罗格列酮对rin

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1、罗格列酮对RIN【摘要】研究罗格列酮(rosiglitazone,RSG)对胰岛β细胞高糖损害的干预作用。方法采用生理浓度葡萄糖（5.5mmol/L）、生理浓度葡萄糖+罗格列酮、高浓度葡萄糖（33.3mmol/L）、高浓度葡萄糖+罗格列酮培养RIN-m细胞。以放射免疫法检测胰岛素分泌水平。以流式细胞仪及TUNEL法检测RIN-m细胞凋亡。RT-PCR方法检测胰腺十二指肠同源盒-1（pancreaticduodenalhomeoboxfactor-1，PDX-1）和胰岛素mRNA表达。结果①RIN-m细胞与33.3mmo

2、l/L的葡萄糖孵育2周后胰岛素分泌功能开始下降，细胞凋亡率增长2.7倍（P＜0.01）。而罗格列酮可以修复胰岛素的分泌，降低RIN-m细胞凋亡率。②罗格列酮上调PDX-1（1.30±0.06vs.1.61±0.10，P＜0.01）和胰岛素(1.75±0.09vs.1.98±0.11，P＜0.01)mRNA表达。结论高糖抑制胰岛β细胞胰岛素分泌，并诱导其凋亡。罗格列酮具有直接保护β细胞免于高糖毒性的作用。【关键词】罗格列酮RIN-m细胞凋亡胰腺十二指肠同源盒-1Abstract:ObjectiveToinvestigat

3、etheeffectofrosiglitazone(R)onhighglucose-inducedRIN-mcellimpairment.MethodsTheRIN-mcellsediacontainingnormalglucose(5.5mmol/L,NG),NG+R50μmol/L(NG+R),highglucose(33.3mmol/L,HG)andHG+R50μmol/L(HG+R).Insulinsecretioneasuredbyradioimmunoassay.ApoptosisofRIN-mcellsi

4、nedbyinsituTUNELmethodbinedetry.ThemRNAexpressionofpancreaticduodenalhomeoboxfactor-1(PDX-1)andinsulineasuredbysemi-quantitativeRT-PCRassay.Results(1)After2cellsto2.7foldsanddecreasedtheinsulinsecretion(P＜0.05).TheadditionofRinhibitedthehighglucose-inducedincrea

5、seofapoptosisofRIN-mcellsandimprovedtheinsulinsecretion(P＜0.05).(2)IncubationofRIN-mcellsRNAexpressionofPDX-1［from（1.30±0.06）to(1.63±0.10)，P＜0.05］andthatofinsulin［from(1.75±0.09)to(1.98±0.11),P＜0.05］.ConclusionsHighglucosecaninducecellapoptosisanddecreaseinsulin

6、secretion.R(rosiglitazone)hasdirectprotectiveeffectsonβcellsagainsttheglucotoxicity.Keycell;apoptosis;pancreaticduodenalhomeoboxfactor-1（PDX-1）持续高糖环境导致胰岛功能缺陷和胰岛数量的减少［1］.freel细胞为对象，研究噻唑烷二酮类药物罗格列酮对胰岛β细胞高糖损害的早期干预作用。1材料和方法1.1材料1.1.1细胞RIN-m细胞购自北京百星高科技术货物进出口公司（来源于ATCC

7、），系射线诱导的大鼠胰岛细胞瘤。1.1.2试剂罗格列酮纯品粉末由四川太极集团提供。无糖型RPMI1640购自Hyclone公司。胎牛血清购自加拿大PAA公司。大鼠胰岛素放免测定试剂盒购自北京科美东雅公司。RT-PCR试剂盒和TUNEL细胞原位凋亡检测试剂盒购自南京凯基生物公司。Annix-Ⅴ检测试剂盒购自Biovision公司。PCR引物由上海生工合成。1.1.3仪器MJPTC-200PCR仪（MJResearchInc，USA），凝胶成像系统（上海复日科技公司），LEICAQ细胞在无糖型RPMI1640中常规培养，以

8、约5×107/L接种培养皿中，每2天换液1次，体外培养。实验分4组，每组重复5次：①生理浓度葡萄糖（NG）组，培养液含5.5mmol/L葡萄糖；②NG+罗格列酮（NG+R）组，培养液含5.5mmol/L葡萄糖+50μmol/L罗格列酮；③高浓度葡萄糖(HG)组，培养液含33.3mmol/L葡萄糖；④HG+罗格列酮（HG+R）组，培