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时间:2018-12-25
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1、摘要:自由流电泳的分离原理、分离模式、影响分离的因素和条件以及自由流电泳仪器的发展进行了介绍,对近年来自由流电泳在离子、小分子和微粒分离,多肽和蛋白质分离,细胞和细胞器分离,药物对映体分离,微芯片装置白质组学等方面应用研究的进展进行了综述引用文献73篇 ?自由流电泳(freeflowelectrophoresis,FFE)是、F制备型分离技术,具有可连续分离、多种分离模式、无固体支持介质和分离条件温和等优势,特别适用于生物材料的分离纯化和制备。其明显优势是使大量活性生物材料纯品的获得成为可能。FFE由Barrolier等l和Han
2、nig。于上世纪五六十年代相继提出,此后20年问有大量的研究报道涉及采用FFE分离和表征免疫细胞、血细胞、骨髓细胞、肾细胞、肿瘤细胞、疟原虫、细胞器和细胞膜等“。上世纪90年代中末期,生物技术的飞速发展对生物材料的分离纯化和制备技术的需求日益迫切,FFE具有的优越性使其应用更加广泛,分离样品涉及小离子、肽、酶和蛋白质、核酸、细胞膜、囊泡、细菌、病毒及各种细胞等,并叮用其测量某些物理化学常数…。FFE仪器也在不断地被改进更新…,经过近50年的发展,已发展为伞自动分析仪器,应用范围从生物样品制备发展到样品分析及前处理,以及分子生物学、生
3、物化学和细胞生物学等领域。此外,FFE在窄问分离科学、:芒:片技术等方面的应用基础研究日渐增多,近年来FFE在蛋白质组学研究中的应用报道不断f“现,其作为大量复杂蛋白质组分分析的前处理技术以及与其他分析技术联用的有关研究正受到广泛关注。自由流电泳原理及分离模式1.1自由流电泳原理Roman等一对FFE分离原理(见图1)进行了描述。两块平行板构成的分离窜中,电场与溶液流垂直,电泳迁移率不同的组分在电场作用下与液流方向形成不同的偏转角,在分离室末端不同出11位置流出。式(1)表示影响偏转角的条件因素。图l自由流电泳的分离原理Fig.iP
4、rincipleoffreeflowelectrophoresis(FFEt90=一tx.EA/(qw)(1)其中,0为偏转角;肛。为带电离子的电泳迁移率;E为电场强度;A为电极表面积;q为分离腔的横截面积;∞为溶液的线速度。1.2自由流电泳分离模式(1)自由流区带电泳(ZE—FFE)使用组成相同的溶液使分离室内保持恒定的pH和电导值。依据分析物的质荷比,增加电压可增大组分的电泳迁移率,减小缓冲液流速可增加组分的偏转角,从而增加分离度并提高分辨效率,但可能减小分析通量。 摘要:自由流电泳的分离原理、分离模式、影响分离的因素和条件以
5、及自由流电泳仪器的发展进行了介绍,对近年来自由流电泳在离子、小分子和微粒分离,多肽和蛋白质分离,细胞和细胞器分离,药物对映体分离,微芯片装置白质组学等方面应用研究的进展进行了综述引用文献73篇 ?自由流电泳(freeflowelectrophoresis,FFE)是、F制备型分离技术,具有可连续分离、多种分离模式、无固体支持介质和分离条件温和等优势,特别适用于生物材料的分离纯化和制备。其明显优势是使大量活性生物材料纯品的获得成为可能。FFE由Barrolier等l和Hannig。于上世纪五六十年代相继提出,此后20年问有大量的研究
6、报道涉及采用FFE分离和表征免疫细胞、血细胞、骨髓细胞、肾细胞、肿瘤细胞、疟原虫、细胞器和细胞膜等“。上世纪90年代中末期,生物技术的飞速发展对生物材料的分离纯化和制备技术的需求日益迫切,FFE具有的优越性使其应用更加广泛,分离样品涉及小离子、肽、酶和蛋白质、核酸、细胞膜、囊泡、细菌、病毒及各种细胞等,并叮用其测量某些物理化学常数…。FFE仪器也在不断地被改进更新…,经过近50年的发展,已发展为伞自动分析仪器,应用范围从生物样品制备发展到样品分析及前处理,以及分子生物学、生物化学和细胞生物学等领域。此外,FFE在窄问分离科学、:芒:
7、片技术等方面的应用基础研究日渐增多,近年来FFE在蛋白质组学研究中的应用报道不断f“现,其作为大量复杂蛋白质组分分析的前处理技术以及与其他分析技术联用的有关研究正受到广泛关注。自由流电泳原理及分离模式1.1自由流电泳原理Roman等一对FFE分离原理(见图1)进行了描述。两块平行板构成的分离窜中,电场与溶液流垂直,电泳迁移率不同的组分在电场作用下与液流方向形成不同的偏转角,在分离室末端不同出11位置流出。式(1)表示影响偏转角的条件因素。图l自由流电泳的分离原理Fig.iPrincipleoffreeflowelectrophore
8、sis(FFEt90=一tx.EA/(qw)(1)其中,0为偏转角;肛。为带电离子的电泳迁移率;E为电场强度;A为电极表面积;q为分离腔的横截面积;∞为溶液的线速度。1.2自由流电泳分离模式(1)自由流区带电泳(ZE—FFE)使用组成
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