霍氏肠杆菌生物学特性研究

《霍氏肠杆菌生物学特性研究 》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、根据本节教材用实验和猜测相结合的方法来说明生命起源的特点，教学方法也就选择学生观察投影片、猜测和查资料相结合的方法进行教学。霍氏肠杆菌生物学特性研究　　霍氏肠杆菌生物学特性研究　　１．１材料　　１．１．１病料陕西某养猪场腹泻死亡仔猪的肝脏、脾脏、粪便等。１．１．２培养基普通琼脂平板培养基、麦康凯琼脂平板培养基、５％绵羊血琼脂平板培养基、营养肉汤、邓亨氏蛋白胨水、葡萄糖蛋白胨水、三糖铁ＴＳＩ斜面培养基１．１．３抗生素试纸片购自杭州某微生物试剂有限公司，批号：．１．４试验动物小白鼠　　１．２方法意大利医生

2、雷地证明腐肉不能生蛆的实验投影片，巴思德的“鹅颈瓶实验”投影片，原始地球的投影片，米勒实验的投影片。根据本节教材用实验和猜测相结合的方法来说明生命起源的特点，教学方法也就选择学生观察投影片、猜测和查资料相结合的方法进行教学。　　１．２．１细菌分离无菌采集仔猪肝脏、脾脏、粪便等病料分别接种在普通琼脂平板培养基、麦康凯琼脂平板培养基、５％绵羊血琼脂平板培养基，３７℃、２４ｈ～３６ｈ培养，分离到一株可疑细菌４℃保存。待用。１．２．２生物学特性试验形态结构与染色特性：革兰染色：细菌染色后显微镜下观察其形态结构

3、和染色特性。生物学特性：分离菌的纯培养物分别接种于普通琼脂平板培养基、麦康凯琼脂平板培养基、５％绵羊血琼脂平板培养基、营养肉汤等培养基中，３７℃、２４ｈ～３６ｈ培养，观察其生长表现。１．２．３生化试验用分离菌的纯培养物按生化特征鉴定中介绍的方法进行下列试验：糖发酵试验、靛基质试验、Ｍ．Ｒ试验、枸橼酸盐利用试验以及氨基酸利用试验等。１．２．４抗生素敏感试验按参考资料抗生素纸片扩散法进行操作及判定。１．２．５动物致病性试验取小白鼠６只，分为２组，实验组和对照组，每组３只。将纯肉汤培养物３７℃、２４ｈ～３６

4、ｈ培养，经麦氏比浊管比浊后，将细菌浓度调整为２×１０８个／ｍＬ，取０．２ｍＬ、０．４ｍＬ、０．６ｍＬ肉汤培养物分别给实验组小白鼠腹腔注射；对照组小白鼠注射等量灭菌肉汤，观察其发病及死亡情况，并解剖小白鼠，采集肝脏、脾脏，涂片、染色、镜检，及对感染菌做分离鉴定。　　２．１形态及染色特性　　霍氏肠杆菌为革兰阴性小球杆菌，散在排列，周生鞭毛运动，无荚膜。　　２．２生物学特性观察意大利医生雷地证明腐肉不能生蛆的实验投影片，巴思德的“鹅颈瓶实验”投影片，原始地球的投影片，米勒实验的投影片。根据本节教材用实验和猜

5、测相结合的方法来说明生命起源的特点，教学方法也就选择学生观察投影片、猜测和查资料相结合的方法进行教学。　　霍氏肠杆菌为兼性厌氧菌，最适生长温度为３７℃，ｐＨ７．４最佳，酸性条件下不生长，本菌对营养要求不高，普通琼脂平板培养基３７℃、２４ｈ～３６ｈ即可生长，菌落灰白色，１～２ｍｍ大小，圆形，四周光滑，微凸起，表面光滑、湿润。麦康凯琼脂平板培养基上３７℃、２４ｈ～３６ｈ培养后可观察到透明小菌落，１～２ｍｍ大小，圆形，四周光滑，微凸起，表面光滑、湿润，随即４℃存放２４ｈ后，菌落为红色，培养基不变色。５％绵羊

6、血琼脂平板３７℃、２４ｈ～３６ｈ培养，菌落灰白色，针尖大小，无溶血现象。普通肉汤３７℃、２４ｈ～３６ｈ培养，肉汤变浑浊。霍氏肠杆菌不发酵乳糖，可利用葡萄糖，甲基红试验阳性，脲酶阳性，接触酶阳性，三糖铁培养基为斜面黄色，底部红色，不产生Ｈ２Ｓ。　　２．３生化试验结果　　２．４抗生素敏感试验　　２．５动物试验　　实验组和对照组小白鼠在注射可疑菌后６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、均正常活动，饮食正常、精神状态良好，４８ｈ未见死亡，解剖小白鼠无异常病理变化，从解剖小白鼠肝脏、脾脏中未离到与感染菌相同的细菌。意大利医生雷

7、地证明腐肉不能生蛆的实验投影片，巴思德的“鹅颈瓶实验”投影片，原始地球的投影片，米勒实验的投影片。根据本节教材用实验和猜测相结合的方法来说明生命起源的特点，教学方法也就选择学生观察投影片、猜测和查资料相结合的方法进行教学。　　从送检的仔猪病料肝脏、脾脏、粪便中，分离得到一株革兰阴性小杆菌，通过生长特性、菌体形态、菌落特征、染色特性、生化试验等一系列的系统鉴定，证实所分离的细菌为霍氏肠杆菌。动物致病菌性试验表明该株菌没有致病性，为肠道的正常菌之一。药敏试验证明该菌对米诺环素、四环素、环丙沙星、克拉霉素、

8、氧氟沙星、阿米卡星、左氟沙星、红霉素、诺氟沙星、头孢唑啉、氯霉素、庆大霉素、链霉素、克林霉素、卡那霉素、麦迪霉素、妥布霉素、头孢哌酮、哌拉西林、大观霉素等高度敏感，对头孢曲松、苯唑西林、氨曲南、复方新诺明、头孢他啶具有耐药性。从动物致病性试验结果分析，本株霍氏肠杆菌为动物肠道的正常菌之一，对多种抗生素高度敏感，可能是一株条件致病菌。从肝脏、脾脏中也没有分离到其他细菌及酵母菌，是否有其他微生物存在有待进一步研究。霍氏肠杆菌在初分离过程中，容易和肠道沙门氏菌