核桃青皮提取物抑制小鼠lewis肺癌生长的实验研究

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果核桃青皮提取物抑制小鼠Lewis肺癌生长的实验研究作者：欧阳瑾，曹志友，王爽，雷钧涛【摘要】目的观察核桃青皮提取物对C57BL/6小鼠体内Lewis肺癌生长的影响。方法复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型，随机分组，分别给予生理盐水、核桃青皮不同浓度的水提物和醇提物治疗，观察肿瘤生长，最后进行统计和分析。结果核桃青皮两种方法所得提取物均对肿瘤有明显的抑制作用，与生理盐水组比较有统计学意

2、义(P【关键词】核桃青皮提取物；Lewis肺癌；肿瘤肿瘤是威胁人类生命健康的最大杀手，尤其是近年来伴随着经济发展课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果带来的环境恶化，使得全球恶性肿瘤患者的人数大大增加。全世界每年因各种肿瘤导致数百万人死亡。由于化学药物的毒副作用较大，限制了在临床上的广泛应用。近年来，从植物中寻求更为

3、环保和安全的药物替代品越来越受到人们的重视。提取植物的有效成分开发药品已成为当前的研究热点之一。中药对提高肿瘤患者的治疗成功率及改善肿瘤病人的生存质量、延长生命方面都有显著疗效，它的抗肿瘤作用越来越得到国际社会的认可。许多药学工作者逐渐把目光转向了植物药的研究，而核桃属植物也因其含有的成分和药理作用而受到越来越多的关注。白桃汤剂为民间祖传秘方，曾为不少病人解除过病痛，临床治愈率达76%，曾在民间广为流传。核桃青皮是白桃汤剂中的主要成分之一，对其提取和分离纯化是吉林省重点课题之一，本研究旨在为该药在临床上的进一步应用提供科

4、学依据。1材料　　Lewis肿瘤细胞株(购于中科院上海细胞库)。健康C57BL/6纯系小鼠雌雄各半，体质量(19±2)g，吉林省长春市生物制品研究所提供。　　核桃青皮XX-09采自吉林省磐石县核桃产区，吉林医药学院药学院药学教研室雷钧涛副教授鉴定为胡桃科核桃属植物核桃楸的外青果皮。自然晾干后，在45℃左右的烘箱中烘干，粉碎过20目筛，然后密封于塑料袋内，置冰箱中备用。　2方法.1造模将小鼠Lewis肺癌细胞置于含10%胎牛血清及DMEM的完全培养液中，在37℃、5%CO2培养箱中培养，2～d更换1次培养液，%胰蛋白酶消化

5、传代。细胞总数达到要求后，台盼蓝拒染法测定活细胞数＞95%，调节细胞浓度为5×106个细胞/ml-1的细胞悬液备用。课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果　　取40只小鼠，雌雄各半，体质量g，于腋后线第6肋间胸腔接种，每只接种，细胞计数为5×10个细胞/ml。建立小鼠肿瘤动物模型。.2核桃青皮提取液制备水提法制备核桃

6、青皮提取液：称取1kg核桃青皮粗粉，按料液比1∶4加入蒸馏水，浸泡3d后倾出上清液，再加入新的蒸馏水冷浸，如此处理4次，将4次所得浸提液抽滤、减压浓缩得水提物浸膏。　　醇提法制备核桃青皮提取液：用95%乙醇代替蒸馏水，按照以上的步骤，得到醇提物浸膏。　　准确称取醇提浸膏g用适当氯仿溶解，定容于50ml容量瓶，配成100mg·ml-1的溶液。　　准确称取水提浸膏5g用适当氯仿溶解，定容于50ml容量瓶，配成100mg·ml-1的溶液，用相同的方法配成200mg·ml-1，300mg·ml-1，400mg·ml-1的溶液备用

7、。.3动物分组造模d后随机分组，每组8只。生理盐水组(A组)：给生理盐水腹腔注射，1次/d；其它各组分别用不同浓度的水提物和醇提物腹腔注射，1次/d。各组均连续给药1d。第17天处死全部小鼠进行指标检测。.4观察项目瘤体积、瘤重：用游标卡尺测量瘤体长径和短径，计算课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果瘤体积，瘤体积=

8、(a长径,b短径)绘制增殖曲线。肿瘤抑制率=(生理盐水组平均瘤重-给药组平均瘤重)/生理盐水组平均瘤重×100%。.5统计学处理采用SPSS13．0统计软件进行统计处理。　3结果　　核桃青皮两种方法所得提取物均对肿瘤有明显的抑制作用(P　4讨论　　Lewis肺癌是常用的筛选抗肿瘤药物的动物模型。本研究将核桃青皮两种方