityfractionwas21%inairgroupcomparedto95%inhyperxiagroup.SPtreatmentgroupwasadded1×10-6mol/LSPbeforeexposedto21%and95%oxygenfor12,24and48hrespectively.Morphologic

6、changeofAECⅡwasobservedunderelectronmicroscope.XTTandflowcytometrywereemployedtodetectgrowthrateandapoptosisofAECⅡ.II.PrematuralSDrats(fulltermis22d)whichwere21doldweretakenoutbyopeningwombs.Theyweredividedrandomlyintotwogroupsincludingairexposuregroup(21%oxygen),hyperxiaexposuregroup(95%

7、oxygen).Thetwogroupswereexposedtodifferentoxygenfor3,7,14dandthenthelevelofSPinlungtissuesweredetermined.ResultsComparedtoairexposuregroup,growthrateofAECⅡinhyperxiaexposuregroupdecreasedsignficantlyafterexposedtohyperxiafor12,24and24h.Nevertheless,significantincrea