北柴胡花药愈伤组织高效再生体系建立

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1、北柴胡花药愈伤组织高效再生体系建立［摘要］以花粉发育处于单核期的北柴胡花药为外植体诱导出愈伤组织，愈伤组织经多次继代培养后，置于20种含不同植物激素的分化培养基上诱导分化。分别在培养21，49d后，统计每种培养基中分化出苗数，同时观察再生植株生长状况，从中筛选出分化率高，分化速度快，且植株生长状态良好的分化培养基。结果共在19种培养基均可分化出苗，分化率在3%〜60%，大部分低于20%。在MS+KT0、5mg•L-1+鹿糖30g•L-1+植物凝胶5g•L-1培养基上分化率最高，为60%,其次为MS+ZT1、0mg•L-1+蔗糖30g-L-1+植物凝胶5g•L-1，为58%o另外，针对在

2、分化培养基中未能生根的再生芽，进行了生根培养基筛选。结果显示再生芽在生根培养基MS+蔗糖30g•L-1+植物凝胶5g•L-1和1/2MS+NAA0、5mg•L-1+蔗糖30g•L-1+植物凝胶5g•L-1中均可生根，生根率均为100%。由此建立了北柴胡花药愈伤组织高效稳定的再生体系。［关键词］北柴胡；愈伤组织；再生体系［稿件编号］2013-04-03［基金项目］国家自然科学基金项目(81072994);北京市自然科学基金项目(5102033)；中医药行业科研专项(201107011)北柴胡花药愈伤组织高效再生体系建立［摘要］以花粉发育处于单核期的北柴胡花药为外植体诱导出愈伤组织，愈伤组

3、织经多次继代培养后，置于20种含不同植物激素的分化培养基上诱导分化。分别在培养21，49d后，统计每种培养基中分化出苗数，同时观察再生植株生长状况，从中筛选出分化率高，分化速度快，且植株生长状态良好的分化培养基。结果共在19种培养基均可分化出苗，分化率在3%〜60%，大部分低于20%。在MS+KT0、5mg•L-1+鹿糖30g•L-1+植物凝胶5g•L-1培养基上分化率最高，为60%,其次为MS+ZT1、0mg•L-1+蔗糖30g-L-1+植物凝胶5g•L-1，为58%o另外，针对在分化培养基中未能生根的再生芽，进行了生根培养基筛选。结果显示再生芽在生根培养基MS+蔗糖30g•L-1+

4、植物凝胶5g•L-1和1/2MS+NAA0、5mg•L-1+蔗糖30g•L-1+植物凝胶5g•L-1中均可生根，生根率均为100%。由此建立了北柴胡花药愈伤组织高效稳定的再生体系。［关键词］北柴胡；愈伤组织；再生体系［稿件编号］2013-04-03［基金项目］国家自然科学基金项目(81072994);北京市自然科学基金项目(5102033)；中医药行业科研专项(201107011)北柴胡花药愈伤组织高效再生体系建立［摘要］以花粉发育处于单核期的北柴胡花药为外植体诱导出愈伤组织，愈伤组织经多次继代培养后，置于20种含不同植物激素的分化培养基上诱导分化。分别在培养21，49d后，统计每种培

5、养基中分化出苗数，同时观察再生植株生长状况，从中筛选出分化率高，分化速度快，且植株生长状态良好的分化培养基。结果共在19种培养基均可分化出苗，分化率在3%〜60%，大部分低于20%。在MS+KT0、5mg•L-1+鹿糖30g•L-1+植物凝胶5g•L-1培养基上分化率最高，为60%,其次为MS+ZT1、0mg•L-1+蔗糖30g-L-1+植物凝胶5g•L-1，为58%o另外，针对在分化培养基中未能生根的再生芽，进行了生根培养基筛选。结果显示再生芽在生根培养基MS+蔗糖30g•L-1+植物凝胶5g•L-1和1/2MS+NAA0、5mg•L-1+蔗糖30g•L-1+植物凝胶5g•L-1中均

6、可生根，生根率均为100%。由此建立了北柴胡花药愈伤组织高效稳定的再生体系。［关键词］北柴胡；愈伤组织；再生体系［稿件编号］2013-04-03［基金项目］国家自然科学基金项目(81072994);北京市自然科学基金项目(5102033)；中医药行业科研专项(201107011)［通信作者］*隋春，副研究员，Tel:(010)57833363,E-mail：csui@implad、ac、cn北柴胡BupleurumchinenseDC、为伞形科柴胡属植物，是《中国药典》(2010年版)规定的药用柴胡的基原之一，具有解表退热、疏肝解郁、升举阳气的功效。植物组织培养再生体系在植物尤其是珍稀

7、濒危物种的快速繁殖等方面有广泛应用，也是植物转基因研究的基础。对于北柴胡的组织培养再生体系的研究已有报道，如姚智等［1］以无菌苗为外植体诱导出了北柴胡愈伤组织，并对北柴胡愈伤组织生长和不定根诱导的条件进行了探讨；郝建平等［2］对北柴胡叶片、茎段和花芽进行了愈伤组织诱导、分化及不定芽增殖条件的研究。本实验室杨成民等［3］也诱导出了北柴胡花药愈伤。花药离体培养是植物进行单倍体诱导的有效途径之一。目前，许多药用植物已利用花药培养获得单倍体，如丹参Sa