水产品中孔雀石绿残留检测技术研究进展

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1、水产品中孔雀石绿残留检测技术研究进展北京维德维康生物技术有限公司中国6/vie　　随着人们对兽药残留危害的深入了解，水产品中的兽药残留已经成为食品安全领域关注的的热点和焦点。在我国，滥用、乱用限用药物和非法使用禁用药物等现象屡禁不止，这已成为导致我国水产品中兽药残留超标的主要原因，还引发了水产品消费安全问题和食品贸易争端等严重后果。　　2017年，中央把食品安全问题放在了重要位置，这体现了国家对食品安全问题的重视。习主席对食品安全工作作出了重要指示，他指出，民以食为天，加强食品安全工作，关系我国13亿多人的身

2、体健康和生命安全，必须抓得紧而又紧。2017年1月，国家食品药品监督管理总局制定了2017年食品安全抽检计划及要求，农业部制定了2017年动物及动物产品兽药残留监控计划，来确保2017年食品安全环境利好。其中，农业部印发的监控计划继续强调了对水产品中氯霉素、孔雀石绿、硝基呋喃代谢物、喹乙醇、激素类等药物及其代谢物检测的重要性，明确规定了限量标准、抽检要求、抽样流程、结果报送、查处及负责单位等要求。　　正确认识孔雀石绿　　孔雀石绿（Malachitegreen，MG）是三苯甲烷�工业染料，早在1933年就作为杀

3、菌剂、防腐剂而被广泛用于预防与治疗水产动物养殖中的水霉病、鳃霉病和小瓜虫病等。但是，孔雀石绿及其代谢物隐性孔雀石绿具有潜在“三致”作用，会对人类健康与环境造成危害，因此，美国、加拿大、欧盟等国家和地区都已经明确禁止在水产养殖中使用孔雀石绿。我国于2002年将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中，并且于2005年制定了孔雀石绿的使用标准，要求孔雀石绿在水产品中的检出值不得超过1μg/kg，这一标准比欧盟2μg/kg的标准还要严格。然而，由于孔雀石绿杀菌、防腐效果好，且价格低廉，所以一些生产者受利益

4、驱动在水产品养殖、运输及贮存中违规使用的情况依然存在。　　孔雀石绿检测方法分析　　目前，检测孔雀石绿的方法主要有高效液相色谱法（HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC）、薄层色谱法（Thin-layerChromatography，TLC）、分光光度法（ultraviolet-visiblespectrophotometry，UV-VIS）、联用检测法、拉曼光谱法（Ramanspectra）以及免疫分析法（enzyme-linkedimmunosorbentassay

5、，ELISA）等。常规的仪器分析方法虽然准确、灵敏，但其检测时间长、成本高，难以及时、有效地检测出水产品中孔雀石绿含量。随着科学技术的发展，快速检测方法以其便捷、灵敏的优势在现场检测、快速筛查等方面起着非常重要的作用。　　1高效液相色谱法　　高效液相色谱法是一种灵敏度较高、可靠性较强的方法，此法重复性好、速度快，可使许多极难分离的待测物得以分析，目前大多数水产品药物残留分析都采用HPLC法。但是，因动物体内成分复杂，并且一些杂质会干扰测定，所以应用HPLC法检测时对于样品预处理必须仔细谨慎，以提高测定准确性和

6、灵敏度。目前，已有许多研究采用HPLC对孔雀石绿进行检测，检出限一般在5～10μg/kg，而且通常需要连接紫外检测器、荧光检测器、二极管阵列检测器等仪器来提升检测精度。因此，高效液相色谱法无法满足大批量快速检测的需求。　　2拉曼光谱法　　拉曼光谱法是利用孔雀石绿在拉曼光谱上的特征峰及强度对其进行定性和半定量，这种方法检测速度比较快，一个样品从处理至检测完成只需3min，检测限约为5μg/kg。此外，表面增强拉曼散射技术在定量检测食品中化学污染物上具有更高的准确度，但水产品原料的复杂性限制了检测方法的建立。拉曼

7、光谱技术常需要优化样品前处理方法，实现水产品中目标化合物精确的分离和富集，从而实现痕量化学污染物检测，这限制了拉曼光谱技术在水产品中孔雀石绿残留量检测的广泛普及应用。　　3分光光度法　　分光光度法用于孔雀石绿检测时，检测限较高、灵敏度较低、准确性较差，目前尚无报道此方法在复杂基质中的应用，还不能用于水产品中低浓孔雀石绿及其产物的检测。国内学者曾利用分光光度法检测水产品中的孔雀石绿残留，结果显示，检出限为20μg/kg，且测定的最佳pH值为3，前处理过程比较繁琐，需用大量有机溶剂抽提和离心分离，会产生较多的有机

8、废液，并不适用于水产品中孔雀石绿残留的快速大量检测。　　4联用技术　　常用的联用技术有气相色谱-质谱联用、液相色谱-质谱联用、薄层色谱-质谱法、毛细管电泳-质谱等，可扬长避短，一般兼分离、定量和定性（分子结构信息）于一体，因而特别适用于确证性分析。但是由于联用技术需要的仪器设备昂贵，所以目前普及率不高。　　5免疫分析法　　免疫分析法是近几年发展起来的以抗原与抗体的特异性、可逆性结合反应为基础的新型分