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1、基质细胞共培养造血干细胞的应用张哲曾宪卓(通讯作者)鲁菲郭明辉董慧君(深圳爱生再生医学科技有限公司广东深圳518057)【摘要】造血干细胞具有自我更新和多向分化的潜能，能够发育为血液系统和免疫系统。造血干细胞移植是治疗白血病、贫血、恶性淋巴瘤、自身免疫性疾病的首选方案。骨髓造血微环境中的基质细胞在体外对造血干细胞均有不同程度的扩增作用，木文对基质细胞促进造血干细胞的体外扩增作用做一综述。【关键词】造血干细胞；基质细胞；共培养；体外扩增【中图分类号】R329.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2016)04-0012-02St
2、romalcellsco-cultureapplicationofhematopoieticstemcellsZhangZhe,ZengXianzhuo(correspondingauthor),LuFei,GuoMinghui,DongHuijun.AishengRegenerativeMedicineScieneeandTechnologyco.,LTD.,GuangdongProvince,Shenzhen518057,China.[Abstract】Hematopoieticstemcellswithself-renewalandm
3、ulti-directionaldifferentiationpotential,candevelopintothebloodsystemandimmunesystem.Hematopoieticstemcelltransplantation,isthetreatmentofleukemia,anemia,malignantlymphoma,thepreferredschemeofautoimmunediseases.Thestromalcellsinbonemarrowhematopoieticmicroenvironmenthasamp
4、lificationeffectonhematopoieticstemcellsinvitro.Inthispaper,thestromalcellstopromotetheroleofhematopoieticstemcellsinvitroamplificationdowerereviewed.【Keywords】Hematopoieticstemcells;Stromalcells;Atotaloftraining;Invitroamplification1.引言造血干细胞(hematopoieticstemcells,HSCs)是存
5、在于造血组织中的一群原始造血细胞，有高度的自我更新或自我复制能力［1］。造血干细胞移植技术已得到全世界的认可，是治疗血液肿瘤的主要手段。临床应用造血干细胞来源主要包括骨髓、外周血和脐带血⑵。造血干细胞体外扩增具有重要的临床和高端科研意义，造血干细胞体外扩增培养可以保证有足够多的细胞数量供于患者造血干细胞移植。造血干细胞自我更新、多向分化均依赖于其所处的微环境。微环境中的间质细胞、间质细胞分泌的细胞因子和细胞外间质及造血细胞本身均参与造血稳态的调控⑶。1977年，Dexter等报道了骨髓间质细胞作为滋养层长期培养造血干细胞是可行的［4］。这一
6、发现引发了利用不同来源的滋养层细胞扩增造血干细胞的迅速发展，如间充质细胞、永生化基质细胞、内皮细胞和混合饲养层细胞。2.骨髓间充质细胞共培养造血干细胞骨髓间充质干细胞是20世纪60年代由Friedenstein等首次分离得到的非造血祖细胞⑸，最早用于造血干细胞共培养体系。HammoudM等⑹发现低氧浓度的间充质共培养体系更能维持造血干细胞的干性，1.5%02浓度下培养10天的总细胞数、CD34+细胞和CFU-Cs分别扩增T125倍、32倍和20倍。而刘洋等构建了一种动态培养体系，将脐带血单个核细胞和包埋有兔骨髓间充质干细胞的海藻酸钠■売聚糖
7、■海藻酸钠(alginate-chitosan-alginate,ACA)微胶囊在旋转壁式生物反应器(rotatingwallvessel,RWV)中进行了7d动态悬浮共培养。补充多种生长因子(SCF,FL,TPO及IL・3)的培养液不含血清。总有核细胞、CD34+细胞以及混合集落(CFU-Cs)分别扩增了107.05±6.08,26.52±1.5和19.2±3.18倍。这种新型的动态微囊化共培养体系支持了造血干/祖细胞的体外扩增，造血干/祖细胞的分化被基质细胞抑制了，并且他免疫隔离了造血细胞和基质
8、细胞，RWV则为细胞和微胶囊提供了较好的悬浮培养环境。3•羊膜间充质干细胞共培养造血干细胞使用胎儿出生后作为医疗垃圾丢弃的羊膜几乎不受伦理学限制，材料来源丰富。章守琴等⑻从足月分
