紫外分光光度法-VC含量的测定

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1、模块一紫外-可见分光光度法清远职业技术学院生物制药技术专业知识目标教学目标能力目标熟悉紫外吸收光谱定义及产生、常用术语、常见有机化合物紫外吸收光谱、定性鉴定方法；掌握紫外光谱定量分析的原理和方法，干扰的消除。绘制紫外吸收曲线；能采用紫外吸收光谱对未知试样定性鉴定，推测化合物的分子结构；能对工作波长的选择;能对数据进行处理,绘制工作曲线,确定未知含量。子项目2：用紫外分光光度计对维生素C的含量的进行测定项目5：用紫外-可见分光光度计对化妆品样品的维生素C和砷含量进行分析评价讨论有色溶液对光选择性吸收，那么一些无色的有机溶液是否对光没有吸收呢?哪些物质对紫外线有

2、吸收？请举例对紫外光区有吸收的无色透明物质都可测定,能吸收紫外光的物质:具有π电子和共轭双键的化合物.紫外分光光度法的波长范围：200nm-400nm紫外吸收曲线绘制：即用一束具有连续波长的紫外光照射一定浓度的样品溶液，分别测量不同波长下溶液的吸光度，即得到该化合物的紫外吸收曲线。茴香醛紫外吸收曲线紫外吸收曲线绘制问题:如何绘制苯的吸收曲线?紫外光谱产生的原因及其特点产生原因：处于基态的电子因为吸收能量，电子在不同轨道间发生跃迁分析特点：1、可用来定性鉴定和结构分析2、不需要加显色剂，测量简单方便3、灵敏度高，准确度σ→σ*＞n→σ*＞π→π*＞n→π*电子

3、跃迁和吸收的光的波长有何关系？？紫外光谱常用术语生色团和助色团：产生特征吸收带的具有一个或多个不饱和键和未共用电子对的基团。红移和蓝移：由于取代基或溶剂的影响造成化合物结构变化，使吸收峰向长波和短波方向移动的现象。增色效应和减色效应：由于有机化合物的结构变化使吸收峰摩尔吸光系数增加的现象。溶剂效应：由于溶剂的极性不同引起某些化合物的吸收峰的波长、强度和形状产生变化的现象。吸收带的类型K吸收带:π→π＊跃迁,吸收波长λ217-280nmR吸收带:n→π＊跃迁,吸收波长λ>270nmB吸收带:苯环震动和π→π＊跃迁,吸收波长λ230-270nmE吸收带:→π＊跃

4、迁,芳香族化合物的特征吸收带,吸收波长λ204nm乙酰苯的紫外吸收光谱思考1、庚烷、环己烷等烷烃在200-400nm内有无吸收？2、甲苯、丁二烯在200-400nm内有无吸收？3、乙醛、丙酮、乙酸乙酯在200-400nm内有无吸收？4、如果环己烷中含有少量的杂质苯，其紫外吸收曲线会怎样?请大家归纳总结可见分光光度法和紫外分光光度法的联系和区别。(定义、条件、仪器、应用)可见分光光度法紫外分光光度法定义基于物质对可见光的吸收而对物质进行定性和定量分析的一类方法基于物质对紫外光的吸收而对物质进行定性和定量分析的一类方法仪器400-780nm,钨灯,玻璃吸收池20

5、0-400nm,氘灯,石英吸收池条件有色溶液；显色剂；控制PH;绘制吸收曲线,选择最大波长减小干扰;合适的参比液绘制吸收曲线,选择最大波长；合适的参比液紫外吸收光谱的应用1、定性鉴定未知样品采用比较光谱法，标准物对照，或者标准图谱对照。2、推测结构推定化合物的共扼关系、部分骨架；区分化合物的构型；互变异构体的鉴别；3、化合物纯度的检测化合物在紫外区没有明显的吸收峰，而杂质在紫外区有较强的吸收，就可以紫外吸收曲线检测出该化合物所含的杂质。如乙醇中杂质苯测定检查了解共轭程度、空间效应、氢键等；可对饱和与不饱和化合物、异构体及构象进行判别。紫外—可见吸收光谱中有机

6、物发色体系信息分析的一般规律是：⑴若在200～750nm波长范围内无吸收峰，则可能是直链烷烃、环烷烃、饱和脂肪族化合物或仅含一个双键的烯烃等。⑵若在270～350nm波长范围内有低强度吸收峰(ε＝10～100L·mol-1·cm-1),（n→π跃迁），则可能含有一个简单非共轭且含有n电子的生色团，如羰基。有机紫外吸收光谱的解析⑶若在2５0～300nm波长范围内有中等强度的吸收峰则可能含苯环。⑷若在210～250nm波长范围内有强吸收峰，则可能含有2个共轭双键；若在260～300nm波长范围内有强吸收峰，则说明该有机物含有3个或3个以上共轭双键。⑸若该有机物的

7、吸收峰延伸至可见光区，则该有机物可能是长链共轭或稠环化合物。