栀子及其近缘类群的随机扩增多态dna分析

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果栀子及其近缘类群的随机扩增多态DNA分析【摘要】目的探索栀子与其变种雀舌栀子、重瓣栀子及变型水栀子之间的亲缘关系。方法从56个随机引物中筛选出12个引物对栀子及其近缘类群进行RAPD分析，应用分析软件中的Jaccard方法计算任意两样品间的相似系数，用组内聚类方法计算得出聚类树状图。结果共得到251个有效位点。聚类分析显示，栀子与重瓣栀子最先聚类，然后与水栀子聚类，最后与雀舌栀子聚类。结论重瓣栀

2、子与栀子亲缘关系最近，雀舌栀子与栀子的亲缘关系最远。【关键词】栀子；近缘类群；随机扩增多态DNARAPDAnalysisforGardeniajasminoidesandRelativesAbstract：ObjectiveToproberelativerelationshipamongGardeniajasminoides，itsvarietasanditsanalysisforsamplesofGardeniajasminoidesandrelativeswereperformedby1randomprimersscree

3、nedmatrixwasanalyzedbySPSSversionandrescaleddistanceclustercombinewasobtainedbyclusteranalysiswithingroups.ResultsAtotalof51polymorphiclociwereshowedthatGardeniajasminoideswereclusteredwithG.jasminoides课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应

4、着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果fortunianaatfirst,thenwithG.jasminoidesEllis.f.longicarpa,andwithG.jasminoidesEllis.var.radicansatsamples,GardeniajasminoideswastheclosestrelativetoG.jasminoidesfortuniana,andmostdistantrelativetoG.jasminoid

5、esEllis.var.radicans.Keywords：Gardeniajasminoides；Relatives；RAPD　　栀子为常用中药，具有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒的功效。分布在长江流域及以南地区，为酸性土壤指示植物。栀子有3变种和1变型［1～7］，即栀子GardeniajasminoidesEllis.、雀舌栀子G.jasminoidesEllis.var.radicansMakino、重瓣栀子G.jasminoidesEllis.var.fortunianaHara.、大花栀子G.jasminodesvar

6、.grandifloraNakai.、水栀子G.jasminoidesEllis.f.longicarpaetOkada.，它们在形态结构上均具有一定的差异，为了探索它们之间的亲缘关系，笔者采用随机扩增多态DNA的技术对其进行了分析。　　1器材仪器PTC－100TMProgrammableThermalController，高速离心机IECMicro－MB课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课

7、题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果centrifuge，DZKW-C型水浴锅，DYY－Ⅲ－5型稳压稳流电泳仪，凝胶紫外成像系统，核酸紫外定量仪GENEQUANTII。试剂Taq酶，琼脂糖，dNTP，CTAB，溴化乙锭，Tris碱，EDTA，巯基乙醇，随机引物，其余试剂为北京化工厂产的分析纯。材料栀子、雀舌栀子、重瓣栀子、水栀子的叶片均由笔者采集鉴定，用硅胶快速干燥保存，样品采取混合取样，编号见表1。　　2方法.1DNA提取和浓度测定将干叶片约置于EP管中，加入液氮约30s后用镊子碾碎成细粉

8、，立即加入500μl×CTAB提取缓冲液［CTAB2％，Tris-HCl()100mmol·L-1，EDTA0mmol·L-1,NaCl·L-1,巯基乙醇2％］和20μl巯基乙醇，60℃水浴保温1h后，加入氯仿－异戊醇抽提，轻颠倒混匀，10000r·min-1离心10min，