罗格列酮对环孢素a慢性肝、肾毒性保护作用的实验研究-内科学(消化)专业毕业论文

《罗格列酮对环孢素a慢性肝、肾毒性保护作用的实验研究-内科学(消化)专业毕业论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、漂刽性声明本人声明：所星交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工{乍及致褥酶戏票。尽我所翔，论文中豫将爱翔羧标注帮致{蹇

2、之处外，其余部分不包含他人已发表或撰写过的研究成果。对本研究有所帮助或做出贡献的同志筠在论文中加以致谢。撵者签名年月匿关于学位论文使用授权说明本人了解到郑州大学有关使用和保留学位论文的相关规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被凌阅或借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容；可以采用复印、缩印或冀它手段保存学位论文；学校可依据省、部有关规定送交学位论文。俸者签名导耀签名年月

3、i；；

4、郑州人学2004届博士研究生论文罗格列酮对环孢素A慢性

5、肝、肾毒性保护作用的实验研究罗格列酮对环孢素A慢性肝、肾毒性保护作用的实验研究博士研究生：刘章锁导师：李继昌刘钟明郑州大学第一附属医院内科郑州450052摘要环孢素A(cyclosporineA，CsA)系一具有划时代意义的免疫抑制剂，其临床应用显著改善了实体器官移植的近期存活率，尽管新型免疫抑制剂不断涌现，CsA仍然是器官移植后免疫抑制和抗排斥反应的首选药物。但CsA也有很强的副作用，是限制其临床应用的主要原因，CsA慢性肝、肾毒性所致的肝肾纤维化己成为器官移植领域亟待解决的问题。罗格列酮(rosiglitazone，RGZ)属噻唑烷二酮类(thiazolidin

6、ediones，TZDs)胰岛素增敏剂，通过激活过氧化物酶体增生物激活受体Y(peroxisomeprolifemtor-activatedreceptorY，PPARY)而发挥作用。PPARv属II型核受体超家族成员，参与脂肪代谢、核酸代谢、细胞周期和细胞分化等代谢过程，亦参与炎症和细胞外基质重塑，从而在抗炎、抑制纤维化等非代谢性调节方面起着重要作用。因此，我们推测PPARY可能是防治CsA导致的肝、。肾器质性病变的一个新靶点，到目前为止，有关RZG对CsA慢性肝、肾毒性保护作用的研究国内外均未见报道。本实验采用低盐饮食(10wsaltdiet，LSD)饲养的大鼠

7、CsA慢性肝、肾毒性模型，观察R6Z对CsA慢性肝、肾毒性的保护作用，并在体外分别培养肾问质成纤维(normalratkidney，NRK)细胞和肝实质(BuffaloRatLiver，BRL)细胞，进一步监测RGZ对CsA细胞毒性的干预作用，初步探讨其内在的可能机制。本实验分为以F两个部分：郑卅l查堂!堕4届博士研究生论文罗格列酮对环孢索A慢性肝、肾毒性保护作用的实验研究第一部分罗格列酮对环孢素A慢性肾毒性保护作用的实验研究一体内实验方法1实验分组：健康雄性sD大鼠，低盐饮食(钠质量分数O．037％)饲养1周后挑选体重240～2609的大鼠随机分为：1)对照组：L

8、SD，12只；2)模型组：LSD+CsA(15mg．Kg"1．d。1)，15只；3)治疗组：LSD+CsA(15mg．Kgq．d_1)+RGZ(5rag．Kg～．d。)，15只。于实验第2周每组随机收获6只大鼠，实验第5周收获全部大鼠。2体重和生化指标检测：收获动物前测体重，用日立7600型全自动生化分析仪检测血清肌酐(serumereatinine，sCr)、尿肌酐(urinecreatinine，uCr)和血清白蛋白(Albumin，Alb)。肌酐清除率(creatinineclearance，Ccr)以sCr、uCr及24h尿量计算。3肾组织病理改变以HE切片

9、观察间质单个核细胞浸润数，并以Masson染色观察肾问质纤维化比例。4免疫组织化学染色(1mmunohistoch目nistry，IHC)检测I瑾型胶原(coUageIlm，ColIII)、转化生长因子一151(uansfomljllggrowthfactor-Bl，TGF—B1)、PPARY和Ⅱ．SMA(Ⅱ一smoothmusclea㈧的表达。5反转录聚合酶链反应(reversetmnscription-polymerasechainreaction，RT_PCR)检测TGF一151和PPARY的mRNA表达。6蛋白印迹分析(Westernblotting)检测P

10、PARY、纤维连接蛋白(fibronectin，FN)、血管紧张素II1型受体(AngiotensinIItype1receptor，ATl)和磷酸化一细胞外信号调节激酶(phosphorylation-extracellularsignalregulatedkinase，p-ERK)的蛋白表达。7放免法检测血浆和肾组织中血管紧张素II(AngiotensinII，AngII)活性。郑州大学2004届博士研究生论文罗格列酮对环孢素A慢性肝、肾毒性保护作用的实验研究结果1体重：与对照组相比，模型组大鼠体重显著下降(P