trim22sirna对lps诱导的巨噬细胞促炎细胞因子的影响

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1、Trim22siRNA对LPS诱导的巨噬细胞促炎细胞因子的影响孙大康1，安新业2，赵延婷2，宋向芹2（256603山东滨州，滨州医学院附属医院：临床医学实验中心1，检验科2）[摘要]目的探讨Trim30旁系同源分子Trim22特异性siRNA对脂多糖（LPS）诱导的巨噬细胞促炎细胞因子TNF和IL6表达的影响。方法干扰素（IFN）刺激人单核细胞白血病细胞株U937，观察Trim22mRNA表达水平的变化；用佛波酯（PMA）将U937细胞诱导分化为巨噬细胞，观察LPS刺激巨噬细胞时IL6表达的时相变化。用靶向Trim22的si

2、RNA预处理，ELISA观察对LPS诱导的巨噬细胞促炎细胞因子TNF和IL6表达的影响。结果IFN可以显著促进U937细胞Trim22的mRNA表达，同时U937细胞诱导分化的巨噬细胞受LPS刺激时IL6显著升高。靶向Trim22的siRNA可以显著提高LPS诱导的巨噬细胞TNF和IL6的表达。结论Trim22对LPS诱导的巨噬细胞促炎细胞因子TNF和IL6具有负向调节作用。[关键词]Trim22；RNA干扰；脂多糖；巨噬细胞；促炎细胞因子[中图分类号]R392.11[文献标志码]AEffectofTrim22siRNAon

3、LPS-mediatedproinflammatorycytokinesexpressioninmacrophagesSUNDakang1,ANXinye2,ZHAOYanting2,SONGXiangqin2(1ExperimentCenterofClinicalMedicine,2ClinicalLaboratory,AffiliatedHospitalofBinZhouMedicalUniversity，BinZhou256603)[Abstract]0bjectiveToinvestigatetheeffectofsiRNA

4、targetingTrim22,oneoftheparaloguesofTrim30,onLPS-mediatedproinflammatorycytokinesexpressioninmacrophages.MethodsTheexpressionofTrim22inducedbyIFNwasexaminedbyRT-PCRinhumanpromonocyticU937cells.Then,U937cellsweredifferentiatedintomacrophagesbyPMAandLPS-inducedproinfla

5、mmatorycytokineIL6levelsweremeasuredbyELISA.MacrophagesweretransfectedwithsiRNAtargetingTrim22;subsequentlycellswerestimulatedwith500U/mlofIFNfor24handchallengedwithLPStodetermineproinflammatorycytokinesexpression.ResultsExpressionofTrim22showedanincreaseinU937cellsac

6、tivatedwithIFN.Moreover,LPSstimulationcausedpronouncedupregulationofIL6inMacrophages.Asaconsequence,suppressionofTrim22activitybysmallinterferingRNAenhancesTNF,IL6productioninMacrophages.ConclusionTrim22negativeregulateLPS-mediatedproinflammatorycytokinesexpressionin

7、macrophages.[Keywords]Trim22,siRNA;Lipopolysaccharide;macrophages;proinflammatorycytokinesSupportedbyTheProjectofShandongProvinceHigherEducationalScienceandTechnologyProgram(J11LF89),ProgramofScienceandTechnologyDevelopmentofYan'tai(2011078).Correspondingauthor:SunDaka

8、ng,Tel:0543-3258709,E-mail:sdkaaa@163.com目前人类已知有70多种三基序蛋白（tripartite-motifprotein，Trim）家族成员，具有重要的抗病毒[1]作用，并参与细胞的增值、分化