Vc含量测定90630

《Vc含量测定90630》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、方法二、紫外快速测定法一、原理：Vc的2.6—二氯酚靛酚容量法，操作步骤较繁琐，而且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响。紫外快速测定法，是根据Vc具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243nm处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中Vc的含量。二、实验器材：紫外分光光度计、离心机、分析天平、容量瓶（10ml,25ml）、移液管（0.5ml，1.0ml）、吸管、研钵。 三、实验试剂：10%HCl：取浓盐酸133ml，加水稀释至500ml。1%HCl：取浓盐酸22ml，加水稀释至100

2、ml。1MNaOH溶液：称取40gNaOH，加蒸馏水，不断搅拌至溶解，然后定容至1000ml。四、操作步骤：（一）标准曲线的制作1．抗坏血酸标准溶液的配制：用分析天平准确称取抗坏血酸10mg，加2ml10%盐酸，加蒸馏水定容至100ml，混匀。此抗坏血酸溶液的浓度为100μg/ml。2．取带塞刻度试管8支并编号，分别按表内所规定的量加入抗坏血酸标准溶液和蒸馏水。  12345678标准抗坏血酸溶液加入体积（ml）0.10.20.30.40.50.60.81.0蒸馏水加入体积（ml）9.99.89.79.69.59.49.29.0

3、总体积（ml）10.010.010.010.010.010.010.010.0抗坏血酸溶液浓度（μg/ml）1.02.03.04.05.06.08.010.0  3．消光值的测定：以蒸馏水为空的，在243nm处测定标准系列抗坏血酸溶液的消光值，以抗坏血酸的含量（μg）为横坐标，以相应的消光值为纵坐标作标准曲线。（二）样品的测定1．样品的提取：将果蔬样品洗净、擦干、切碎、混匀。称取5.00g于研体中，加入2-5ml1%HCl，匀浆，转移到25ml容量瓶中，稀释至刻度。若提取液澄清透明，则可直接取样测定，若有浑浊现象，可通过离心（1

4、0000g,10min）来消除。2．样品的测定：取0.2ml提取液，放入盛有0.4ml10%HCl的10ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度后摇匀。以蒸馏水为空白，在243nm处测定其消光值。3．待测碱处理液的制备：分别吸取0.2ml提取液，2ml蒸馏水和0.8ml1MNaOH溶液依次放入10ml容量瓶中，混匀，15min后加入0.8ml10%HCl，混匀，并定容至刻度。以蒸馏水为空白。在243nm处测定其OD值。4．由待测样品与待测碱处理样品的消光值之差和标准曲线，即可计算出样品中Vc的含量。5．也可直接以待测碱处理液为空白，测出

5、待测液的消光值，通过查标准曲线，计算出样品的Vc的含量。 四、计算                                       μ×V总                 Vc的含量（μg/g）=——————                                         V1×W总  式中：μ——从标准曲线上查得的抗坏血酸的含量（μg）              V1——测消光值时吸取样品溶液的体积（ml）              V总——样品定容体积（ml）              W总——

6、称样重量（g）