cd147对体外破骨细胞分化成熟的影响

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1、CD147对体外破骨细胞分化成熟的影响廖通权，刘玉刚，胡旭，张莹，余世明，初同伟（400037重庆，第三军医大学新桥医院骨科）[摘要]目的建立破骨细胞体外分化成熟的模型，研究CD147分子对破骨细胞分化成熟的影响。方法从外周血分离单个核细胞，贴壁培养，诱导破骨细胞生成。实验分为对照组、诱导组（30ng/mlRANKL+25ng/mlM-CSF）及阻断组（30ng/mlRANKL+25ng/mlM-CSF+10µg/mlCD147Ab），通过免疫荧光染色和流式细胞术检测CD147分子在培养24、48h

2、破骨前体细胞上的定位表达和表达强度，TRAP染色观察破骨细胞的成熟，Real-timePCR检测培养24、48h破骨前体细胞CD147mRNA、TRAPmRNA的相对表达。结果①CD147分子在破骨前体细胞膜上表达；平均荧光强度：诱导48h组（178.47±4.59）＞诱导24h组（171.18±3.46）＞对照组（159.55±3.65）（P＜0.05），阻断24h组显著降低（P＜0.01）。②阻断组阻TRAP染色阳性细胞（细胞核≥3）数显著少于诱导组（P＜0.01），且破骨细胞体积小。③CD14

3、7mRNA相对表达量：诱导48h组（1.772+0.326）＞诱导24h组（1.393±0.248）＞对照组、诱导48h组（1.772+0.326）＞阻断48h组（1.242+0.355）、诱导24h组（1.393±0.248）＞阻断24h组（0.673±0.175）（P＜0.05）；TRAPmRNA相对表达量：诱导48h组（2.608±0.906）＞诱导24h组（1.810±0.398）＞阻断48h组（0.900±0.128）＞阻断24h组（0.784±0.265）（P＜0.05）；且TRAPmR

4、NA相对表达量与CD147mRNA相对表达量呈正相关关系（R=0.833，P＜0.01）。结论CD147分子在破骨前体细胞膜上表达且参与破骨细胞分化成熟，抑制CD147分子的表达破骨细胞出现成熟障碍。【[关键词】]破骨细胞；CD147；分化成熟[中图法分类号][文献标志码]AEffectofCD147onthedifferentiationandmaturationofosteoclastsinvitroLiaoTongquan,LiuYugang,HuXu,ZhangYin,YuShiming,C

5、huTongwei(DepartmentofOrthopedics,XinqiaoHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing，400037，China)[Abstract]ObjectiveToestablishthemodelofdifferentiationandmaturationofosteoclastsinvitroandtostudytheeffectofCD147onthedifferentiationandmaturationo

6、fosteoclasts.MethodsThemononuclearcellswereisolatedfromperipheralbloodandculturedadherentlytoinduceosteoclastogenesis.Therearecontrolgroup,inductiongroup(30ng/mlRANKL+25ng/mlM-CSF)andblockinggroup(30ng/mlRANKL+25ng/mlM-CSF+10µg/mlCD147Ab).Wedetectedthe

7、positionofCD147onosteoclastprecursorsbyImmunofluorescencestainingandthequantityoffluorescenceintensityofosteoclastprecursorswhichwerecultured24hor48hbyFlowcytometry,andobservedthematuringofosteoclastsbyTRAPstaining.WealsodetectedtheexpressionofCD147mRN

8、AandTRAPmRNAofosteoclastprecursorswhichwerecultured24hor48hbyReal-TimeQuantitativePCR.Result①CD147expressedonthemembraneofosteoclastprecursorsinallgroups.Themeansfluorescenceintensityofeachgroupareasfollows,induction48hgroup(178.47±4.59