慢性乙型肝炎患者血清cccdna定量检测临床相关意

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1、慢性乙型肝炎患者血清cccDNA定量检测临床相关意毕业【摘要】　　目的探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者血清中cccDNA为肝脏损害的临床标志。方法随机选取慢性乙型肝炎轻中度、慢性乙型肝炎重度及重型、乙肝病毒携带者各20例（所有病例HBVDNA均阳性）。使用实时荧光定量PCR法分别检测入选病例血清中cccDNA值及同时定量检测血清中HBVDNA和ALT、AST、TBIL。结果3组之间cccDNA拷贝数分布位置不相同，存在差别（P=0.000<0.01）。60例患者血清中cccDNA值和ALT秩相关（Rs=0.61

2、2，P=0.000<0.01）；cccDNA值与AST秩相关（Rs=0.632，P=0.000<0.01）；cccDNA值与TBIL秩相关（Rs=0.337,P=0.008<0.01，但Rs＜0.4）。结论患者血清中cccDNA为肝脏损害的标志，可作为判断肝功能损害的又1临床参数。【关键词】慢性乙型肝炎；cccDNA；实时荧光定量PCR；肝脏损害【Abstract】ObjectiveToverifythecccDNAinchronichepatitisBpatients’seraisansigna

3、loftheliverdamage.MthodsSelectedrandomly20slightandmildpatientsefluorescentquantitativePCR,HBVDNAethod.ResultsTherecccDNAlevelofchronichepatitisBpatientsage,maybeanotherimportantclinicalparameter.【Keyage；real-timefluorescentquantitativePCR肝细胞核内有稳定的共价闭合环状DNA（co

4、valentlycircularclosedDNA,cccDNA）存在，为保持慢性感染的基础。研究发现部分患者血清中出现cccDNA，可能为肝脏损害释放至血液中［1］。笔者采用实时荧光定量PCR定量检测慢性乙肝（CHB）患者血清中cccDNA，探讨患者血清中cccDNA的临床相关意义。1对象与方法1.1研究对象随机选取南昌市第9医院住院和门诊CHB患者或病毒携带者，所有入选患者血清中HBVDNA均为阳性，共计60例。CHB轻中度、CHB重度及重型、乙肝病毒携带者各20例。诊断符合2000年9月中华医学会传染病与寄生

5、虫学会、肝病学分会联合修订的病毒性肝炎防治方案，全部患者均经血清免疫学检查确诊，无合并甲、丙、丁、戊型病毒性肝炎。同时排除了酒精性肝病、非酒精性脂肪肝和自身免疫性肝病等损害肝脏的原因。1.2标本采集与保存患者入院次日测cccDNA水平。采静脉血5ml，检测肝功能、乙肝病毒标志物、HBVDNA定量等，另1份静脉血5ml离心后储藏于-70℃冰箱。1.3HBVcccDNA检测采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）。用德国罗氏公司LightCycler定量PCR仪检测，试剂盒购于蓝星生物科技开发有限公司，检测值用拷贝

6、/ml。1.4统计学处理用SPSS11.5进行统计分析，统计学方法为1般性描述统计，秩和检验，秩相关。2结果2．1CHB患者血清中cccDNA水平3组之间的比较CHB轻中度组在发病初均能检测出cccDNA；CHB重度及重型组17例检出cccDNA，且拷贝数高，3例阴性；乙肝病毒携带者组只有1例阳性，其余均阴性。3组之间cccDNA水平分布位置不相同，差异有显著性（P=0.000＜0.01）；CHB轻中度组与乙肝病毒携带者组cccDNA水平分布位置明显不相同，差异有显著性（P=0.000＜0.01）；CHB轻重度及重

7、型组与乙肝病毒携带者组cccDNA水平分布位置明显不相同，差异有显著性（P=0.000＜0.01）；但CHB轻中度组与CHB重度及重型组水平分布位置差异无显著性，双侧检验P=0.330，双侧确切概率P=0.341＞0.05,故CHB轻中度组与CHB重度及重型组cccDNA水平差异无显著性,见表1。表13组之间cccDNA水平的比较注：1组为CHB轻中度组，2组为CHB重度及重型组，3组为乙肝病毒携带者组(以上数值为log10对数值)2.2CHB患者血清中cccDNA水平与ALT、AST相关性分析CHB患者血清ccc

8、DNA水平与AST（谷草转氨酶）的秩相关系数Rs=0.632,P=0.000＜0.01，可以认为CHB患者血清cccDNA水平与AST存在正相关关系；CHB患者血清cccDNA水平与ALT（谷丙转氨酶）的秩相关系数Rs=0.612,P=0.000＜0.01，可以认为CHB患者血清cccDNA水平与ALT存在正相关关系。3讨论乙肝病毒复制是1种保守的机制，在转