布氏乳酸杆菌生长特性及其s层蛋白研究

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1、ClassifiedIndex：R93U．D．C：SouthwestJiaotongUniversityMasterDegreeThesisSTUDYONTHELACTOBACILLUSBUCHNERI，SGROWTHCHARACTERISTICSANDITSS．LAYERPROTEⅣGrade：2010Candidate：DaiZhenAcademicDegreeAppliedfor：masterofscienceSpeciality：MicrobialandbiochemicalpharmacySupervisor：XueruLiApr．22，2013西南交通

2、大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权西南交通大学可以将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复印手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于1．保密口，在年解密后适用本授权书；2．不保密一使用本授权书。(请在以上方框内打“√”)指导老师签名：劣秽日期："7／01j．6’乡溉镢∽辄鹕剑力西南交通大学硕士学位论文主要工作(贡献)声明本人在学位论文中所做的主要工作或贡献如下：①从泡菜发酵汁和发酵青贮饲料等富

3、含乳酸菌的材料中，分离获得一株高表达S．层蛋白的菌株。经菌落培养特征、细胞形态及生理生化鉴定，结合16SrDNA序列对比分析，该菌为布氏乳酸杆菌(Lactobacillusbuchneri)，命名为布氏乳酸杆菌LBZ8菌株。，②对布氏乳酸杆菌LBZ8的生长及相关特性研究结果显示，LBZ8对1．0mmol／L的过氧化氢(H202)具有较强的耐受能力，对超氧阴离子(02’)、羟自由基和DPPH的清除能力分别达到43．12％、86．52％、40％。发酵实验研究结果表明，该菌发酵液中Y．氨基丁酸和D．甘露醇的含量分别为11．588mg／ml和19．46mg／ml，同时发酵

4、液对大肠杆菌和白色念球菌生长具有一定的抑制和凝集作用。③SDS．PAGE凝胶电泳分析显示，布氏乳酸杆菌LBZ8细胞表面聚集了大量的分子量约为55KDa的S．层蛋白。用蛋白质微量回收试剂盒纯化所得布氏乳酸杆菌的S．层蛋白，能够粘附于大肠杆菌、猪链球菌、金黄色葡萄球菌和白色念球菌细胞表面，并能促进这些微生物细胞的凝集。本人郑重声明：所呈交的学位论文，是在导师指导下独立进行研究工作所得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中作了明确说明。本人完全了解违反上述声明所引起的一切

5、法律责任将由本人承担。学位论文作者签名邳日期：如f弓．占．弓西南交通大学硕士研究生学位论文第1页摘要乳酸菌是一类近年来国内外研究较多的益生菌，乳酸菌自身及其代谢产物对人和动物具有保健和治疗疾病的效果。布氏乳酸杆菌与其他乳酸菌相比较，国内外对其了解还不充分，因此对其生理、生化特性及其相关代谢产物的研究具有一定的科学意义和应用价值。实验利用改良的MRS培养基从泡菜发酵汁，发酵青贮饲料等富含乳酸杆菌的介质中分离出6株乳酸菌，经过16SrDNA鉴定，它们分别为乳酸乳球菌(Lactococcuslactis)、植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)、鼠李

6、糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)、戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)、干酪乳杆菌(LactobacilluscaseO、布氏乳酸杆菌(Lactobacillusbuchneri)。通过SDS．PAGE分析上述菌株S．层蛋白显示，与分离的其他几株乳酸菌相比较，实验分离出的布氏乳酸杆菌(布氏乳酸杆菌LBZ8菌株)表层含大量S．层蛋白，为此本实验以LBZ8菌株为研究对象，对该菌生长及其相关特性进行研究，结果显示，LBZ8对1．0mmol／L的过氧化氢(I"1202)具有很强的耐受能力，对超氧阴离子(02。)、羟自由基和1，I

7、---苯基．2．三硝基苯肼自由基(DPPH)的清除能力分别达到43．12％、86．52％、40％。与文献报道比较显示出较强的抗氧化性能。发酵试验研究结果表明，该菌发酵液中Y-氨基丁酸(GABA)的含量为11．588mg／ml，D-甘露醇含量为19．46mg／ml。抑菌试验研究结果表明，LBZ8的发酵液对大肠杆菌(Escherichiacoli)，白色念球菌(CanidiaAlbicans)具有一定的抑制生长的作用，但对金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的抑制效果不太明显。LBZ8的发酵液对上述病原菌具有很强的凝集作用，能够使微生物细胞大量的

8、沉集。用P