雌二醇对bg-1卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响

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1、分类号：R737.31密级：不保密UDC：610学校代码：11065硕士学位论文雌二醇对BG-1卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响王真真指导教师陈爱平教授学科专业名称妇产科学论文答辩日期2015年5月31日雌二醇对BG-1卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响摘要目的本研究通过应用外源性雌激素（E2）及不同的雌激素受体（ER）调节剂作用于BG-1卵巢癌细胞系，观察E2对BG-1细胞增殖能力和侵袭能力的影响，并进一步探究其可能的作用机制。方法MTT法检测不同浓度的E2对BG-1细胞增殖能力的影响，并检测E2联合不同ER调节剂后，BG

2、-1细胞增殖能力的变化；RT-PCR及蛋白免疫印迹法检测E2及不同ER调节剂作用不同时间后各组细胞中cyclin(细胞周期素)D1和p21的表达水平；ELISA法检测用不同浓度E2处理后，BG-1细胞中MMP-9的分泌水平；Transwell小室侵袭实验检测外源性E2及不同的ER调节剂对BG-1细胞侵袭能力的影响。-9-5-7结果10-10mol/LE2均可明显促进BG-1细胞增殖，且当E2浓度为10mol/L时BG-1细胞的增殖率最高（P＜0.05），ER阻断剂ICI182,780显著降低BG-1细胞的增殖力，ERα

3、激动剂PPT可显著增高细胞增殖力（P＜0.05），ERβ激动剂DPN对细胞增殖力无显著影响（P＞0.05）。ICI182,780可使cyclinD1mRNA和蛋白的表达显著下调，使p21mRNA和蛋白质的表达显著上调，PPT的作-9-5用与ICI182,780大致相反（P＜0.05）；DPN对两种基因的表达均未见明显改变（P＞0.05）。10-10-8mol/L的E2均能引起细胞分泌MMP-9能力增强,并且浓度为10mol/L的E2在作用3小时后BG-1的分泌作用最强。E2显著增强BG-1细胞的侵袭力，PPT具有明显的

4、协同作用，ICI182,780有明显的拮抗效应（P＜0.05）。结论E2主要通过ERα通路增加BG-1卵巢癌细胞的增殖和侵袭能力，ER阻断剂ICI182,780则有着显著的拮抗效应。ERα可能成为抗雌激素治疗的新靶点,有助于临床上寻找更可靠的抗激素治疗药物。硕士研究生王真真（妇产科学）指导教师陈爱平教授关键词：雌激素；卵巢癌；增殖；侵袭；BG-1细胞株ThestudyoftheproliferationandinvasionofBG-1ovariancancercellaftertreatedwithexogenous

5、E2AbstractObjectiveToinvestigatetheproliferationandinvasionofBG-1ovariancancercelllineaftertreatedwithexogenousE2anditsunderlyingmechanism.MethodsTheimpactsofexogenousE2andvariousERmoderatorsontheproliferationofBG-1ovariancancercellweremeasuredbyMTTassay.PCRandW

6、esternblotwereusedtoanalyzetheexpressionsofcyclinD1andp21whenBG-1cellsweretreatedwithdifferentdrugsfor6h,24hand48h.TheexpressionofMatrixmetalloproteinase-9(MMP-9)wasevaluatedbyenzyme-linked-9-5immunosorbentassayaftertreatedwith10~10mol/LE2for3h,6h,12hand24h,resp

7、ectively.TheimpactsofexogenousE2andvariousERmoderatorsontheinvasionofBG-1ovariancancercellweredetectedbyTranswellinvasionassay.ResultsAfterthecellsweretreatedwithdifferentconcentrationsofE2,theproliferationsindifferent-7groupsincreasedcomparedwithblankcontrol.Fu

8、rthermore,theproliferativerateofcellsin10mol/Lgroupwasthehighestamongtheothers.TheproliferationofE2+PPTgroupwassignificantlyhigherthanE2group,whilethatofE2+ICI182,780