保健食品中人参皂甙的测定(高效液相色谱法

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1、1 适用范围中国药品保健食品网www.chndrug.com本方法规定了人参含片、人参冲剂、人参茶、人参胶囊等以人参为主要原料的保健食品中人参皂甙的含量的HPLC的测定方法。中国药品保健食品网www.chndrug.com本方法适用于人参含片、人参冲剂、人参茶、人参胶囊等以人参为主要原料的保健食品中人参皂甙的含量的HPLC的测定方法。中国药品保健食品网www.chndrug.com本方法的六种皂甙的最低检出量为：10mg/kg。中国药品保健食品网www.chndrug.com本方法的六种皂甙的最佳线性范围：0.1mg/mL～

2、1mg/mL。中国药品保健食品网www.chndrug.com2 原理中国药品保健食品网www.chndrug.com将试样中的人参皂甙溶解、提取、经净化处理后，使用梯度洗脱反相高效液相色谱进行分离，紫外检测器（UV）检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标定量，适用于保健食品中人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd的同时定量分析。中国药品保健食品网www.chndrug.com3 试剂中国药品保健食品网www.chndrug.com试验用水为去离子水。中国药品保健食品网www.chndrug.com3.1乙腈：色谱纯

3、，200nm吸光度值为0.021。中国药品保健食品网www.chndrug.com3.2甲醇：分析纯。中国药品保健食品网www.chndrug.com3.3101大孔吸附树脂。中国药品保健食品网www.chndrug.com3.4高效液相色谱流动相：梯度淋洗A液为乙腈，B液为水。中国药品保健食品网www.chndrug.com3.5人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准品：含量大于98％（HPLC）。中国药品保健食品网www.chndrug.com3.6人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准溶液的

4、配制：配制人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准储备液，浓度分别为10mg/mL；再以此储备液配制成混合标准系列溶液，浓度范围为0.1mg/mL～1mg/mL；所有标准溶液均用甲醇配制。中国药品保健食品网www.chndrug.com4 仪器设备中国药品保健食品网www.chndrug.com4.1高效液相色谱仪：双高压输液泵，附紫外检测器。中国药品保健食品网www.chndrug.com4.2超声波清洗器。中国药品保健食品网www.chndrug.com4.3离心机。中国药品保健食品网www.chndrug.

5、com4.4水浴锅。中国药品保健食品网www.chndrug.com5 分析步骤中国药品保健食品网www.chndrug.com5.1固体试样处理取片剂或胶囊内容物研成粉末，并过20目筛；精确称取该粉末样适量于50mL具塞试管中，加水50mL于超声波清洗器中超声提取30min，取出，待溶液恢复常温后，准确取出10mL，通过D-101大孔吸附树脂净化柱（大孔吸附树脂使用前先经甲醇浸泡，水洗，装成10cm长小柱），小柱先用10mL水冲洗，弃去水液之后，用70％甲醇25mL洗脱皂甙，收集甲醇溶液，水浴上蒸干，残留以甲醇溶解并定容至

6、5mL，该样液离心后过0.5µm膜，滤液进行色谱分析。中国药品保健食品网www.chndrug.com5.2液体试样处理取一定量的试样于水浴上蒸干，残留以50mL水超声提取30min，余下步骤与5（1）相同。中国药品保健食品网www.chndrug.com5.3测定中国药品保健食品网www.chndrug.com5.3.1液相色谱参考条件中国药品保健食品网www.chndrug.com5.3.1.1色谱柱：反相C18柱，4.6×250mm, 5µm中国药品保健食品网www.chndrug.com5.3.1.2紫外检测器：检测

7、波长203nm中国药品保健食品网www.chndrug.com5.3.1.3梯度淋洗条件：中国药品保健食品网www.chndrug.com时间（min） 乙腈（％） 水（％）流速/min） 梯度曲线中国药品保健食品网www.chndrug.com0            16         84       1.0          1中国药品保健食品网www.chndrug.com20           18         82       1.0          6中国药品保健食品网www.chndrug.com

8、55           40         60       1.0          6中国药品保健食品网www.chndrug.com65           40         60       1.0          6中国药品保健食品网www.chndrug.com75