snt 2685-2010 泰勒氏焦虫检疫规范

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1、版权所有·禁止翻制、电子发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准!"!#!"#$"!%&%泰勒氏焦虫检疫规范$%&'&()*(+,'-)-.-/0-'!"#$%#&$'($(!%&%1&&1%&发布!%&&1%$1%&实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局版权所有·禁止翻制、电子发售中华人民共和国出入境检验检疫行!业!标!准泰勒氏焦虫检疫规范!"!#$%&'"$()("中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街)%号邮政编码#)(((*'网址+++,-./,012,/0电话#%&'$34*%!%&')5'*&中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷"开本&&(6)$3()!)%!

2、印张(,5'!字数)%千字$())年3月第一版!$())年3月第一次印刷印数)")%(("书号#)''(%%$$7$)%3&!定价!",##元!"!#!"#$"!%&%版权所有·禁止翻制、电子发售前!!言!!本标准按照!"!#$%$"&''(给出的规则起草#本标准是依照)*!#$&++"&'',$出入境动物检验检疫技术标准编写的基本规定%的要求&参考了-./$陆生动物手册'&''0英文版(%&%1%$2章'泰勒氏焦虫病(&以及国内外的有关泰勒氏焦虫检疫研究的最新进展进行制定#本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口#本标准起草单位)中华人民共和国重庆出入境检验检疫局*西南

3、大学#本标准主要起草人)李应国*聂福平*肖进文*王国民*王昱*聂奎*刘生峰*吴丰春*周启明#!!"!#!"#$"!%&%版权所有·禁止翻制、电子发售泰勒氏焦虫检疫规范&!范围本标准规定了泰勒氏焦虫的病原鉴定*间接免疫荧光试验*酶联免疫吸附试验*聚合酶链式反应检疫技术要求#本标准适用于牛*羊等反刍动物及其血液制品中的泰勒氏焦虫的检疫#!!规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的#凡是注日期的引用文件&仅注日期的版本适用于本文件#凡是不注日期的引用文件&其最新版本'包括所有的修改单(适用于本文件#!"!#220&!分析实验室用水规格和试验方法)*!#$2,0!梨形虫病病

4、原鉴定方法'!术语和定义下列术语和定义适用于本文件#'%&泰勒氏焦虫!!"#$%#&$'($)梨形虫纲泰勒科的一种由硬蜱传播的主要感染牛羊和其他野生动物的专性细胞内寄生原虫&主要包括环状泰勒氏焦虫'!"#$$%&#'#(*小泰勒氏焦虫'!"(#)*#(及瑟氏泰勒氏焦虫'!"+,)-,$'.(等#'%!裂殖体!$%&'()*+寄生于巨噬细胞和淋巴细胞内进行裂体增殖所形成的多核虫体&也称石榴体或柯赫氏蓝体'3456789:;<94=><8(#'%'配子体!,-./+)0&1+/泰勒氏焦虫寄生于外周血红细胞内的特定中间形体&分为逗点形的小配子体和卵圆形的大配子体#(!临床诊断(%&

5、!发病症状牛*羊等动物体表有蜱寄生或蜱叮咬的痕迹&体温升高&呈稽留热'1'?"1&?(&呼吸急促&体态消瘦#(%!!病理变化牛*羊等动物的可视粘膜黄染&有出血斑点&体表淋巴结显著肿胀#(%'!流行病学本病以硬蜱为传播媒介&通过叮咬传播&具有明显的地域性和季节性#$!"!#!"#$"!%&%版权所有·禁止翻制、电子发售$!实验室诊断$%&!病原鉴定按)*!#$2,0规定的方法进行实验和结果判定#$%!!间接免疫荧光试验$%!%&!设备*材料和试剂$%!%&%&!设备低温超速离心机'$''''@!A>B(&荧光显微镜*普通光学显微镜&冰箱'1?*C&'?*C0'?(&动物解剖用器

6、械&动物解剖台&微型混合器*振荡器及水平摇床#$%!%&%!!试剂和材料丙酮'分析纯(&甲醇'分析纯(&肝素钠或/D#E&标准阳性血清和阴性血清&由指定单位提供+异硫氰酸荧光'F.#G(标记的抗牛'羊(免疫球蛋白抗体&伊文思蓝染液&H")溶液'IJ,%&"IJ,%1(&固定液'含0'K丙酮和'%$K甲醛的H")(&'%&K的叠氮钠&'%1K台盼蓝染色液&+'K甘油H")'IJ0%'(&试剂配制见附录E#铝箔&干冰或液氮&穿刺针&微量移液器'&'#L"&''#L(&注射器和针头'+AL"$'AL(&多孔聚乙烯载片'或普通玻璃载片(#$%!%!!样品采集$%!%!%&!活体动物$

7、%!%!%&%&!血液无菌采集牛'羊(静脉血液$'AL&加入到已加有'%+AL1K/D#E溶液的抗凝血剂离心管中&并不断摇动离心管&混匀&+''@!A>B离心+A>B&吸取含有少量红细胞*白细胞的上层血浆#补加少量生理盐水&&+''@!A>B离心$'A>B#取沉淀备用#$%!%!%&%!!血清无菌采集牛'羊(静脉血液+AL&当日分离血清#将新鲜采集的血液首先在室温自然凝固&置M,?温箱$6&1?冰箱过夜&待血块全部收缩后分离血清#$%!%!%&%'!组织标本无菌穿刺&采集待检动物肩前淋巴结或腹股沟淋巴结