大鼠肾脏缺血再灌注损伤过程中水通道蛋白-2的表达变化-病理学与病理生理学专业毕业论文

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2、本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生虢瓣新擗鲻，南}s年易玛1日万方数据目录中文摘要··1英文摘要·4英文缩写8研究论文大鼠肾脏缺血再灌注损伤过程中水通道蛋白．2的表达变化前言日lJ舌·”·ID99材料与方法·12结果·21附图·24附表”·31讨论·33结论．．．·37参考文献38综述水通道蛋白2的研究进展42致谢．．．···51个人简历52．万方数据中文摘要大鼠肾脏缺血再灌注损伤过程中水通道蛋白一2的表达变化摘要目的：肾脏作为高灌注器官，对缺血非常敏感，容易发生缺血再灌注损伤(ischemicalreperfusioninjury,IRI)。肾IRI是缺血

3、性急性肾功能衰竭(acuterenalfailure，ARF)的重要损伤环节，其损伤的病理生理机制非常复杂，目前对肾IRI病理生理机制的研究主要集中在肾小管上皮细胞的凋亡和坏死、自由基的损伤作用、钙超载、能量代谢障碍、炎性介质和粘附分子、细胞因子等方面，而对肾脏存在的水通道蛋白(AQPs)在这一病理生理条件下的作用认识不足。为此，本研究通过建立大鼠的肾脏IRI模型观察其AQP2表达变化与肾功能的关系，探讨ARF时多尿与AQP2表达间的相关性，为临床防治ARF提供理论依据。方法：选取50只健康成年的雄性SD大鼠，分为实验组和对照组，实验组通过腹腔分离右侧肾蒂用无损

4、伤动脉夹夹闭，45min后重新恢复肾脏血液灌注来建立模型，对照组仅游离右侧肾蒂而不进行夹闭，45min后关腹。实验组分别在1天、3天、5天、7天初始并收集尿液、全血和左右侧肾脏，每组10只；对照组在1天后处死大鼠并收集标本。尿液用于检测24h尿量和尿比重；全血分离出血清后用于检测肌酐、尿素氮的变化；肾脏用于HE、免疫组化、QRT-PCR检测。通过HE染色观察肾脏的病理学改变；用免疫组织化学方法检测AQP2的表达水平及分布情况；通过实时荧光定量PCR检测大鼠肾脏内AQP2mRNA的表达水平。结果：1尿液变化：(1)24h尿量变化：缺血再灌注模型大鼠术后不同时间的2

5、4h尿量变化各不相同。术后l天模型大鼠24h尿量异常增多，到术后3天24h尿量达到最高值，而后逐渐降低，随着术后时间越长24h尿量慢慢减少，至术后第7天24h尿量恢复至正常。假手术组大鼠24h尿量比术后1天尿量少，但比7天组高。各组尿量变化均有统计学意义(P

6、氮和肌酐在术后大鼠肾脏中的表达升高，在术后第3天，尿素氮和肌酐的水平达到最高，而后逐渐降低，至术后第7天，尿素氮和肌酐的水平恢复至正常值。尿素氮在术后1天和术后5天的相比、7天和假手术1天组相比变化无统计学意义(P>0．05)。肌酐在7天和假手术1天组中相比变化无统计学意义(尸>O．05)。3病理学观察：缺血再灌注大鼠术后的肾脏HE染色可见明显肾小管变性、空泡和坏死。4免疫组化：假手术组肾脏中左右侧AQP2的表达无统计学意义pO．05)。缺血再灌注模型大鼠双侧肾脏中AQP2在术后不同时间的表达均有统计学意义(尸

7、时间中的表达有差异，术后第l天，左侧肾脏AQP2的表达异常升高(氏O．01，差异有统计学意义)，术后第3天达到最高，而后随着术后时间延长，左侧肾脏AQP2的表达逐渐降低，到术后第7天，AQP2的表达恢复至正常水平。5QRT-PCR：结果同免疫组化。假手术组大鼠肾脏AQP2的mRNA无显著性差异(尸>O．05)。模型组大鼠双侧肾脏中AQP2mRNA的表达明显，差异有统计学意义(P

8、：1缺血再灌注模型大鼠的