麻风树果壳多糖的提取及抗氧化作用研究

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1、麻风树果壳多糖的提取及抗氧化作用研究摘要：本实验研究了麻风树果壳多糖的最佳工艺提取工艺条件及抗氧化活性。采用麻风树果壳为原料，以多糖得率为指标，在单因素的基础上，通过正交试验，研究了提取温度、提取时间、料水比和乙醇浓度4个因素对麻风树果壳多糖得率的影响：并应用AETC法以及油脂抗氧化体系评价麻风树果壳多糖的抗氧化能力。结果表明提取温度对麻风树果壳多糖得率的影响程度达显著水平，提取时间、料水比和乙醇体积分数对麻风树果壳多糖得率没有显著的影响。麻风树果壳多糖的最佳提取工艺条件为：温度90°C,时间2.0h,,料液比1:25,乙醇体积分数为90%,在此条件下麻风树果壳多糖得率为5.44%。

2、麻风树果壳多糖具有较好的清除自由基的能力和一定的油脂抗氧化能力。关键词麻风树果壳多糖单因素试验正交试验提取工艺抗氧麻风树(JatrophacurcasL.)'又名小桐子、膏桐、芙蓉树等，为大戟科(Euphorbiaceae)麻风树属落叶灌木，是一种抗旱耐瘠的速生树种，原产美洲热带，现广泛分布于全球热带和亚热带地区，是一种多用途植物，常被用作油料、药物、饲料和染料等。在我国主要分布在云南、贵州、四川、广西、广东等省区的热带及干热河谷地区⑴。据统计，我国每年可产生麻风树果壳5285X1012Kg,传统的应用是将果壳作为普通燃料亡接燃掉，这种方法附加值不高，经济效益差，造成了极大的资源浪费

3、。由于其中含有较高含量的硫分，燃烧尾气还会对环境造成污染⑵。因此我国潜在的可利用麻风树果壳资源十分丰§O麻风树果壳除了传统的拿来燃烧，近年来更多的研究者倾向于果壳中活性物质(活性炭⑶、抑菌活性物质⑷等)、生物柴油等方面的研究。但关于麻风树果壳的多糖提取及其抗氧化活性的研究鲜有报道。多糖是自然界中广泛存在机体中的生物聚合物。多糖是由十个以上乃至几十个单糖通过糖昔键相连形成的线性或支链的高聚物，是所有生命有机体的重要组成部分，同维持生物机能密切相关。据相关研究［5,6］表明，从天然产物中提取出来的多糖能参与生物体内细胞中的各种活动，具有重要与特殊的生理活性。在提高人体免疫力和抗衰老⑺8］

4、、抗肿瘤、抗病毒［9,10］、抗感染、抗凝血、抗氧化［11］、等方面都表现出显著的药理作用与药用疗效［12］。多糖的抗氧化研究［13］表明，多糖的抗氧化性可能是多糖抗肿瘤、抗衰老、抗感染等其他活性的重要原理之一。因此，近年来提取植物中的多糖受到人们的关注［14J5］。本实验采用传统的水侵醇沉的方法提取麻风树果壳多糖，对其提取工艺条件进行优化，并对所提取多糖•OH清除能力、DPPH•清除能力及还原能力进行研究［16］,以其为麻风树果壳多糖的利用提供理论依据。1材料与方法1.1材料与试剂麻风树果：购于将麻风树果壳和麻风树籽分离，并对果壳进行挑选，弃去腐烂及其他杂质，经热风干后粉碎，过60

5、冃筛,放置于干燥箱里备用。无水乙醇、丙酮、乙醍、葡萄糖、苯酚、浓硫酸、Vc、邻二氮菲、PBS缓冲液（pH二7.4）、过氧化氢、DPPH溶液、PBS缓冲液（pH二6.6）、铁氤化钾、三氯乙酸、三氯化铁1・2仪器与设备电了恒温不锈钢水浴锅［上海宜昌仪器纱筛厂］;SHB-B95型循环水式多用真空泵［郑州长城科工贸有限公司］;粉碎机［绍兴市公路仪器设备有限公司］;TGL-16M高速台式冷冻离心机［湖南湘仪实验室仪器开发有限公司］;DHG-9030电子恒温鼓风干燥箱［上海贺徳实验设备有限公司］;721可见分光光度计［上海菁华科技仪器有限公司］。1.3方法1.3.1麻风树果壳多糖提取参考已经报道

6、的文献刀，准确称取过60冃筛的麻风树果壳粉末，按一定的提取时间、提取温度、料液比侵提后，冷却抽滤合并上清液；上清液经加热浓缩到其体积基本不变后，加入一定量的乙醇进行醇沉，4°C静置沉淀过夜，次日离心（8000r/min）,将沉淀用少量的无水乙醇、丙酮、无水乙瞇依次洗涤，55°C真空干燥后即为麻风树果壳多糖。1.3.2多糖含量的测定(1)标准曲线的绘制：采用苯酚-硫酸法［18］：精密称取20mgl05°C干燥至恒重的标准葡萄糖，用蒸懾水定容至100mlo取一定量的标准葡萄糖稀释成浓度为30、60、90、120、150ug/ml的溶液，分别精密吸取0.6ml,加入50g/l苯酚1.2ml

7、混合后迅速加入6ml浓硫酸，然后混合均匀，放置于30°C水浴30min,在波长为490nm处测定吸光值,空白对照以蒸憾水代替糖溶液。以浓度(C)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标，制作标准曲线。(2)多糖含量的测定：称取粗多糖样品0.016g,用蒸憾水溶解并定容至10ml,然后精密吸取0.6ml按(1)中方法操作，在波长490nm处测吸光度值，根据标准曲线，计算多糖的浓度，再计算求得样品中多糖的质量和含量。1.3.3多糖得率和含量的计算［19-20］麻风树果壳