mrps5对膀胱癌细胞增殖能力及干性特征的影响

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1、DOI:10.16016/j.1000-5404.201409127MRPS5对膀胱癌细胞增殖能力及干性特征的影响刘启梁1,刘丽梅2,刘春刚2,钱程2第一作者:刘启梁,电话:13022386248[通信作者]钱程,电话:(023)68765957,E-mail:cqian8634@gmail.com,黄庆愿1黄庆愿,电话:(023)68752391,E-mail:huangqingyuan@tmmu.edu.cn(第三军医大学:高原军事医学系病理生理学与高原病理学教研室1,西南医院病理科2,400038重庆)[

2、摘要]目的探讨线粒体核糖体蛋白S5(mitochondrialribosomalproteinS5,MRPS5)对人膀胱癌细胞的增殖能力及其中干细胞干性特征的影响。方法westernblot检测人膀胱癌及癌旁正常组织MRPS5的表达;构建靶向干扰MRPS5的慢病毒载体,感染膀胱癌细胞株T24,以干扰Scramble序列作为对照,westernblot检测MRPS5干扰效率;细胞活力实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期;细胞成球实验观察成球能力;westernblot检测肿瘤干性转录因子Nanog,Oct

3、4,c-Myc和Sox2的表达;小鼠皮下移植瘤实验观察T24体内成瘤能力。结果MRPS5在膀胱癌组织中的表达高于癌旁正常组织;慢病毒干扰载体PLKO.1-shMRPS5有效,且干扰MRPS5表达后T24细胞增殖能力下降(P<0.05),周期阻滞于S期,干性因子表达均下调,成球率无变化(P>0.05)但成球直径明显减小;同时小鼠体内成瘤体积减小[(0.784±0.278)vs(0.500±0.245)cm3,P<0.05],瘤重量减轻[(0.862±0.372)vs(0.412±0.248)g,P<0.05]。结

4、论MRPS5在膀胱癌中较高表达,且干扰MRPS5表达能抑制T24增殖并抑制T24中的干细胞生物学特征。[关键词]膀胱癌;线粒体核糖体蛋白S5(MRPS5);增殖;肿瘤干细胞[中图法分类号]R730.23,R737.14[文献标志码]AEffectofMRPS5onproliferationandstemnessofbladdercancercellsLiuQiliang1,LiuLimei2,LiuChungang2,QianCheng2,HuangQingyuan1(DepartmentofPathophys

5、iologyandHighAltitudePathology1,CollegeofHighAltitudeMilitaryMedicine,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing,400038,China;DepartmentofPathology2,SouthwestHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing,400038,China)[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheeffe

6、ctofmitochondrialribosomalproteinS5(MRPS5)onproliferationandstemnessofhumanbladdercancercells.MethodsTheexpressionofMRPS5proteininhumanbladdercancertissuesandadjacentnormaltissueswasdetectedbyWesternblot.LentiviralvectortargetingMRPS5wasconstructedtoinfectbl

7、addercancercelllineT24,andlentiviralvectorwithscramblesequencewasusedascontrol.TheMRPS5interferenceefficiencywasanalyzedbyWesternblot.Thecellproliferationwasdetectedbycellviabilityassay.Cellcyclewasmeasuredbyflowcytometry.Sphereformingabilitywasobservedbysph

8、ereformationexperiment.Theexpressionsofcancerstemcellrelatedtranscriptionfactors(Nanog,Oct4,c-MycandSox2)weredetectedbyWesternblot.SubcutaneoustransplantationtumorexperimentofNOD/SCIDmicewasused

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