尤氏泰勒虫tuip、tu88蛋白特性分析及其应用

尤氏泰勒虫tuip、tu88蛋白特性分析及其应用

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1、密级:论文编号:中囯农业科学院学位论文尤氏泰勒虫TuBP、Tu88蛋白特性分析及其应用CharacterizationandapplicationofTuIPandTu88proteinfromTheileriauilenbergi硕士研宄生:卢怡竹指导教师:刘志杰副研究员申请学位类别:农学硕士专业:预防兽医学研宄方向:动物寄生虫及其分子生物学培养单位:兰州兽医研宄所研宄生院2015年5月密级:论文编号:中国农业科学院学位论文尤氏泰勒虫TuIP、Tu88蛋白特性分析及其应用CharacterizationandapplicationofTuIPandTu

2、88proteinfromTheileriauilenbergi硕士研究生:卢怡竹指导教师:刘志杰副研究员申请学位类别:农学硕士专业:预防兽医学研究方向:动物寄生虫及其分子生物学培养单位:兰州兽医研究所研究生院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationCharacterizationandapplicationofTuIPandTu88proteinfromTheileriauilenbergiM.S.Candidate:LuYizhuSupervisor:Asso

3、ciateProf.LiuZhijieMajor:PreventiveVeterinaryMedicineSpecialty:AnimalParasitologyandMolecularBiologyMay2015独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:时间:年月

4、1$曰关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名:时间:年月J曰导师签名:时间:yr年jr月曰中国农此科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目尤氏泰勒虫TuIP、Tu88蛋白特性分析及其应用动物寄生虫及论文作者卢怡竹专业预防兽医学研究方向分子生物学指导教师刘志杰培养单位(研究所)兰州兽医研究所硕姓

5、名职称单位专业签名(博)评阅人瓦答硕导口张彦明西北农林科技大学预防兽医博导口副研究硕导口中国农业科学院周继章预防兽医员博导口兰州兽医研究所硕导口才学鹏研究员中国兽医药品监察所预防兽医博导口硕导口景涛兰州大学医学博导口硕导口杨孝朴甘肃农业大学预防兽医博导口硕导口胡永浩甘肃农业大学预防兽医博导口硕导口曾巧英教授甘肃农业大学预防兽医博导口委硕导口中国农业科学院蔡建平研究员预防兽医博导口兰州兽医研究所员硕导口中国农业科学院付宝权研究员预防兽医博导口兰州兽医研究所硕导口博导口会议记录(秘书)7掛■

6、---------------------------------

7、---------------------------------------------论文答辩时间地点2015年5月18日综合楼5楼学术报告厅摘要羊泰勒虫病是由泰勒虫属病原经硬蜱传播感染绵羊或山羊而引起的血液原虫病。尤氏泰勒虫(Theileriauilenbergi)和吕氏泰勒虫(T.luwenshuni)是引起我国羊泰勒虫病的主要病原。在本课题组前期的研究中,从尤氏泰勒虫裂殖子cDNA文库中筛选到了TuIP和Tu88两个基因,重组表达的TuIP和Tu88蛋白都能和尤氏泰勒虫的阳性血清发生反应,表现出了较好的抗原性。本研究进一步分析了这两种蛋白的功能

8、特征,并分别以TuIP重组蛋白为抗原和以TuIP基因为靶标建立了两种用于我国羊泰勒虫检测的快速诊断技术。本研究利用间接免疫荧光试验(IFA)和激光共聚焦显微镜技术研究了TuIP和Tu88蛋白在尤氏泰勒虫裂殖子中的表达和分布情况。结果表明,制备的抗rTuIP和抗rTu88兔血清均能与尤氏泰勒虫裂殖子中的天然蛋白反应,同时发现这两种蛋白都分布在尤氏泰勒虫裂殖子胞质中。利用TuIP重组蛋白完成了羊泰勒虫病免疫胶体金试纸条的研制。在硝酸纤维素膜上分别包被rTuIP抗原和抗rTuIP多克隆抗体作为检测线和质控线,胶体金-rTuIP标记物喷涂于玻璃纤维纸上制成胶体金

9、垫。将试纸条各组成成分(样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜、吸水垫)按顺序组装在PV

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