清开灵注射液类过敏反应实验探究

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1、清开灵注射液类过敏反应实验探究摘要:实验采用小鼠全身类过敏试验、大鼠皮肤类过敏试验及测量血液中组胺,VEGF,TNF-a含量来研究清开灵注射液致小鼠和大鼠的类过敏反应,为其临床用药安全提供参考。小鼠全身类过敏试验:ICR小鼠随机分为生理盐水(NS)对照组、阳性药Compound48/80(Comp)25mg•kg-1组、清开灵注射液(QKLI)3,6,12mL*kg-1组(本实验所用QKLI为液体,故剂量单位选用mL•kg-1),各组分别一次性尾静脉注射含0.4%伊文思蓝(EB)的受试药,记录给药3

2、0min后耳廓蓝染阳性率,对耳廓蓝染程度进行评分,测定耳廓伊文思蓝渗出量。大鼠皮肤类过敏试验:剃除大鼠背部和脊柱两侧的毛,经尾静脉注射含0.6%EB的NS2mL•kg-1,10min后,在麻醉的情况下,沿脊柱两侧,皮内注射阴性对照NS、阳性对照Comp(0.5mg,50pL)、不同浓度QKLI(分别相当于清开灵注射液原液12.5,25,50uL),各组注射体积均为50uL。给药20min后记录各注射点的蓝斑直径。对血液中组胺,VEGF,TNF-a的影响:ICR小鼠随机分成NS组、Comp25mg•k

3、g-l组、QKLI12mL•kg-l组。各组经尾静脉注射不含EB的受试物。给药30min后,摘眼球取血,离心分离血清,采用ELISA方法测定。实验结果显示尾静脉注射QKLI3,6,12mL,kg-1后,小鼠耳廓出现不同程度的耳蓝染现象。提示QKLI可引起小鼠血管通透性增高,导致其发生类过敏反应;大鼠皮内注射QKLI(相当于原液25,50uL/点)时可导致注射点处形成与NS组相比直径较大的蓝斑(P2.3QKLI对血液组胺,VEGF,TNF-a的影响ICR小鼠随机分成3组,分别为对照组(NS)、阳性对照

4、组(Comp)、QKLI12mL*kg_l。各组均经尾静脉注射,注射的受试物不含EB。给药后30min,取血,离心分离血清,采用ELISA方法测定组胺,VEGF,TNF-a含量。2.4统计分析数据均以士s表示。采用SPSS13.0统计软件分析,反应率、耳蓝染率采用x2检验;耳廓面积评分采用非参数检验;EB渗出量,蓝斑直径,组胺,VEGF,TNF-a有研含量均采用One-WayANOVA统计分析。P100%,P究表明清开灵注射液可诱导大鼠嗜碱性粒细胞白血病细胞株RBL-2H3细胞脱颗粒释放组胺[9],

5、也可引发Beagle犬组胺升高,发生类过敏反应[10]。本试验结果显示,小鼠静脉注射QKLI后,血液组胺含量较NS组有一定增高趋势。另外,小鼠静脉注射QKLI后,可引起血液VEGF明显增高。已知组胺具有增高血管通透性的作用;VEGF也被称为血管渗透子,也具有导致血管通透性增高的作用。本研究结果表明,血管通透性增高是QKLI类过敏反应的特征之一;QKLI的类过敏反应机制与其诱导体内组胺、VEGF释放从而导致血管通透性增高有关。[参考文献][1]郝园,孔翔瑜,吴泰相.277篇1486例清开灵注射液不良反

6、应/不良事件系统评价[J].中国循证医学杂志,2010,10(2):162.[2]吴嘉瑞,张冰.清开灵注射剂致过敏性休克流行病学特点研究[J].中药新药与临床药理,2007,18(1):74.[3]RobinsonS,SivanandanI.Anaphylacticandanaphylactoidreactions[J].AnaesthIntensiveCareMed,2004,5(9):298.[4]HashimotoT,OhataH,HondaK.Lysophosphatidicacid(LPA

7、)inducesplasmaexudationandhistaminereleaseinmiceviaLPAreceptors[J].JPharmacolSci,2006,100(1):82.[5]JacquesDescotes,ChristinePayen,ThierryVial.Pseudo-allergicdrugreactionswithspecialreferencetodirecthistaminerelease[J].PerspectExpClinImmunotoxicol,2007,

8、1:41.[6]李春英,梁爱华,高双荣,等.啮齿类动物类过敏试验模型的建立[J].中国中药杂志,2011,36(4):488.[1]梁爱华,李春英,易艳,等.药物类过敏反应的临床前评价方法研究(I)一一小鼠类过敏反应评价方法的建立和验证[J].中国中药杂志,2012,37(13):1865.[2]梁爱华,赵雍,李春英,等.药物类过敏反应的临床前评价方法研究(II)一一大鼠皮肤类过敏试验[J].中国中药杂志,2012,37(13):1871.[3]郑晓亮,李钦,赵吟,等

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