保健食品中人参皂甙的测定(高效液相色谱法

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1、1 适用范围中国药品保健食品网www.chndrug.com本方法规定了人参含片、人参冲剂、人参茶、人参胶囊等以人参为主要原料的保健食品中人参皂甙的含量的HPLC的测定方法。中国药品保健食品网www.chndrug.com本方法适用于人参含片、人参冲剂、人参茶、人参胶囊等以人参为主要原料的保健食品中人参皂甙的含量的HPLC的测定方法。中国药品保健食品网www.chndrug.com本方法的六种皂甙的最低检出量为:10mg/kg。中国药品保健食品网www.chndrug.com本方法的六种皂甙的最佳线性范围:0.1mg/mL~

2、1mg/mL。中国药品保健食品网www.chndrug.com2 原理中国药品保健食品网www.chndrug.com将试样中的人参皂甙溶解、提取、经净化处理后,使用梯度洗脱反相高效液相色谱进行分离,紫外检测器(UV)检测,根据色谱峰的保留时间定性,外标定量,适用于保健食品中人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd的同时定量分析。中国药品保健食品网www.chndrug.com3 试剂中国药品保健食品网www.chndrug.com试验用水为去离子水。中国药品保健食品网www.chndrug.com3.1乙腈:色谱纯

3、,200nm吸光度值为0.021。中国药品保健食品网www.chndrug.com3.2甲醇:分析纯。中国药品保健食品网www.chndrug.com3.3101大孔吸附树脂。中国药品保健食品网www.chndrug.com3.4高效液相色谱流动相:梯度淋洗A液为乙腈,B液为水。中国药品保健食品网www.chndrug.com3.5人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准品:含量大于98%(HPLC)。中国药品保健食品网www.chndrug.com3.6人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准溶液的

4、配制:配制人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准储备液,浓度分别为10mg/mL;再以此储备液配制成混合标准系列溶液,浓度范围为0.1mg/mL~1mg/mL;所有标准溶液均用甲醇配制。中国药品保健食品网www.chndrug.com4 仪器设备中国药品保健食品网www.chndrug.com4.1高效液相色谱仪:双高压输液泵,附紫外检测器。中国药品保健食品网www.chndrug.com4.2超声波清洗器。中国药品保健食品网www.chndrug.com4.3离心机。中国药品保健食品网www.chndrug.

5、com4.4水浴锅。中国药品保健食品网www.chndrug.com5 分析步骤中国药品保健食品网www.chndrug.com5.1固体试样处理取片剂或胶囊内容物研成粉末,并过20目筛;精确称取该粉末样适量于50mL具塞试管中,加水50mL于超声波清洗器中超声提取30min,取出,待溶液恢复常温后,准确取出10mL,通过D-101大孔吸附树脂净化柱(大孔吸附树脂使用前先经甲醇浸泡,水洗,装成10cm长小柱),小柱先用10mL水冲洗,弃去水液之后,用70%甲醇25mL洗脱皂甙,收集甲醇溶液,水浴上蒸干,残留以甲醇溶解并定容至

6、5mL,该样液离心后过0.5µm膜,滤液进行色谱分析。中国药品保健食品网www.chndrug.com5.2液体试样处理取一定量的试样于水浴上蒸干,残留以50mL水超声提取30min,余下步骤与5(1)相同。中国药品保健食品网www.chndrug.com5.3测定中国药品保健食品网www.chndrug.com5.3.1液相色谱参考条件中国药品保健食品网www.chndrug.com5.3.1.1色谱柱:反相C18柱,4.6×250mm, 5µm中国药品保健食品网www.chndrug.com5.3.1.2紫外检测器:检测

7、波长203nm中国药品保健食品网www.chndrug.com5.3.1.3梯度淋洗条件:中国药品保健食品网www.chndrug.com时间(min) 乙腈(%) 水(%)流速/min) 梯度曲线中国药品保健食品网www.chndrug.com0            16         84       1.0          1中国药品保健食品网www.chndrug.com20           18         82       1.0          6中国药品保健食品网www.chndrug.com

8、55           40         60       1.0          6中国药品保健食品网www.chndrug.com65           40         60       1.0          6中国药品保健食品网www.chndrug.com75 

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