不同水平大豆黄酮对生长猪生长性能和血液常规指标的影响

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四川农业大学本科毕业论文不同水平大豆黄酮对生长猪生长性能和血液常规指标的影响姓名：王言指导老师：陈代文教授学院：动物科技学院专业：动物科学（本硕连读）2012年6月12 不同水平大豆黄酮对生长猪生长性能和血液常规指标的影响动物科技学院动物科学（本硕连读）王言指导教师：陈代文教授摘要：本试验选取60头90日龄的健康杜长大三元杂交断奶仔猪，按体重一致的原则，随机分为5个处理，分别饲喂在基础日粮中添加0、10、100、1000和10000mg/kg大豆黄酮饲粮，每个处理4个重复，每个重复3头猪。试验期28d。研究饲料中不同水平的大豆黄酮对生长猪平均日采食量、平均日增重、料重比以及血液常规(白细胞数、红细胞数、血红蛋白浓度、红细胞压积、血小板数）的影响。结果表明，不同水平大豆黄酮对生长猪平均日采食量、平均日增重、料重比和血液常规的影响没有显著性差异（P>0.05)。然而高水平大豆黄酮有减小生长猪日增重，日采食量的趋势，同时还有增加血液中白细胞数和血小板数的趋势。关键词：生长猪、大豆黄酮、血液常规EffectofdifferentlevelsSoyDaidzeinDietaryonProductionPerformanceandBloodroutineofGrowingPigsWangyan,Aquaculture,CollegeofAnimalScienceandTechnologySupervisedbyprof.Chendai-wenAbstract:Sixtycrossed(Duroc×Landrace×Yorkshire)healthypigs(26.4±8.0kginitialBW)whichareattheageof90±2dayswererandomlyallottedtooneoffivedietarysoydaidzeinconcentrations(0,10,100,1000,or10000mg/kg)toquantifytheeffectofdaidzeinongrowthandRoutinebloodindex.Eachtreatmenthad4replicatedpenswith3pigsperpen.Pigswerefedtheexperimentaldietsfor28d.Theresultsshowedthattherewerenotsignificantdifferences(p>0.05)betweeneachtreatmentbymeasuringthepigs’averagedailyfeedintake,averagedailygain,feedgainratioandbloodroutineindex(erythrocytecount,leukocytecount,hemoglobinconcentration,hematocrit,plateletcount).Butahighlevelofsoydaizeinhadatrend(p>0.05)todecreasetheweightgainandfeedintakeofgrowingpigswhileheightentheirerythrocyteandleukocyteamount.Keywords:growingpigs、soydaidzein、bloodroutine12 大豆黄酮（又名大豆甙元），Daidzein。化学名为4,7-二羟基异黄酮，属异黄酮类植物雌激素，具有类雌激素作用，对动物具有多重效应[1]。在大鼠、肉用仔鸡、仔猪和反刍动物中,国内外做了大量研究，结果表明:大豆黄酮能促进动物生长、增强机体免疫功能,提高血液睾酮、生长激素和甲状腺素浓度,降低血液尿素氮和胆固醇浓度,从而促进肌肉蛋白质沉积,加速肌肉生长和发育[2,3-6]。因此，大豆黄酮已作为一种新型饲料添加剂被开发应用。