不同剂量碱性成纤维细胞因子对人类胚胎干细胞生长,凋亡和dna完整性的影响

不同剂量碱性成纤维细胞因子对人类胚胎干细胞生长,凋亡和dna完整性的影响

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1、不同剂量碱性成纤维细胞因子对人类胚胎干细胞生长、凋亡和DNA完整性的影响不同碱性成纤维细胞因子剂量影响人类胚胎干细胞生长速度、凋亡和DNA完整性罗树伟,林戈,孙争,谢平原,刘天成,卢光琇(410078长沙,中南大学生殖与干细胞研究所,国家干细胞工程技术研究中心)[摘要]目的:探讨碱性成纤维细胞因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)浓度对人类胚胎干细胞(humanembryonicstemcells,hESCs)特性的影响。方法:建立化学限定性hESCs培养体系,以有饲养细胞培养体系作为参照,比较4ng/ml、40ng/ml和100ng/mlF

2、GF2bFGF对hESCs多能性标记、细胞周期、细胞凋亡和DNA完整性影响。结果:不同浓度FGF2bFGF对hESCs特性产生影响,第一,低浓度FGF2bFGF(4ng/ml)足以维持hESCs在化学限定性培养基(基础培养基DMEM/F12,N2andB27,简称NB体系)中培养;第二,FGF2bFGF可以抑制hESCs细胞凋亡,并且具有剂量依赖性,而对hESCs细胞周期没有影响;第三,FGF2bFGF有助于hESCsDNA完整性维持,在NB体系加入4ng/mlFGF2bFGF时,hESCs在DNA水平上存在75个异常区域,而在加入40ng/mlFGF2bFGF时,只存在1个

3、异常区域。结论:总的来说,高剂量FGF2bFGF由于助于hESCs体外快速扩增和hESCsDNA完整性维持,在hESCs体外培养过程中提高FGF2bFGF浓度为hESCs体外培养所必需。[关键词]人类胚胎干细胞;饲养细胞;碱性成纤维细胞生长因子;比较基因组杂交,(关键词数量太少,三个以上);[中图分类号]R394.2;Q256[基金项目]国家自然科学基金(2006AA02A102)[通信作者]卢光琇,E-mail:lgxdirector@yahoo.com.cnDifferentbasicfibroblastgrowthfactorconcentrationsaffecthu

4、manembryonicstemcellsgrowthrate,apoptosisandDNAintegrityinchemicaldefinedmediumLuoShuwei,LinGe,SunZheng,XiePingyuan,LiuTiancheng,LuGuangxiu(InstituteofReproductionandStemCellEngineering,CentralSouthUniversity,StemCellEngineeringTechnologyResearchCenterofChina,Changsha,HunanProvince410078,PR

5、China)[Abstract]ObjectiveTocomparetheconcentrationseffectsofbasicfibroblastgrowthfactor(FGF2bFGF)toHumanembryonicstemcells(hESCs).Method:achemicaldefinedhESCsculturesystemwasestablished,andthreeconcentrationsofFGF2bFGF(4ng/ml,40ng/mland100ng/ml)tohESCscharacteristics(cellmakers,cellcycle,ap

6、optosis,andDNAintegrity)wereanalyzedcomparisontofeederculturesystem.Results:Wefoundthattheconcentrationofbasicfibroblastgrowthfactor(namelyFGF2bFGF)haddifferentinfluencestohESCscharacteristics.Firstly,4ng/mlFGF2bFGFissufficienttosupporthESCsundifferentiatedstateinachemicaldefinedmedium(cons

7、istingofN2andB27,namedNBsystem),higherdosesofFGF2bFGFwerenotessentialforhESCsmaintenances.Secondly,FGF2bFGFcaninhibithESCsapoptosiswithdosageeffectstoshortencelldoubletime,andhadnoeffecttohESCscellcycle.Thirdly,highdosesofFGF2bFGFcanmaintainhESCsDNAinteg

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