武陵山血红栓菌深层发酵研究

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果武陵山血红栓菌深层发酵研究作者：陈今朝，王新惠，秦家顺【摘要】目的研究武陵山血红栓菌菌丝体液体培养的最适培养基及培养条件。方法利用液体深层培养法筛选血红栓菌菌丝体的最适培养基和最适培养条件。结果血红栓菌菌丝体液体培养的最适培养基为葡萄糖%，牛肉膏%，磷酸二氢钾%，硫酸镁%，维生素B1mg/ml；最适培养条件为培养液初始，装量7ml/250ml三角瓶装，摇瓶速度180r/min，培养温度25℃，发酵周期d。结论用深层培养法生产武陵山血红栓菌菌丝体，菌丝

2、体的产量最大为/ml。【关键词】血红栓菌；深层发酵；菌丝体血红栓菌Trametessanguinea(L.:Fr.)Lloyd隶属于担子菌亚门、层菌纲、非褶菌目、多孔菌科、栓菌属［1］。血红栓菌夏秋季生于栎、槭、杨、柳等阔叶树和松、杉等针叶树枯倒木上群生或叠生；在我国主要分布于云南、贵州、广东、四川和重庆等省市［2］。血红栓菌具有生肌、行气血、化痰、除风湿、止痒、顺气、止血；有抑制癌细胞作用，对小鼠肉瘤180的抑制率为90%。血红栓菌子实体还含有对革兰氏阴、阳性菌有抑制作用的多孔蕈素。此外，还用于消炎，用火烧研粉敷于疮伤处［1,3］。　　国内外文献课题份量和难易程度要恰当，博士生能

3、在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果对普通灵芝属类木质菌研究较多，对血红栓菌的研究报道较少，对它的菌丝体发酵几乎没有相关的文献报道。在血红栓菌菌丝体成熟后就形成木质化子实体，不易加工。对血红栓的菌丝体发酵工艺条件研究，可以为血红栓菌菌丝体作为原料生产医药产品提供科学依据。1材料菌种血红栓菌，XX08采集自武陵山彭水县桑柘乡野生血红栓菌子实体，经组织分离得到纯菌种。培养基碳源、氮源基础培养基；无机盐基础培养基

4、［4］。方法.1液体发酵将10%种子液接入基础培养基中，培养基装量为7ml/250ml三角瓶，25℃，180r/min振荡培养d［5］。.2菌丝体产量测定方法培养得到的菌丝体经离心、过滤、用纯净水洗涤3次，于60℃干燥箱内烘干至恒重，用电子天平称重。结果.1发酵培养基的筛选.碳源对菌丝体生长的影响将%葡萄糖、蔗糖、乳糖、可溶性淀粉和玉米粉分别加入基础培养基中进行试验，以基础培养基为对照，结果如图1。菌丝体产量以葡萄糖最大为/100ml，比对照增加%；蔗糖最小为mg/100课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。

5、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果ml，比对照增加%。碳源对血红栓菌菌丝体生长的影响大小依次为：葡萄糖>乳糖>玉米粉>可溶性淀粉>基础培基>蔗糖。.氮源对菌丝体生长的影响在基础培养基中分别加入%牛肉膏、黄豆粉、蛋白胨、尿素和硫酸铵进行试验，以基础培养基为对照，结果如图2。菌丝体产量以牛肉膏最大为/100ml，比对照增加%；尿素最差为/100ml，比对照减少%。氮源对血红栓菌菌丝体生长的影响大小依次为：牛肉膏>黄豆粉>蛋白胨>基础培养基>硫酸铵>尿素。.无机盐对菌丝体生长的影响将%硫酸

6、钾、硫酸钙、磷酸二氢钾、硫酸镁和硫酸锰分别加入基础培养基中进行试验，以基础培养基为对照，结果如图3。从图3可见，菌丝体产量以磷酸二氢钾最高为/100ml，比对照增加%；硫酸镁列其次为/100ml，比对照增加%；硫酸钙最低为mg/100ml，比对照减少%。无机盐对血红栓菌菌丝体生长的影响大小依次为：磷酸二氢钾>硫酸镁>硫酸锰>硫酸钾>基础培养基>硫酸钙。.正交实验根据以上实验结果，选择葡萄糖、牛肉膏、磷酸二氢钾和硫酸镁4因素设计4因素3水平L9正交实验，确定血红栓菌菌丝体生长的最适培养基组成。因素和水平见表1。表1L9(34)正交实验因素与水平课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年

7、内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果　　实验结果如表2。从表2可知，葡萄糖的极差值最大为/100ml，其次是牛肉膏、硫酸镁为/100ml和/100ml，磷酸二氢钾最小为/100ml。最佳培养基组成为A3B3C2D1，即葡萄糖%、牛肉膏%、磷酸二氢钾%和硫酸镁%，此时，菌丝体产量为/ml。表2正交实验结