大豆黄酮对动物的生长既有益处也有害处：适量大豆黄酮能使肥育猪的平均日增重提高、料重比降低[7]。给雄性大鼠皮下注射适量大豆黄酮可使其日增重、饲料转化率明显提高，从而推测大豆黄酮可能促进肌细胞营养性肥大而影响生长[7]；日粮中添喂低剂量大豆黄酮,可提高蛋用鸡、鸭和鹌鹑的产蛋率和饲料利用率；大豆黄酮能使大鼠日增重和采食量有所提高，还能促进骨骼、肌肉等主要器官的生长发育[8]；肉仔鸡日粮中添加大豆黄酮，发现大豆黄酮对公仔鸡具有显著的促生长作用；高水平的大豆黄酮饲喂小鼠，日增重低于对照组[9]。还会使小鼠的生长受到抑制[10]；大豆黄酮对去势仔公猪的增重有显著的促进作用,但对去势仔母猪却表现为抑制作用。大豆黄酮对动物血液常规的影响：大豆异黄酮可以抑制小鼠因去势引起的外周血白细胞数和淋巴细胞含量的降低,而对血小板数、红细胞数和血红蛋白含量的影响不明显[11]；大豆黄酮和染料木素均可显著降低血浆粘度，而对血液中红细胞压积未产生影响[12]；大豆异黄酮苷元能够抑制糖尿病大鼠血小板聚集,表明它能延缓糖尿病性血管病变的发生和发展[13]。所以，研究大豆黄酮对猪的生长性能以及血液常规的影响，从而确定生长猪对大豆黄酮的需要量和安全限量是十分有意义的，同时也将有效地提高养殖业的经济效益和社会效益。1材料与方法1.1试验动物与分组60头90日龄、健康的杜长大三元杂交断奶仔猪，按体重一致的原则，随机分为5个处理，分别饲喂在基础日粮中添加0、10、100、1000和10000mg/kg大豆黄酮饲粮，每个处理4个重复，每个重复3头猪。试验期28d。1.2试验饲粮与设计日粮参照NRC（1998）10～50kg阶段猪营养需要配制。以玉米-12 豆粕型饲粮为基础日粮，按试验设计分别向基础日粮中添加相应剂量的大豆黄酮配成试验日粮。基础日粮组成及营养水平见表1。表1基础日粮组成及营养水平Table1CompositionofthebasaldietandNutritionallevel日粮组成含量（%）营养水平玉米CP8%58.5消化能MJ/kg14.29进口鱼粉CP64.5%5.00粗蛋白%20.02乳清粉6.00钙%0.78大豆粕10.00总磷%0.67大豆浓缩蛋白5.00有效磷%0.46膨化大豆10.00赖氨酸%1.33大豆油3.00蛋氨酸%0.41氯化胆碱50%0.15蛋+胱%0.77食盐0.30苏氨酸%0.72石粉（碳酸钙）0.60色氨酸%0.54磷酸氢钙0.70赖氨酸盐酸盐（78%）0.20复合多维10.03矿添20.50甜味剂0.02合计1001提供每公斤配合饲料：维生素A，9000IU；维生素D3，3000IU；维生素E，20.0IU；维生素K3，3.0mg；维生素B1，1.5mg；维生素B2，4.0mg；维生素B6，3.0mg；维生素B12，0.2mg；烟酸，30.0mg；泛酸，15.0mg；叶酸，0.75mg；生物素，0.1mg；2Fe，75.0mg；Cu，150.0mg；Zn，75.0mg；Mn，60.0mg；I，0.35mg；Se，0.35mg。1.3试验动物及饲养管理试验拟在四川农业大学动物营养研究所实验基地进行。猪舍温度控制在25℃左右，自由采食、自由饮水。消毒按常规程序进行。严格遵循实验场饲养和管理制度，每日注意观察试验动物临床表现、采食和饮水情况，发现疾病及时处理。1.4样品采集与处理12 1.4.1饲料样品取各试验日粮测定水分、粗蛋白、钙、总磷等含量。1.4.2血液样品试验第28d，各重复选取1头接近平均体重的猪，对其空腹进行前腔静脉采血5mL，然后缓慢注入含0.1%肝素钠的抗凝管中，缓慢颠倒混匀，用于血液常规指标的分析。1.5测定指标与方法1.5.1生产性能以重复为单位试验第1、14、28d对猪进行空腹称重，记录每天的采食量，计算阶段及全期平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和料重比（F/G）。