口蹄疫多表位dna疫苗的免疫原性和安全性分析

口蹄疫多表位dna疫苗的免疫原性和安全性分析

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1、英文缩略词焚文缩骂英文名称中文名称Ampampicillin氨苄青繇素B}IKbabyhamsterkidneycelt1ine仓鼠肾细胞系骶Abovineserumalbumin牛血清自蛋白CADcomputedaideddesign计算机辅助设计甜Leytotoxicitylymphocyte细胞毒饿淋巴细胞DAB3,3’一Diaminobenzidine二氮基联苯胺§黔Odimethylsulphoxide二甲基我酚DHasedeoxyribonuclease脱氧核糖核酸酶d躲PdATP,d辩辑dGTP,

2、dCTP翻种脱裁核瞢三磷酸EDlHethylenediaminezI二胺四zl酯tetrssee毫ieacidFIlDFoot—and-MouthDisease口蹄疫辩国¥Foot-and-mouthdiseasevirus疆缔疫病毒nhour小时#E怒S脊[2《ydroxyethyl]piperazine—铲2羟己蒺凝臻吲’N’-[2-ethanesulfonicacid]-2-乙磺酸iELISAindirectenzyme一1inked阀接酶联免疫检测immunoadsorbentassayimmunohi

3、stochemistry免疫组织化学Sinternalribosomeentrysite榱糖体进入位点interveningsequence内含予序列aKanamycine卡都霉索LyriabrothLB培养基lactatedehydrogenase乳酸脱氢酶millimol藏摩尔№溉m‰璩啪枞黼majorhistocompatibility燕要组织楣容性复合物complexmlnminute分钟MWmolecularweight分子量3一(4,5dimethylthiazo卜2~y1)2,5四甲基偶氨唑盐一d

4、iphenyltetrazoliumbromidePeRpolymerasechainreaction聚合酶链式反应PKporcinekidneycellline猪肾细胞系ODOpticaldensities光密度rpmrotationperminute每分钟转速seesecond秒SDSsodiumdodecylsulfate十二烷基磺酸钠SIstimulationindex刺激指数s.d.standarddeviation标准差Tristris(hydroxymethyl)三(羟甲基)氨基甲烷aminome

5、thaneTetramethylbenzidine四甲基联苯胺2摘要口蹄疫怒一种烈性传染瘸,通过空气传播,有广泛的动物宿主,并对人也有感染挂,楚受至《广泛关注豹久畜共悫疯之一。禳攒国际善痰羯(OIE)1996年文{串瘸定,一旦口蹄疫暴发,所有感染和相接触的幼物都必需屠杀。大量动物死亡以及因阴蹄疫丽弓

6、起蕤毪无痰情国家静赘荔壁垒将会绘经济带来沉耄豹打击。霾藏,预防是辩决润瑟的唯办法。尽管传统的灭活苗已经在很多豳家有效她控制了口蹄疫的发生,但是疫萤中灭活不完全静疯辫叉导致了疾病豹暴发。辩学家们曾试瀚霜含有病毒表彼的

7、合成肽或细菌表达的蛋自制备亚单位疫苗。这些疫苗比灭活苗安全,可以诱导实验动物产生抗体有效穗中和病海,僵不能有效她傈护家畜抵抗瘸毒酶攻击。然稀,DNA疫苗提供了一种选择,因为它的免疫原性和安众性,特别是它不存在谯何与活病毒可熊相关的危险。口蹄疫是由小RNA病毒科的口蹄痰病毒弓l起的。癍毒颗粒由60个延单位缀成,每个亚单位包含备一分予的VPI,VP2,VP3和VP4,这4个分予组成了病毒壳骚自P1。据掇邋,编码Pl和病毒蛋白酶3e的非复制型DNA疫慧可以诱导产生摭病毒免疫应答。包含病毒全基阂组的复制型DNA疫苗可以

8、在易感细胞中复制。并可以产生更强的免疫应答。然恧,疫强毒攻老实验审,嚣耪DNA疫蕊对免痰猪鳃缳轳窭只毒20%。这可能楚由于瘸毒蛋白酶3C和L抑制了宿主细胞的蛋囱合成所皴。据撤道,这两个蛋白水解酶嶷承鳃密主缎躯的翻译起始爨予elF4A或elF4G,其矮终结豢是导致缎腱臻亡。因此。科学家们将研究焦点集中猩表位DNA疫苗上。最蛾的一篇报道显示编码口蘧疫瘸毒整点1熬DNA疫蓥对猿产生T100%熬爨护。盈点l寇攒VPl上熬141AA--160AA和200AA--213AA两个B细胞表位,是VPI上的优势位点,可以诱导动物

9、产生免疫保护。豫了锭焘l戳羚,褒程基经在。墼日麓疫病毒粒子上发瑾了4个毽含8缨稔表位靛位点。似是位点l与其他4个位点组合的DNA痰苗至今没有报邋。这4个位点分别是位子VPI静位点3,包食4潞和喝驻矗;位于VP2抟经煮2,包含70矗A一78矗矗和13lAA一134AA:位于VP3的位点4,包含56AA--58AA:以及能点5,只有一个氨基酸,即VPI上豹149AA。在本论文中。我们根据G

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