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1、人参皂甙测定及其药用机理的研究概况(A)、对照品溶液（B）及人参样品溶液（C）的HPLC/DAD色谱图1：Rg1；2：Re；3：Rf；4：Rb1；5：Rc；6：Rb2；7：Rb3；8：Rd2.4.1线性关系分别将“2.2.1”项下制备的不同浓度的系列对照品溶液按“2.3”项下色谱条件依次连续进样，分别重复3次，以对照品溶液浓度（X,μg/ml）对峰面积（Y）进行线性回归，呈良好的线性关系（表1）。2.4.2精密度试验取“2.2.1”项下制备的人参皂苷系列混合对照品溶液中的第1、4、6三个点作为低、中、高
2、三个浓度点,在1d以内分别连续进样3次,以及连续3d分别进样,根据所得峰面积分别考察日内精密度和日间精密度。结果8种人参皂苷的日内精密度低浓度点RSD%均<2.0%,中、高浓度点RSD%均<1.5%;日间精密度低、中浓度点RSD%均<2.0%,高浓度点RSD%均<1.5%,表明方法的精密度良好.2.4.3定量限和检测限考察将人参皂苷对照品溶液进行逐级稀释,以信噪比10z1时,确定其最低定量限;以信噪比3z1时,确定其最低检测限。8种人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1的最低定量
3、限分别为4.70、5.83、2.09、6.26、5.18、6.33、4.80、5.62μg/ml最低检测限分别为2.462、2.002、1.482、2.050、3.129、2.369、1.083、3.095μg/ml。样品色谱图(图1C)中,2号峰Re和7号峰Rb3的信噪比分别为:52.8:1和36.3:1.2.4.4稳定性试验取制备的人参药材样品溶液,分别在0、2、4、6、8、12、24h测定8种人参皂苷的峰面积,考察稳定性。8种人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1峰面积RS
4、D%分别为1.58%、1.81%、1.52%、0.81%、1.13%、1.47%、1.74%、1.96%,表明供试品溶液在24h内稳定。2.4.5重复性试验精密称取同一批次人参药材样品5份,各约1g,按“2.2.2”项下方法分别制成样品溶液,进样分析。人参中8种皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1的平均含量和RSD%(n=5)分别为2.811mg/g(RSD%=0.13%),1.366mg/g(RSD%=1.70%),0.715mg/g(RSD%=1.49%),4.658mg/g(
5、RSD%=1.44%),3.171mg/g(RSD%=0.33%),2.652mg/g(RSD%=0.92%),0.338mg/g(RSD%=1.43%),0.928mg/g(RSD%=1.62%)。结果表明本方法的重复性良好。2.4.6加样回收试验精密称取已知含量的同一批次人参样品1g共9份,每3份为1组,按低、中、高3个水平分别加入对照品一定量(样品中各成分含量的50%、100%、150%),按“2.2.2”项下制备,进样分析,结果8种人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1的
6、回收率和RSD%(n=3)分别为101.07%(RSD%=1.07%),98.72%(RSD%=1.18%),101.57%(RSD%=1.01%),101.71%(RSD%=1.28%),102.12%(RSD%=1.09%),99.58%(RSD%=0.93%),98.62%(RSD%=1.19%),100.12%(RSD%=1.21%)。结果表明,以本法同时测定8种人参皂苷的含量回收率结果良好。2.5样品测定按“2.2.2”项下方法制备华宇药业、德康药店和雷允上大药房3个厂家6个批次的人参药材样品
7、溶液,按“2.2”项下色谱条件进样分析计算样品含量,结果见表2。3.人参皂苷一些药理作用研究3.1人参总皂甙人参总皂甙(GS,ginsenosides)是从五加科植物人参PanaxginsengC.A.Mey.中提取的主要有效部位。莫志贤等(2)研究观察到GS体外对AA、ADP和胶原诱导的兔血小板聚集有明显的抑制作用,其效应呈剂量依赖性,50%聚集抑制率IC50依次为0192,2110,2170mg/ml以肝素凝血酶凝固时间(HTCT)表示血小板释放反应的程度,结果GS对血小板释放反应有明显的抑制作用;
8、以TXA2的稳定代谢产物TXB2表示TXA2含量,实验结果表明,GS1mg/ml对AA诱导的TXA2合成有明显的抑制作用,2mg/ml对AA、ADP和胶原诱导的TXA2合成也有明显的抑制作用;测定游离脂肪酸(FFA)的含量来表示血小板磷脂酶A2(PLA2)活性,系列浓度(01125,0125,015,1,2mg/ml)的GS可使释放的FFA量逐渐减少,说明GS对血小板活性有剂量依赖性抑制作用;按磷酸二酯酶(PDE)法提取和测定血小板钙调素(