平均日采食量(ADFI)=（试验期内供料量—试验期内剩料量-损耗料量）/试验天数；平均日增重（ADG）=（末重—初重）/试验天数；料重比（F/G）=平均日采食量(ADFI)/平均日增重（ADG）1.5.2血常规指标血常规指标：包括白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞压积（HCT）、血小板计数（PLT）。血液常规指标送于四川省雅安市人民医院测定。1.6数据处理与统计分析试验数据均采用SAS统计软件进行方差分析，差异显著者采用LSD法进行多重比较，所有数据均以“平均值±标准差”表示。2结果2.1日粮添加不同水平大豆黄酮对生长猪生长性能的影响日粮添加不同水平大豆黄酮在试验期对生长性能的影响见表2。表2日粮添加不同水平大豆黄酮对生长猪生长性能的影响12 Table2effectofdifferentlevelofsoydaidzeinonproductionperformanceofgrowingpigs项目日粮大豆黄酮添加量，mg/kg0（对照）101001000100001-14dADFI（kg/头.d）1.435±0.121.428±0.171.389±0.141.408±0.111.308±0.12ADG(kg/头.d)0.690±0.110.720±0.120.660±0.110.700±0.090.640±0.15F/G2.080±0.051.983±0.112.105±0.082.012±0.162.157±0.201-28dADFI（kg/头.d）1.586±0.151.526±0.191.471±0.171.575±0.091.493±0.11ADG(kg/头.d)0.71±0.090.66±0.090.64±0.140.69±0.090.64±0.11F/G2.233±0.072.312±0.172.299±0.102.283±0.102.333±0.23图11-14天各处理大豆黄酮对生长性能差异Figure1Differentiationofeachlevel'sproductionperformancein14days图1显示的是在1-14天内各水平大豆黄酮对平均日采食量、平均日增重、料重比的影响比较。与对照组相比，添加各水平的大豆黄酮都使平均日采食量降低，差异不显著；添加10mg/kg、1000mg/kg水平的大豆黄酮使平均日增重增加，但是差异不显著，其中最高水平的大豆黄酮组生长猪平均日增重最低；添加最高水平的大豆黄酮组生长猪料重比最高。12 图21-28天各处理大豆黄酮对生长性能的影响比较Figure2Differentiationofeachlevel'sproductionperformancein28days图2显示的是在1-28天内各水平大豆黄酮对平均日增重、平均日增重、料重比的影响比较。与对照组相比，添加各水平大豆黄酮都使平均日采食量降低，差异不显著；添加各水平大豆黄酮都使平均日增重降低，差异不显著；添加最高水平大豆黄酮组的生长猪的料重比最高。2.2日粮添加不同水平大豆黄酮对生长猪血常规的影响日粮添加不同水平大豆黄酮在试验期对血常规的影响见表3。表3日粮添加不同水平大豆黄酮对生长猪血常规的影响Table2effectofdifferentlevelofsoydaidzeinonbloodroutineofgrowingpigs项目日粮大豆黄酮添加量，mg/kg0（对照）10100100010000白细胞计数（109/L)14.848±2.3117.643±4.2417.958±1.2216.955±2.5318.355±2.43红细胞计数（1012/L)6.438±1.106.898±0.436.9175±0.297.1875±0.546.97±0.45血红蛋白（g/L)122.500±4.5118.500±9.07115.25±4.32123±10.02124.75±10.28红细胞压积（L/L）0.410±0.020.398±0.030.39±0.020.4±0.030.4075±0.03血小板计数（109/L)335.750±149.43420.50±116.50352±176.64545.5±149.03373.5±74.2712 