临床医学论文慢性乙型肝炎患者血清cccDNA定量检测临床相关意义研究

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1、临床医学论文•慢性乙型肝炎患者血清cccDNA定量检测临床相关意义硏究【摘要】目的探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者血清中cccDNA为肝脏损害的临床标志。方法随机选取慢性乙型肝炎轻中度、慢性乙型肝炎重度及重型、乙肝病毒携带者各20例（所有病例HBVDNA均阳性）。使用实时灾光定量PCR法分别检测入选病例血清中cccDNA値及同时定量检测血清中HBVDNA和ALT、AST、TBIL。结果三组之间cccDNA拷贝数分布位置不相同，存在差别（P二0.000<0.01）。60例患者血清中cccDNA値和ALT秩相关（R

2、s二0.612»P=0.000<0.01）:cccDNA値与AST秩相关（Rs二0.632，P二O.OOOvO.Ol）；cccDNA値与TBIL秩相关（Rs二0.337,P二0.008V0.01，但Rs<0・4）。结论患者血清中cccDNA为肝脏损害的标志，可作为判断肝功能损害的又一临床参数。【关键词】慢性乙型肝炎；cccDNA；实时荧光定量PCR；肝脏损害[Abstract】ObjectiveToverifythecccDNAinchronichepatitisBpaticnts，seraisansigna

3、loftheliverdamage・MthodsSelectedrandomly20siightandmiIdpatientswithchronichepatitisB,20patientswithseverechronichepatitisand20HBVviralcarriers（al1patientswereHBVDNApositive）.ThecccDNAofthe60invesgatedpatientsweredetectedbyselectivereal-timefluorescentquanti

4、tativcPCR,HBVDNAweredetectedbyroutincPCR,andtheALT、ASTandTBIL1weredetectedbyroutinemethod.ResultsTherewassignificantlydifferentinthequantifyofthreegroups*cccDNAinscra(P二0.00(k0.01).ThescrumcccDNAlevelofchronichepatitisBpatientswascorrelatedwiththelevelofALT

5、(Rs=0.612,P=0.000<0.01),withAST(Rs二0.632,P二O.OOOvO.Ol),withTBIL(Rs二0.337,P=0.008<0.01,butRs<0.4).ConclusionThecccDNAwasansignalofliverdamage,maybeanotherimportantclinicalparameter.[Keywords】chronichepatitisB；cccDNA；1iverdamage；rea1・timefluorescentquantitati

6、vePCR肝细胞核内有稳定的共价闭合环状DNA(covalentlycircularclosedDNA,cccDNA)存在，为保持慢性感染的基础。硏究发现部分患者血清中出现cccDNA，可能为肝脏损害释放至血液中〔1〕。笔者采用实时荧光定量PCR定量检测慢性乙肝(CHB)患者血清中cccDNA，探讨患者血清中cccDNA的临床相关意义。1对象与方法1.1硏究对象随机选取南昌市第九医院住院和门诊CHB患者或病毒携带者，所有入选患者血清中HBVDNA均为阳性，共计60例。CHB轻中度、CHB重度及重型、乙肝病毒携

7、带者各20例o诊断符合2000年9月中华医学会传染病与寄生虫学会、肝病学分会联合修订的病毒性肝炎防治方案，全部患者均经血清免疫学检查确诊'无合并甲、丙、丁、戊型病毒性肝炎。同吋排除了酒精性肝病、非酒精性脂肪肝和自身免疫性肝病等损害肝脏的原因。1.2标本采集与保存患者入院次日测cccDNA水平。采静脉血5ml，检测肝功能、乙肝病毒标志物iffiVDNA定量等，另一份静脉血5m1离心后储藏于・70°C舲盲01.3HBVcccDNA检测采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ・PCR）。用德国罗氏公司LightCycle

8、r定量PCR仪检测，试剂盒购于蓝星生物科技开发有限公司，检测値用拷贝/ml。1・4统计学处理用SPSS11・5进行统计分析，统计学方法为一般性描述统计，秩和检验，秩相关。2结果2-1CHB患者血清中cccDNA水平三组之间的比较CHB轻中度组在发病初均能检测出cccDNA；CHB重度及重型组17例检出cccDNA，且拷贝数高，3例阴性；乙肝病毒携带者组只有1例阳性，其余均阴性。三组之间cccDNA水