碱性成纤维细胞生长因子对大鼠椎间盘细胞凋亡及基质代谢的影响

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1、兰州大学硕士学位论文碱性成纤维细胞生长因子对大鼠椎间盘细胞凋亡及基质代谢的影响姓名：李金德申请学位级别：硕士专业：外科学（骨外科）指导教师：陈根元20080501兰州大学硕七学位论文碱性成纤维细胞生长因子对大鼠椎间盘细胞凋亡及基质代谢的影响摘要目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养大鼠椎间盘细胞及基质代谢的影响。方法建立大鼠椎间盘细胞培养体系，体外单层培养大鼠椎间盘细胞，取生长良好的第2代细胞实验，使用抗．Fas抗体诱导凋亡，加入不同浓度(10，100，1000烬几)的碱性成纤维生长因子影响椎问盘细胞的凋亡及代谢过程，利用流式细胞仪．

2、PI标记法检测椎间盘细胞凋亡情况；利用氯胺．T法和DMB比色法分别检测细胞培养液中羟脯氨酸及蛋白多糖的含量。结果①不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子(10，100，l000I．tg／L)椎问盘细胞凋亡率(87．62+11．06)，(53．30土9．23)，(16．75士4．21)％与对照组比较差异均有显著性意义(火0．01)。②随着碱性成纤维细胞生长因子浓度的增加(10，100，l000pg／L)，羟脯氨酸含量、蛋白多糖含量明显增加，【羟脯氨酸含量(6．71士0．33)，(9．12A：0．41)，(11．58士0．12)gg／L，P<0．01；蛋白多

3、糖含量(23。21：t：2．87)，(32。45士5。23)，(37．18+3．22)腭几，P<0。01]。碱性成纤维细胞生长因子的浓度与两者呈正相关(ra=0．972，P<0．01；rb=0．907P<0．01)。结论碱性成纤维细胞生长因子可以抑制体外培养的椎间盘细胞凋亡，促进椎间盘细胞基质中胶原及蛋白多糖的合成。关键词碱性成纤维细胞生长因子椎问盘细胞凋亡羟脯氨酸蛋白多糖兰州大学硕士学位论文EffectsofbasicFibroblastGrowthFactoronIntervertebralDiscCellApoptosisandMatrixM

4、etabofisminRatsAbstractobiectiveToobservetheeffectofbasicfibroblastgrowthfactors(bFGF)onapoptosisandmatrixmetabolismofratintervertebraldisccellculturedinvitro．MethodsRatintervertebmldisccellswereculturedinvitroinmonolayer．Thewell--grownintervertebraldisccellsofsecondgeneration

5、wereinducedbyanti·-Fasantibodytoapoptosis，treated、析thbFGFsofdifferentconcentrations(10，100，1000I-tg／L)．Byusingflowcytometry(FCM)，theapoptosisofthecellsstained、vitllPropidiumIodide(PI)wasAssayed．Thelevelofhydroxyprolineandproteoglycaninculturemediumweredetected、析thchloraminesTm

6、ethodandDMBchromometrymethod．ResultsO)Comparedwithcontrolgroup，theapoptoticratiooftheintervertebraldisccellscausedbydifferentconcentrations(10，100，l000ttg／L)ofbFGFshadasignificantdifference(87．62-q：11．06％，53．30-a：9．23％，16．75+4．21％：P<0．01)．②Thecontentofhydroxyprolineandproteogl

7、ycaninbFGFsculturemediumwassignificantlyincreasedastheincreaseofconcentrationofbFGFs【hydroxyproline(6．71+0．33)，(9．12-土0．41)，(11．58+0．12)p．g／L，P<0．01；proteoglycan(23．21+2．87)，(32．45+5．23)，(37．18+3．22)lxg／L，P<0．01]．TheconcentrationofbFGFswaspositivelycorrelatedwithhydroxyproline

8、andproteoglycan．(ra=0．972，P<0．01：rb=0．907P<0．01)．ConclusionbF