添加各水平大豆黄酮都使白细胞数有所增加，但是不显著，见图3：图3各水平大豆黄酮对血液中白细胞数的影响比较Figure3effectofdifferentlevelsofsoydaidzeinonWBC添加各水平大豆黄酮都使红细胞数增加，但是差异不显著，见图4：图4各水平大豆黄酮对血液中红细胞数的影响比较Figure4effectofdifferentlevelsofsoydaidzeinonRBC添加10mg/kg、100mg/kg水平的大豆黄酮使血红蛋白浓度下降，添加1000mg/kg、10000mg/kg水平大豆黄酮使血红蛋白浓度增加，但是差异不显著，见图5：12 图5各水平大豆黄酮对血液中血红蛋白浓度的影响比较Figure5effectofdifferentlevelsofsoydaidzeinonHGB添加各水平大豆黄酮使红细胞压积减小，差异不显著，见图6：图6各水平大豆黄酮对红细胞压积的影响比较Figure6effectofdifferentlevelsofsoydaidzeinonHCT添加各水平大豆黄酮都使血小板数增加但是差异不显著，见图7：图7各水平大豆黄酮对血液中血小板数的影响比较Figure7effectofdifferentlevelsofsoydaidzeinonPLT3分析与讨论本试验中大豆黄酮对猪的生长性能没有显著的影响。对于平均日采食量，1-14天以及1-28天，各水平大豆黄酮处理都使该指标降低，但是各处理间差异不显著（P>0.05)，与程忠刚[7]、G.SarwarGilani[14]及L.LGreiner[9]等人的研究结果相符。对平均日增重来说，本实验表明在1-14天内，10mg/kg水平的大豆黄酮有使平均日增重增高的趋势（P>0.05)，这与程忠刚[7]、薛竹峰[15]12 的研究结果一致，然而更高水平的大豆黄酮有使日增重降低的趋势（P>0.05)，这与Greiner[9]的研究结果一致。在1-28天内，最高水平大豆黄酮处理组的日增重最低。对料重比来说，本实验表明在1-14天内，10mg/kg水平的大豆黄酮有使生长猪料重比降低的趋势（p>0.05），与程忠刚[7]、薛竹峰[15]的研究结果一致。在1-28天内，最高水平大豆黄酮处理组的料重比最高，可以表明高水平的大豆黄酮一定程度地抑制猪的生长，与卜云[10]的研究结果一致。目前大豆黄酮在国外并未被作为促生长素而广泛用在饲料添加剂领域。其主要被应用于抗癌[16]，保护心血管[17]以及治疗更年期[18]领域，关于其是否能促进动物生长，国内外研究结果不一，但高剂量大豆黄酮会对动物生长产生抑制作为，是众多研究者的共识，本试验亦观察到这一趋势。对于大豆黄酮对动物血液常规指标的影响，杨桂莲[11]、刘春龙[12]研究表明，大豆异黄酮对去卵巢小鼠以及奶牛血液中红细胞数、血红蛋白浓度、红细胞压积在统计学上差异均无显著性。本实验表明，与对照组相比，不同水平大豆黄酮对血液中红细胞数、血红蛋白浓度以及红细胞压积没有显著差异（p>0.05)，这与之前的研究一致。小鼠外周血中白细胞总数为8.4(5.1～11.6)×10^9/L[19]。杨桂莲[11]在研究中发现去卵巢后小鼠白细胞数下降，而补充大豆异黄酮后有抑制白细胞数减少的功能,并使白细胞数维持在正常范围内。本实验结果表明，添加大豆黄酮有使血液中白细胞数增多的趋势（p>0.05)，与杨桂莲研究结果一致。此外，针对目前广泛采用豆粕类原料作为饲料这一现状，豆粕自身所含大豆黄酮的本底值必须受到关注。有研究表明饲料中添加24.6%的豆粕（CP48%），饲料中大豆黄酮含量可达278.3mg/kg，这一结果表明额外添加低剂量（100mg/kg以下）大豆黄酮，很难引起显著的处理效应。而本实验所用基础饲粮中大豆黄酮本底值将在后续试验中进行测定。4结论低水平（10mg/kg）大豆黄酮对生长猪有提高日增重和降低日采食量、料重比的趋势（p>0.05)，高水平大豆黄酮对猪生长有一定的抑制作用（p>0.05)；不同水平大豆黄酮对血液中白细胞数和血小板数有增加的趋势（p>0.05)，但对红细胞数、血红蛋白浓度、红细胞压积没有明显的影响（p>0.05）。