钒酸盐氧化法测定血清胆红素的分析评价

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果钒酸盐氧化法测定血清胆红素的分析评价【摘要】目的：对测定胆红素的钒酸盐氧化法进行分析评价。方法：用钒酸盐氧化法测定胆红素，并对其的精密度、稳定性、灵敏度及干扰因素进行分析。结果：钒酸盐氧化法测定胆红素的批内、批间CV【关键词】胆红素；钒酸盐氧化法；肝素抗凝1993年日本学者Tokuda发表了血清胆红素的钒酸盐氧化测定法。随着商品化钒酸盐胆红素氧化法试剂的推广，目前国内用户

2、众多［1］。本文对其精密度、稳定性、灵敏度及干扰因素进行评价和分析。1材料和方法试剂和仪器　　　　试剂钒酸盐总胆红素试剂盒、直接胆红素试剂盒由东瓯生物工程有限公司提供，临床用20%英脱利匹特脂肪乳由华瑞制药有限公司提供，维生素C由湖北中天爱白药业有限公司提供，1200U/ml肝素注射液由天津市生物化学制药厂提供。血红蛋白液的制备：取1份约ml肝素钠抗凝血，反复加入生理盐水洗涤，最后加入蒸馏水离心取上清液，用KX21N血细胞分析仪测Hb为100g/L。仪器日立7060全自动生化分析仪，Sysmex课题份

3、量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果KX21N血细胞分析仪。统计学处理计量资料数据以±s表示，采用配对t检验。P测定原理在pH附近，表面活性剂和钒酸作用于血清TBil，使之氧化成胆绿素，使胆红素所特有的黄色减少，由此测定钒酸作用前后450nm吸光度的变化求出血清中TBil的浓度。在pH附近，当试剂中缺

4、少表面活性剂时，钒酸只与血清中结合胆红素作用，使之氧化成胆绿素，此时测定450nm吸光度下降值求出血清中DBil的浓度。主要测定参数在日立7060型全自动生化分析仪商用钒酸盐氧化法测定血清胆红素主要参数如下:波长450/54nm；温度37°；方法为二点终点法。试剂Ⅰ280μl，样本10μl,反应min,读取第1点吸光度；然后加入试剂Ⅱ0μl，再反应min,读取第2点吸光度。2结果.1精密度用一中值质控物，连续测定20次，再每天测1次，共20d，结果见表1。表1钒酸盐法测定胆红素的精密度从表1可以看出，钒

5、酸盐测定胆红素，批内及批间都有良好的重复性。.2线性范围课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果取TBil为5.μmol/L，DBil为1.μmol/L的低值血清对TBil为68μmol/L、DBil为34μmol/L的患者高值血清分别按1∶5、2∶5、3∶5、4∶5、5∶5的比例稀释，用钒酸盐法测定

6、每份标本的TBil及DBil含量，各浓度均重复测定4次，观察其线性，结果表明TBil在68μmol/L内、DBil在34μmol/L内仍保持良好的直线关系。.3回收试验在TBil浓度为μmol/L，DBil浓度为μmol/L的血清标本中加入ml胆红素标准液。胆红素标准液浓度：高值TBil为μmol/L，DBil为μmol/L；中值TBil为μmol/L，DBil为μmol/L；低值TBil为μmol/L，DBil为μmol/L。测定标本中TBil、DBil浓度。钒酸盐氧化法测定TBil的回收率分别为%、

7、%、%，平均回收率为%；DBil回收率分别为%、%、%，平均回收率为%。　3干扰试验.1肝素干扰试验将新鲜血液分别加入预先备制好的无肝素液、1∶8肝素抗凝液、1∶10肝素抗凝液、1∶12肝素抗凝液20μl，使每毫升含肝素0U、、、，测定TBil、DBil。结果用1∶8肝素抗凝，测定DBil明显降低，P表2肝素对胆红素测定的影响注：*示比较差异有显著性，P.2溶血干扰试验将已知值的100g/L血红蛋白样品，作0，1/2，1/4，1/8，1/16稀释后，分别按1∶9加入高低两个水平临床新鲜血清中进行分析，检

8、测TBil、DBil。结果Hb≤10g/L时对TBil无影响，对DBil有轻度负干扰。Hb≤g/L时对DBil无影响，见表3。课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果表3溶血对胆红素测定的影响.3脂血干扰试验分别取0%～5%的脂肪乳ml加