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1、紫外分光光度法测定维生素c的含量班级:XXXX姓名:XXXX学号:XXXX前言:紫外分光光度计的工作原理基于朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律,即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比,其应用波长范围为200、400mn的紫外光区、主要由辐射源(光源)、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成。本次研究对象是维生素C,维生素C又称抗坏血酸,是一种含有6个碳原子的酸性多拜基化合物,化注结构:理化性质:无色晶体,熔点190〜192°C酸性:维生素C分子结构中的烯二醇
2、基,尤其是C3位OH由于受共辘效应的影响,酸性较强(pK刃=4.17);C2位OH由于形成分子内氢键,酸性极弱(pK=11.75)故维生素C一般表现为一元酸,可与碳酸氧钠作用生成钠盐。紫外线吸收最大值:245nmo不纯或天然品维生素c容易被空气和光线氧化,其水溶液很不稳定很快氧化成脱氢抗坏血酸,尤其是在中性或碱性溶液中很快被氧化。药理作用:体内参与糖的代谢及氧化还原过程,能促使组织产牛细胞间质(缺乏时可引起坏血病),减少毛细血管通透性,加速血液的凝眉I,刺激造血功能,促进铁在肠内吸收,促使血脂下降,增加对感
3、染的抵抗力,参与解毒功能,具有抗组织胺的作用及阻止致癌物质(亚硝胺)生成的作用。文献报道测定方法:碘量测定法,HPLC法,紫外分光光度法,差示旋光法,电化学法等一、仪器与试药紫外分光光度仪(UV-2550,日本岛津),分析天平(BS110S,梅特勒)。维生素C对照品,维生素C片(天津市新精细化工开发中心,批号:20110725)o维生素C样品,维生素片(国药集团新疆制药有限公司,批号:20150870)溶剂:0.1mol/L盐酸。二、方法与结果2.1溶液的配制2.1.1对照品溶液的配制精密称取维生素C对照品
4、10mg,加0.lmol/LHC1溶解,定容到25ml。吸取上述溶液0.5ml,加0.lmol/LHC1稀释到25ml,则对照品溶液的浓度为8ug/mlo2.1.2样品溶液的配制取10片药片于研磨中研碎,称取药粉10mg,加0.lmol/LHC1溶解,定容到25mlo吸取上述溶液0.5ml,加0.lmol/LHC1稀释到25ml02.2光谱扫描将对照品溶液在200^800nm处扫描紫外-可见光谱,记录光谱图及最大吸收波长。nm.测得最大吸收波长244nm图1紫外-可见吸收光谱图2.3含量测定2.3.1标准曲
5、线的制备分别量取贮备液5个以上浓度的对照品,置于25讷容量瓶,稀释至刻度,得到对应的浓度系列标准溶液,依次测定吸光度。以标准溶液的质量浓度(X)为横坐标,吸光度(Y)为纵坐标,绘制标准曲线,其线性方程为:Y=a+bX,相关系数为"0.999,表明维牛素C在所测定浓度范围内线性关系良好。0.7q0.60.5・0.4-0.3-0.2-0.100♦吸光度——线性(吸光度)51015浓度ug/ml表1标准曲线编号12345浓度(Ag/ml)4.8486.464&0809.69611.31吸光度0.30200.393
6、00.46130.55690.6257标准曲线相关系数lO.9986,表明样品浓度与吸光度线性关系不是很好。图2标准曲线2.3.2样品测定称取样甜适量,加0.lmol/LHC1溶液溶解,稀释后测定吸光度。将测得的吸光度带入标准曲线计算出样品溶液的浓度,后用样品溶液的浓度乘以样品的稀释倍数,计算出样品中测定成分的百分含量。表2样品测定结果(n=3)编号123吸光度0.40960.40910.4055样品浓度(pg/ml)6.9246.9146.843样品百分含量(%)77.1%80.4%81.2%百分含量平均
7、值(%)79.6%产品是否合格的判断:根据:样品实际的百分含量/样品的标示百分含量X100%得出:79.6%/84.1%X100%=94.6%药品含量占标示量的94.6%小于95%,故判断药品不合格样品含量占标示量的百分含量在95%〜105%,为合格药品,若不在此范围内,则为不合格药品。3•讨论3.1通过对实验数据的处理和计算得到该批维生素C的百分含量为79.6%,药品含量占标示量的94.6%小于95%,说明为不合格药品。3.2通过本次的实验掌握了紫外分光光度计测定吸光度以及扫描紫外图谱的使用方法。3.3学
8、会制作标准曲,并用学会用标准曲线法测定药品的含量。备注:1维生素C片的平均片重为118.85mg/片,每片含维生素ClOOmg,则维生素C的标示百分含量为84.1%。2紫外实验报告提交电子邮箱:xxxxxx