5参考文献[1]韩正康.异黄酮植物雌激素调控动物神经内分泌及生产性能的研究[J].中国农业科技导报,1999,(1):12 61-66[2]王国杰，韩正康.大豆黄酮对肉鸡生长影响及作用机制研究[J].广东畜牧兽医科技,1994,19(3):4-6[3]王国杰，韩正康.红三叶草总异黄酮对小公鸡生长及血清睾酮水平的影响[J].动物学研究,1994,15(3):65-69[4]王国杰，韩正康，陈伟华.大豆黄酮对大鼠肌肉生长和几种内源激素水平的影响[J].动物学研究,1995,16(1):23-29[5]张荣庆，韩正康.异黄酮植物雌激素对小鼠免疫机能的影响[J].南京农业大学学报,1994,16(2):64-68[6]张荣庆，韩正康.大豆黄酮对母猪免疫功能和血清及初乳GH、PRL、SS水平影响[J].动物学报,1995,41(2):201-206[7]程忠刚，林映才，余德谦等.大豆黄酮对肥育猪生产性能的影响及其作用机制探讨[J].动物营养学报.2005，3，17(1)：30-34[8]郭慧君，韩正康，王国杰.日粮中添加大豆黄酮对大鼠生长性能和有关内分泌的影响.南京农业大学学报.2001,24（4）：59-61[9]GREINERLL,STAHLYTS,STABLETJ.Theeffectofdietarysoydaidzeinonpiggrowthandviralreplicationduringaviralchallenge[J].JournalofAnimalScience,2001,79:3113-3119[10]卜云，张振汉.大豆黄酮对小鼠生长和生殖影响的研究[J].宁夏农学院学报，2004,25（1）：48-50[11]杨桂莲，朱明元，黄忆明.大豆异黄酮对去卵巢小鼠血常规的影响[J].实用预防医学.2003;(10),5:648-649[12]刘春龙，李忠秋，张帆等.大豆黄酮和染料木素对奶牛血清生化及血液流变学指标的影响[J].中国兽医学报.2009;4(29),4:460-467[13]尹学哲，全吉淑，徐军萍等.大豆黄酮苷元对糖尿病大鼠血小板聚集的抑制作用[J].2007;25（1）:12-13[14]G.SarwarGilani,ChantalFarmer,MonicaDyck.DistributionofIsoflavonesinSamplesofSerum,LiverandMammaryGlandsofRatsorPigsFedDietaryIsoflavones[J].AnnNutrMetab2011;58:171-180[15]薛竹风.大豆黄酮对肥育猪生产性能和猪体外形的影响[J].兽药与饲料添加剂,2000,5(3):24[16]HomRossPL,BernesS,LeeM,etal.Assessingphytoestrogenexposureinepidemiologicstudies:developmentofadatabases[J].CancerCausesControl,2000,11(4):289-298[17]张秀荣.大豆异黄酮心血管作用的研究进展[J].心血管病学进展,2003,24(3):173-175[18]HarrisonE,AdjeiA,AmehoC,eta1.Theefectofsoybeanproteinonbonelossinaratmodelof12 postmenopausalosteoporosis.JNutrSciVitaminol(Tokyo),1998,44:257-268[19]施新猷.现代医学实验动物学[M].人民军医出版社,2000.77致谢本论文是在陈代文教授的悉心指导下完成的。在本次试验中，老师不断地对我进行培训指导及交流，在此过程中我学到了很多有关试验设计的知识，也通过实践学到了养殖方面的经验。在此，向陈代文教授致以诚挚的谢意！同时也感谢邹佳玲老师和肖熠师兄在实验过程中对我的悉心指导和对我毕业论文辛勤的考核，让我在试验中真正学会了很多有益的经验和知识，在此致以衷心的感谢!12