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《印度块菌粗多糖的提取及抗氧化活性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、山西大学学报(自然科学版)34(1):137~142,2011JournalofShanxiUniversity(Nat.Sci.Ed.)文章编号:02532395(2011)01013706*印度块菌粗多糖的提取及抗氧化活性研究1222*1*曹晋忠,魏磊,苏红,范黎,李玉(1.吉林农业大学菌物研究所,长春130118;2.首都师范大学生命科学学院,北京100048)摘要:采用正交试验研究了热水浸提法提取印度块菌(TuberindicumCooke&Massee)子实体粗多糖(TICP)的最优工艺,根据方差
2、分析结果确定了热水浸提法的最优工艺为:料液比115,提取时间120min,提取温度100,提取2次,多糖提取率为6.7902%.用95%乙醇对粗多糖进行醇沉,然后利用总抗氧化能力(TAOC)测定法、羟基自由基(OH!)清除法、铁离子螯合能力及测定还原能力等方法对上述印度块菌粗多糖的抗氧化活性进行评价,结果显示块菌粗多糖对羟基自由基的清除活性最高,其EC50值为0.26mg/mL,其次为还原能力和铁离子螯合能力,其EC50值分别为1.15mg/mL、2.80mg/mL,同时块菌粗多糖具有较好的总抗氧化能力(TAOC)
3、,当浓度为20mg/mL时,其总抗氧化能力为72.06U/mL.关键词:印度块菌;多糖;抗氧化中图分类号:Q949.91;S646文献标识码:A块菌(Tuber)属于珍稀食、药用真菌,在我国主要分布于云南和四川.块菌除本身味美外,且营养丰富,并含有多种生物活性物质.如雄烷醇能调节女性月经周期,神经酰胺作为一种天然的人体皮肤保湿成分[1]可用于化妆品的开发,块菌多糖具有抗肿瘤和调节免疫功能的作用.机体在正常生物代谢过程中会产生超-氧阴离子(O2)、过氧化氢(H2O2)、羟基自由基(OH!)等,进而导致机体脂质过氧
4、化,对脂类、蛋白质、核酸[2][3]造成损害,引发机体衰老以及癌症、动脉粥样硬化、风湿性关节炎等疾病.研究发现,许多食用菌都具有[4]各种生理活性,如抗癌、抗氧化、抗炎以及产生抗生素等,其中抗氧化活性可能与菌体的多糖含量有关.本研究对印度块菌(TuberindicumCooke&Massee)粗多糖的热水浸提工艺进行了研究,并测定其体外抗氧化活性,以期为块菌多糖的研究、开发和应用提供基础数据.1材料与方法1.1材料冻干、成熟的印度块菌.新鲜的印度块菌购自云南当地农贸市场,由首都师范大学生命科学学院范黎老师鉴定.1.2
5、主要试剂和仪器Ferrozine、VC等购自Sigma公司;羟基自由基测定试剂盒、总抗氧化能力(TAOC)测定试剂盒等购自南京建成生物工程研究所;EDTA二钠盐、氯化亚铁、氯化铁、硫酸亚铁、乙醇、甲醇、葡萄糖、冰乙酸、浓硫酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠等购自北京化工厂.所有试剂均为分析纯.紫外分光光度计(Lambda35,PerkinElmer),冷冻干燥仪(Wizard2.0,VirTis),旋转蒸发仪(HeizbadHBdigit,Heidolph),台式高速离心机(LabwayScienceRotina35),恒温
6、水浴锅(HW.SY21K4型,北京长风仪器仪表公司),鼓风干燥箱(ZRDA7140型,上海智城分析仪器制造有限公司),循环水式多用真空泵(SHBB95型,河南巩义市英峪予华仪器厂).*收稿日期:20100511;修回日期:20100830基金项目:国家自然科学基金(30770005;30870008)作者简介:曹晋忠(1963-),男,山西太原人,博士研究生,从事菌物分类学及菌物次生代谢产物研究.通讯作者:Email:fanli@mail.cnu.edu.cn;yuli966@126.com138
7、山西大学学报(自然科学版)34(1)20111.3印度块菌多糖的提取及测定称取冻干后的块菌子实体20g,粉碎至100目,加15倍蒸馏水,于100浸提120min.抽滤,将滤渣加入第1次水量的80%,同样条件再浸提1次,抽滤后合并两次滤液,真空浓缩后加入3倍体积的95%的乙醇[5]过夜醇沉,70烘干后得到块菌粗多糖(Tuberindicumcrudepolysaccharide,TICP).采用苯酚硫酸法测定样品中多糖含量.将干燥的待测粗多糖定容至100mL,准确吸取1mL该溶液定容至
8、100mL,取0.6mL稀释液加入蒸馏水1.4mL、苯酚液1mL、浓硫酸5mL.振荡,沸水浴10min,迅速冷却,然后在490nm波长下比色,所得的仪器读数即为样品中多糖含量.多糖提取率(%)=多糖含量(g)/原料干重(g)∀100%.1.4印度块菌粗多糖的热水浸提工艺1.4.1料液比单因素优化在90,分别按照料
