知母总皂苷对INS-1细胞胰岛素分泌功能的影响——毕业论文

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1、1本科毕业论文(设计)知母总皂苷对INS-1细胞胰岛素分泌功能的影响二级学院药学院专业药物化学班级学生姓名学号指导教师年月知母总皂苷对INS-1细胞胰岛素分泌功能的影响【摘要】目的：本实验考察知母总皂苷对INS-1细胞增殖的影响以及胰岛素分泌功能的影响，为后续知母总皂苷的药效机制研究提供参考。方法：通过构建正常INS-1细胞模型和胰岛素抵抗INS-1细胞模型，模拟细胞在2型糖尿病患者体内的高糖环境，采用MTT实验研究知母总皂苷对INS-1细胞增殖影响以及采用ELISA试剂盒测定知母总皂苷干预INS-1细胞的胰岛素分泌量。结果：细胞模型构建成功，知母总皂苷浓度0.3~30μg

2、/ml对INS-1细胞呈促进生长的作用，且在这个浓度内，知母总皂苷对于胰岛素抵抗的INS-1的BIS和GSIS都有较显著的增强作用。【关键词】知母总皂苷INS-1细胞2型糖尿胰岛素分泌功能EffectsofTotalSaponinsofAnemarrhenaRhizomaonInsulinSecretioninINS-1Cells[Abstract]Objective:ToinvestigatetheproliferativeeffectandinsulinsecretoryfunctionoftotalsaponinsofAnemarrhenaeRhizomaontheI

3、NS-1cells,andprovidereferenceforthefurtherstudyofthemechanismofthetotalsaponinsofAnemarrhenaeRhizoma.Methods:ThenormalandtheinsulinresistantINS-1cellmodelswereestablishedtosimulatethehighglucoseenvironmentinthepatientswithtype2diabetesmellitus.AndtheproliferationeffectoftotalsaponinsofAnem

4、arrhenaeRhizomaonINS-1cellswasmeasuredbyMTTassay.Atthesametime,determinationofinsulinsecretiontotalsaponinsofAnemarrhenaeRhizomaonINS-1cellswasmeasuredbyELISA-kit.Results:Theresultshowedthatthecellmodelwassuccessfullyestablished.AndnormalcellswerestimulatedtoproliferatewhentotalsaponinsofA

5、nemarrhenaeRhizomawasintheconcentrationof0.3~30μg/mLbyMTTassay.Meanwhile,theBISandGSISabilitiesoftheinsulinresistantcellsbyinterventedwithtotalsaponinsofAnemarrhenaeRhizomaweresignificantlyenhancedundertheaboveconcentration.[Keywords]TotalSaponinsofAnemarrhenaRhizomaINS-1CellsT2DMInsulinSe

6、cretoryFunction目录1前言12实验部分32.1实验材料32.1.1实验耗材32.1.2主要仪器和设备32.1.3主要试剂的配置32.2实验方法42.2.1INS-1胰岛β细胞的培养及冻存42.2.2MTT法测定INS-1胰岛β细胞增长曲线52.2.3MTT实验52.2.4知母总皂苷对正常INS-1胰岛β细胞胰岛素分泌功能的影响62.2.5知母总皂苷对IR-INS-1胰岛β细胞胰岛素分泌的影响62.3胰岛β细胞胰岛素分泌量的测定73结果与讨论93.1INS-1胰岛β细胞生长状况93.1.1INS-1胰岛β细胞的形态特征93.1.2INS-1胰岛β细胞的增长曲线9

7、3.2知母总皂苷对正常INS-1胰岛β细胞增殖的影响103.3ELISA试剂盒标准曲线绘制113.4知母总皂苷对正常INS-1胰岛β细胞胰岛素释放的影响123.5知母总皂苷对IR-INS-1胰岛β细胞胰岛素释放的影响133.6实验讨论143.6.1实验细胞的选择143.6.2INS-1胰岛β细胞培养时间的确定153.6.3知母总皂苷对正常INS-1胰岛β细胞的增殖作用的评价153.6.4知母总皂苷对IR-INS-1胰岛β细胞的胰岛素分泌作用评价154结束语17参考文献18致谢201前言中药知母为百合科植物知母(An