hplc法检测水产品中孔雀石绿、结晶紫及其关联化合物的残留

《hplc法检测水产品中孔雀石绿、结晶紫及其关联化合物的残留》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、HPLC法检测水产品中孔雀石绿、结晶紫及其关联化合物的残留【摘要】目的：建立高效液相色谱法检测虾类水产品中孔雀石绿、结晶紫及其相关代谢物残留量的方法。方法：样品经乙腈提取后、浓缩、纯化，经WatersUPLCBEHC18柱(2.1mm×50mm，粒径1.7μm)分离，以0.5mmol/L乙酸胺∶乙腈=30∶70为流动相进行测定分析。结果：孔雀石绿、无色孔雀石绿的加标平均回收率分别为：90.30%～102.83%、85.10%～98.60%，RSD分别为：4.96%～6.88%、6.24%～11.

2、65%。结论：本方法操作简单，回收率稳定，灵敏度高，适用于水产品中的孔雀石绿、无色孔雀石绿残留量的检测。【关键词】高效液相法;孔雀石绿;结晶紫[ABSTRACT]Objective：Toestablishacredibleanalyticalmethodbasedonhighperformanceliquidchromatographyforthedeterminationofmalachitegreen(MG)，crystalvioletandtheirleuco-metabolitesina

3、quaticproduct.Methods：TheMG，crystalvioletandtheirleuco-metaboliteswereextractedbyacetonitrile，thenwereconcentratedandpurified.SampleswereisolatedbyWatersUPLCBEHC18column(2.1mm×50mm，diameter1.7μm)anddeterminedwith0.5mmol/Lammoniumacetate∶acet

4、onitrile(30∶70)asmobilephase.Results：ThemeanrecoveryrateofMGandleucomalachitegreenwereintherangeof90.3%-102.83%and85.10%-98.60%，respectively.ValuesofRSDwere4.96%-6.88%and6.24%-11.65%，respectively.Conclusions：Themethodissimple，sensitive，stableandsuita

5、bleforthedeterminationoftracemalachitegreenandleucomalachitegreengreeninaquaticproduct.[KEYWORDS]Highperformanceliquidchromatography;Malachitegreen;Crystalviolet孔雀石绿(Malachitegreen，MG)和结晶紫(Crystalviolet，CV)同是三苯甲烷类工业染料，具有类似的结构。在水产养殖中，孔雀石绿和结晶紫主要用来抗真菌感染

6、和杀灭寄生虫，因其价格低廉，疗效显著，曾一度在水产业中广泛应用。孔雀石绿和结晶紫在生物体内代谢为隐性孔雀石绿(Leucomalachitegreen，LMG)和隐性结晶紫(Leucocrystalviolet，LCV)。近年来，因孔雀石绿、结晶紫及其关联化合物均具有高毒素、高残留和致癌、致畸、致突变作用，中华人民共和国农业行业标准《无公害食品渔用药物使用准则》中已将孔雀石绿列为禁用药物，现在正陆续被多个欧美国家列为不得检出的禁用药物[1,2]。据文献报道[3-7]，测定水产品中孔雀石绿等常用的方

7、法有多种，如：分光光度法，薄层色谱法，液相色谱法(LC)、免疫分析法、气质联用法(GC-MS)、液质联用法(LC-MS)等。我国现行实施的关于孔雀石绿残留量的检测标准要求：孔雀石绿在水产品中的检出率不得超过1μg/kg。1　材料与方法1.1　仪器与设备高效液相色谱仪(美国Waters)，WatersUPLC配紫外和荧光检测器;MS2旋涡振荡器(德国IKA);BF2000氮气吹干仪(中国八方世纪);离心机(德国SIGMA);WatersOasisMCX色谱柱：60mg,3cc;有机微孔滤膜：

8、0.2μm。1.2　药品与试剂孔雀石绿标准品、隐性孔雀石绿标准品、结晶紫、隐性结晶紫(Sigma-Aldrich，美国);氘代隐性孔雀石绿(WITEGA，德国);甲醇、乙腈、正己烷均为色谱纯(Tediacompany，美国);其它试剂为分析纯(上海试剂厂);实验用水为超纯水;虾由三亚东吉食品有限公司提供2　实验方法2.1　标准溶液的配制2.2.1　标准贮备液的配制标准溶液：准确称取适量的孔雀石绿、隐色孔雀石绿、氘代孔雀石绿，用乙腈分别配制成100μg/mL的标准贮备液，再用乙腈稀释配