mir200c对卵巢上皮性癌细胞侵袭、迁移及增殖能力影响的研究

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1、目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8研究论文miR200c对卵巢上皮性癌细胞侵袭、迁移及增殖能力影响的研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯O"0．99日Ij吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l9附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3l综述微小RNA：肿瘤诊断与治疗的新手段⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47中文摘要miR200c对卵巢上皮性癌细胞侵袭、迁移及增殖能力影响的研究摘要卵巢上皮性癌(epithelialovariancancer，EOC，简称卵巢癌)是女性最常见的妇科恶性肿瘤之一，由于缺乏敏感

3、有效的肿瘤标志物，使得卵巢癌的早期确诊率很低，尽管应用现代抗肿瘤药物配合肿瘤细胞减灭术治疗，晚期卵巢癌患者的5年生存率依然较低，约为30％。术后复发和肿瘤耐药成为卵巢癌治疗的最大难题，因此新的卵巢癌治疗手段的研发是妇科亟待解决的问题。有研究发现包括卵巢癌在内的多种人类肿瘤组织中miR200家族表达谱发生改变；许多学者在对犬的肾细胞和人类的胰腺癌、直肠癌、前列腺癌和乳腺癌的肿瘤组织及其细胞株的研究中发现miR200c可以抑制ZEBl的表达。上皮向间质转化(epithelial．mesenchymaltransition，EMT)与肿瘤的侵袭和转移密切相关。E．cadher

4、in是钙依赖性跨膜粘连蛋白的一种，主要分布于上皮细胞表面，介导细胞间的粘附作用。波形蛋白(Vimentin)是间质细胞骨架中最主要的中间纤维蛋白，Vimentin被认为是间皮细胞的标志蛋白。E盒结合锌指蛋白(zincfingerE．boxbindinghomeobox，ZEB)是一种重要的细胞核转录因子，它与E．cadherin基因的启动子序列中的锌指结构结合可以抑制E—cadherin的表达。间皮素(Mesothelin)是一种肿瘤表面抗原，它在上皮性卵巢癌组织中的表达显著上调。有研究表明间皮素能增强卵巢癌细胞的增殖及粘附侵袭能力。间皮素与CAl25互为配体。国内关于

5、miR200c对卵巢癌细胞的增殖及侵袭迁移能力的影响鲜有报道。目的：通过瞬时转染miR200cmimic，上调卵巢癌细胞株SKOV3、HO．8910细胞中miR200c的表达，观察miR200c对卵巢癌细胞的增殖及侵袭迁移能力的影响，初步探讨miR200c对卵巢癌细胞增殖及侵袭迁移的调控机制。方法：1将SKOV3、HO．8910细胞分别分为：空白对照组、miR200cmimic处理组、negativecontrol处理组，RT-PCR检测各组细胞中miR200c的相对表达量。中文摘要2MTT法检测转染不同浓度miR200cmimic(Onmol／L、50nmol／L、1

6、00nmol／L、200nmol／L)，培养不同时间(24h、对SKOV3、HO．8910细胞的增殖能力的影响。3Transwell小室检测各组细胞迁移及侵袭能力的变化。4应用Westernblotting检测各组中ZEB1、E．cadherin、表达变化。25nmo儿、48h、72h)，Vimentin的5酶联免疫吸附实验检测间皮素和CAl25的表达。6统计方法：试验数据应用SPSS13．0统计软件处理，各实验均重复3次。计量资料以均数4-标准差(i士s)表示，各组间的比较采用单因素方差分析，检验水准铲O．05。当P<0．05时，差异有统计学意义。结果：1RT-PCR

7、检测各组miR200c的相对表达量。SKOV3．mimic和HO．8910．mimic细胞内miR200c的表达与SKOV3和HO．8910相比明显增高(氏O．05)，而SKOV3．neg和HO．8910．neg的miR200c表达与SKOV3和HO．8910相比差异无显著性(胗O．05)。2MTT检测miR200c对SKOV3和HO．8910细胞增殖的影响。转染不同浓度的miR200cmimic后SKOV3与HO．8910细胞的增殖均无明显改变(P>O．05o转染相同浓度的miR200cmimic培养不同的时间对SKOV3、HO一891