电针对兔膝骨关节炎滑膜hif-1α和vegf表达的影响

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1、四川医科大学硕士学位论文目录1电针对兔膝骨关节炎滑膜HIF一1a和VEGF表达的影响1．1中文摘要l1．2英文摘要4t．3前言91．4材料与方法131．5结果201．6讨{仑321．7结论411．8参考文献421．9英汉缩略词对照表492致谢503早期膝关节骨性关节炎的康复治疗进展(综述)万方数据四川医科大学硕士学位论文电针对兔膝骨关节炎滑膜F-1a和VEGF表达的影响摘要目的：膝骨关节炎(kneeosteoarthritis，KOA)是一种以关节退行性病变为主要改变的常见老年慢性骨关节疾病。据研究表明，膝关节处于生理性的低氧环境。在低氧环境中，缺氧诱导因子．1(hy

2、poxia—induciblefactor一1，HIF．1)有着重要调节功能并在缺氧状态下发挥作用，它是一种核转录因子，可调控其他基因转录，同时也是一种DNA结合蛋白。HIF．10c和HIF．1B是构成HIF一1的两个亚基，前者是HIF一1中调节缺氧特有的调控亚基。HIF一10【在关节处于严重缺氧环境时，表达增多发生累积，并由细胞浆内转移至核内，与其重要的靶基因血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)的DNA结合，导致其表达增高。随着近年来研究的不断深入，慢性滑膜炎继软骨及软骨下骨的研究之后成为KOA发病机制的研究热

3、点。手术治疗和非手术治疗是KOA主要的两大类治疗方法，其中电针治疗是临床上运用较多的一种非手术治疗方法。电针治疗将传统的针灸与电刺激结合起来，针灸可刺激KOA患者穴位，促进机体释放镇痛物质，而电流通过针刺可使肌肉收缩，调整肌张力，改善局部的血液循环，促进损伤的修复。因此，本实验应用电针治疗KOA的动物模型，通过肉眼和HE染色观察滑膜及软骨标本形态变化和病理改变，免疫组化方法比较治疗前后HIF．10【、VEGF的表达变化，在细胞和分子层面上初步探讨运用电针治疗兔KOA的疗效及可能的作用机制。方法：(1)万方数据四川医科大学硕士学位论文材料和干预措施：雄性新西兰大白兔35

4、只(5只备用)，30只随机分为三组，对照组10只，不作任何处理，模型组和电针组各10只，参照Videman法用石膏将左后肢膝关节于伸直位固定，建立兔KOA模型。电针组于造模6周后，选取兔左下肢四个穴位即足三里、梁丘、阳陵泉、血海，于每天同一时间给予电针治疗，治疗时间为30分钟，持续治疗15天，其余两组于每天相同时间固定30分钟。15天后空气栓塞法处死三组动物，手术切开左膝关节进行大体观察，再以手术刀片切取关节滑膜，制作切片。给予HE染色、免疫组化检测和光镜观察。按滑膜病理学评分标准评分，将所得评分和检测数据进行统计学分析。(2)观察指标：①大体观察三组实验兔的左膝关节

5、形态改变；②将兔左膝关节滑膜切取少许后，经固定、包埋、切片，染色后观察有无增生的滑膜细胞、纤维组织和血管，滑膜下层炎症程度情况，并按照滑膜病理学评分标准对三组标本进行评分。③免疫组织化学分析：用免疫组化试剂盒检测各组实验兔关节滑膜细胞中HIF。la和VEGF的表达情况，并在光镜下进行观察。(3)统计学处理：统计学分析软件采用IBMSPSSStatistics19．0，所得计量数值采用；±S表示，多组之间比较采用单因素方差分析，两两比较选用LSD—f检验，等级资料用秩和检验，相关性用直线相关分析，P

6、左膝关节没有出现充血及肿胀，关节液无浑浊，滑膜质地均匀，无增厚、水肿，关节软骨色泽半透明光滑；模型组9只兔关节肿胀、明显充血，关节液出现淡黄色浑浊改变，滑膜增厚明显，与股骨粘连，软骨光泽度和透明万方数据四川医科大学硕士学位论文度降低，色泽灰暗，部分软骨外表有缺损及突起，部分软骨剥脱，软骨下骨外露，关节面较粗糙；电针组仅3只可见关节腔内积液，且量较模型组少，部分滑膜表面有少许增厚，滑膜外观光滑，光泽度较对照组差但优于模型组。(2)滑膜细胞HE染色病理学观察评分：三组病理学评分比较有显著性差异(P

7、的阳性表达为棕黄色或棕褐色颗粒状物。对照组HIF．10t和VEGF呈弱阳性表达，本次实验镜下极少见黄褐色颗粒；模型组HIF—l仅和VEGF呈强阳性表达，分别于滑膜细胞，滑膜下层巨噬细胞、部分血管内皮细胞、成纤维细胞等表达，HIF—la于细胞核和细胞质中均有表达，VEGF于细胞浆中表达。电针组HIF—lot表达较模型组降低，镜下仅在滑膜细胞发现少许浅黄褐色颗粒。三组滑膜HIF．1a和VEGF表达阳性细胞率及积分光密度值比较有显著性差异(P