easyspin plus微量样品rna快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书

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1、杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外EASYspinPlus微量样品RNA快速提取试剂盒目录号：RN39目录编号包装单位RN390150次v适用范围：适用于快速提取微量动物细胞、微切割组织和易裂解动物组织等样品总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术

2、确保有效清除gDNA残留，不需要使用DNase消化，RNA可直接用于PCR，荧光定量PCR.。v试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次裂解液RLTPlus室温20ml去蛋白液RW1室温40ml漂洗液RW室温10ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-freeH2O室温10ml70%乙醇室温9mlRNase-freeH2O第一次使用前按说明加指定量乙醇PolyCarrier-20℃200μl基因组DNA清除柱和收集管室温50套RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套微量研磨杵室温3根本试剂盒在室温储存6个月不影响使用效果。-

3、5-杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。v注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf5415C或者类似离心

4、机。2.样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。如细胞处理量不超过5x105，组织不超过5mg。3.一般本试剂盒最小处理量可以处理10个以上的组织细胞。4.裂解液RLTPlus和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。5.PolyCarrier：PolyCarrier使用方法：如果起始处理量很少，我们推荐使用PolyCarrier，如果预期有较大量DNA产量，用户可以根据需要选择是否加入PolyC

5、arrier。使用时在每个样品提取所需裂解液RLTPlus中加入4μlPolyCarrier，将裂解液RLTPlus与PolyCarrier溶液充分颠倒混匀即可。也可根据样品数量，在总共需要的裂解液RLTPlus中加入总共需要的PolyCarrier混匀备用。混合液在室温24小时内稳定。6.预防RNase污染，应注意以下几方面：-5-杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com1)经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase污染。2)使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。3)RNA在裂解液RLTP

6、lus中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时，塑料器皿可在0.5MNaOH中浸泡10分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。4)配制溶液应使用无RNase的水。（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%(v/v)，37℃放置过夜，高压灭菌。）2.关于DNA的微量残留：一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到100%无残留），本公司的EASYspinPlusRNA提取产品，由于采取了本公司独

7、特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术，绝大多数DNA已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：1)选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。2)选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。3)将RNA提取物用RNase-free的DNaseI处理以提高效果。本试剂盒还可以用于DNaseI处理后的RNA清洁(cleanup),请联系我们索

8、取具体操作说明书。4)在步骤去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱RA上进行DNaseI处理。请联系我们索取具体操作说明书。v操作步骤：（实验前请先阅读注