MCM3在膀胱癌中的表达及对膀胱癌细胞增殖和侵袭能力的影响

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1、分类号：R737.14单位代码：10159密级：公开学号：201520265硕士学位论文中文题目：MCM3在膀胱癌中的表达及对膀胱癌细胞增殖和侵袭能力的影响英文题目：ExpressionofMCM3inbladdercanceranditseffectontheproliferationandinvasionofbladdercancercells论文作者：李世光指导教师：张哲副研究员学科专业：外科学完成时间：2017年12月中国医科大学硕士学位论文MCM3在膀胱癌中的表达及对膀胱癌细胞增殖和侵袭能力的影响Ex

2、pressionofMCM3inbladdercanceranditseffectontheproliferationandinvasionofbladdercancercells论文作者李世光指导教师张哲副研究员申请学位医学硕士培养单位第一临床学院一级学科临床医学二级学科外科学研究方向泌尿外科学论文起止时间2015年12月—2017年12月论文完成时间2017年12月中国医科大学（辽宁）2017年12月中国医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：本论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究成果，论

3、文中除加以标注的内容外，不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果，也不包含本人为获得其他学位而使用过的成果。对本研究提供贡献的其他个人和集体均已在文中进行了明确的说明并表示谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：日期：年月日中国医科大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的原件、复印件和电子版，允许学位论文被查阅和借阅。本人授权中国医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以

4、采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密（），在年后解密适用本授权书。（保密：请在括号内划“√”）论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日中国医科大学硕士学位论文中文摘要目的：明确MCM3基因在膀胱癌组织、癌旁正常膀胱组织及在膀胱癌细胞系中的表达情况，分析MCM3基因在正常与癌组织中的表达差异，阐明其表达水平与膀胱癌患者临床病理特征之间的相关性和临床意义，同时通过体外细胞实验证实MCM3在膀胱癌细胞增殖和侵袭中发挥的作用。方法：利用膀胱癌组织和癌旁正常膀胱组织标本及膀胱癌细胞系5637

5、和T24，通过实时定量PCR检测膀胱癌组织和癌旁正常膀胱组织MCM3mRNA的表达水平。同时使用实时定量PCR和WesternBlot检测MCM3在膀胱癌细胞系5637和T24中mRNA和蛋白质的表达水平。用脂质体转染法对膀胱癌细胞系进行MCM3特异的siRNA转染，利用CCK8，Transwell等实验对MCM3在膀胱癌细胞增殖、侵袭中的作用进行研究。结果：在临床标本中的检测MCM3的表达水平，膀胱癌组织中表达显著高于癌旁正常组织中的表达，且与膀胱癌浸润性、临床分期、复发和转移正相关。在细胞水平上，MCM3表

6、达水平随着膀胱癌细胞恶性程度的增高而增高。特异性的siRNA转染细胞后进行RNA与蛋白质检测证实，MCM3被有效敲除。CCK8实验显示，MCM3敲除组与对照组相比，敲除组的细胞增殖情况明显受到抑制。Transwell实验结果表明，MCM3被敲除后，细胞的侵袭能力较对照组明显下降。同时通过Westernblot检测MCM3敲除后对膀胱癌细胞中增殖和侵袭相关蛋白的表达情况。结论：MCM3作为DNA复制的特许因子，因此MCM3表达水平能够直接反映细胞增殖状态，这对于各种因细胞周期失调，失控后引发的不典型增生、增生性病

7、变、肿瘤等疾病的诊断和预后，具有非常重要的意义。本实验中显示MCM3可以促进T24、5637膀胱癌细胞的增殖、促进膀胱癌细胞侵袭，这些都表明MCM3在膀胱癌细胞中扮演着促癌基因的作用，是膀胱癌的一种促癌基因。结合近几年国内外对MCM3在肿瘤进展和在肿瘤良恶性鉴别研究，基本证实MCM3在膀胱癌生物学行为中的重要作用。关键词：膀胱癌，MCM3,细胞增殖，细胞侵袭I中国医科大学硕士学位论文AbstractObjective:toinvestigatetheexpressionofMCM3geneinbladderca

8、ncertissues,adjacentnormalbladdertissuesandbladdercancercelllines,andtoanalyzethedifferenceofMCM3geneexpressionbetweennormalandcanceroustissues.Toelucidatethecorrelationbetweentheexpressionlevel