慢性乙型肝炎患者血清cccdna定量检测临床相关意义研究

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果慢性乙型肝炎患者血清cccDNA定量检测临床相关意义研究【摘要】　　目的探讨慢性乙型肝炎患者血清中cccDNA为肝脏损害的临床标志。方法随机选取慢性乙型肝炎轻中度、慢性乙型肝炎重度及重型、乙肝病毒携带者各20例。使用实时荧光定量PCR法分别检测入选病例血清中cccDNA值及同时定量检测血清中HBVDNA和ALT、AST、TBIL。结果三组之间cccDNA拷贝数分布位置不相同，存在差别。60例患者血清中cccDNA值和ALT秩相关

2、；cccDNA值与AST秩相关；cccDNA值与TBIL秩相关。结论患者血清中cccDNA为肝脏损害的标志，可作为判断肝功能损害的又一临床参数。【关键词】慢性乙型肝炎；cccDNA；实时荧光定量PCR；肝脏损害【Abstract】ObjectiveToverifythecccDNAinchronichepatitisBpatients’seraisansignaloftheliverSelectedrandomly0slightandmildpatientswithchronichepatitisB,20patientswithseverechronichep

3、atitisand0HBVviralcarriers(allpatientswereHBVDNApositive).ThecccDNAofthe0invesgatedpatientsweredetectedbyselectivereal-timefluorescentquantitativePCR,HBVDNAweredetectedby课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士

4、生必须有创新性的成果routinePCR,andtheALT、ASTandTBILlweredetectedbyroutinemethod.ResultsTherewassignificantlydifferentinthequantifyofthreegroups’cccDNAinsera(P=【Keywords】chronichepatitisB；cccDNA；liverdamage；real-timefluorescentquantitativePCR肝细胞核内有稳定的共价闭合环状DNA存在，为保持慢性感染的基础。研究发现部分患者血清中出现cccDNA，

5、可能为肝脏损害释放至血液中［1］。笔者采用实时荧光定量PCR定量检测慢性乙肝患者血清中cccDNA，探讨患者血清中cccDNA的临床相关意义。1对象与方法研究对象随机选取南昌市第九医院住院和门诊CHB患者或病毒携带者，所有入选患者血清中HBVDNA均为阳性，共计60例。CHB轻中度、CHB重度及重型、乙肝病毒携带者各20例。诊断符合XX年9月中华医学会传染病与寄生虫学会、肝病学分会联合修订的病毒性肝炎防治方案，全部患者均经血清免疫学检查确诊，无合并甲、丙、丁、戊型病毒性肝炎。同时排除了酒精性肝病、非酒精性脂肪肝和自身免疫性肝病等损害肝脏的原因。标本采集与保存患

6、者入院次日测cccDNA水平。采静脉血5ml，检测肝功能、乙肝病毒标志物、HBV课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果DNA定量等，另一份静脉血5ml离心后储藏于-70℃冰箱。HBVcccDNA检测采用实时荧光定量聚合酶链反应。用德国罗氏公司LightCycler定量PCR仪检测，试剂盒购于蓝星生物科技开发有限公司，检测值用拷贝/ml。统计学处理用进行统计

7、分析，统计学方法为一般性描述统计，秩和检验，秩相关。结果．1CHB患者血清中cccDNA水平三组之间的比较CHB轻中度组在发病初均能检测出cccDNA；CHB重度及重型组17例检出cccDNA，且拷贝数高，3例阴性；乙肝病毒携带者组只有1例阳性，其余均阴性。三组之间cccDNA水平分布位置不相同，差异有显著性；CHB轻中度组与乙肝病毒携带者组cccDNA水平分布位置明显不相同，差异有显著性；CHB轻重度及重型组与乙肝病毒携带者组cccDNA水平分布位置明显不相同，差异有显著性；但CHB轻中度组与CHB重度及重型组水平分布位置差异无显著性，双侧检验P=，双侧确切

8、概率P=＞,故CHB轻中度组与CHB重